目的：建立腹水草茎叶的HPLC指纹图谱和同时测定咖啡酸、香草酸、阿魏酸、原儿茶酸、木犀草素和金合欢素含量的方法，为腹水草药材的质量控制提供可靠参考。方法：采用Zobax C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相，进行梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1，检测波长230 nm，柱温30℃，建立腹水草茎叶指纹图谱，使用中国药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”确定共有峰，计算相似度；并对咖啡酸、香草酸、阿魏酸、原儿茶酸、木犀草素和金合欢素的含量测定方法进行方法学验证。结果：10批不同产地腹水草茎叶指纹图谱中有27个共有峰，与对照品比较，指认其中咖啡酸、香草酸、阿魏酸、原儿茶酸、木犀草素和金合欢素6个成分，10批样品的相似度均在0.900以上；上述6个成分含量测定方法经验证，线性范围分别为3.0~60.0、10.0~200.0、5.0~100.0、10.0~200.0、10.0~200.0和5.0~100.0 μg·mL^-1，平均加样回收率分别为102.0%、102.8%、101.2%、97.5%、98.0%和101.1%。10批腹水草样品中咖啡酸、香草酸、阿魏酸、原儿茶酸、木犀草素和金合欢素含量分别在22.1~38.4、39.9~58.8、23.8~59.1、43.6~68.0、53.8~89.6、36.6~62.7 μg·g^-1范围内。结论：本文所建立的腹水草茎叶HPLC指纹图谱及主要成分含量测定方法，可用于腹水草药材质量控制等研究。