目的: 建立一种快速、灵敏的LC-MS/MS法测定人血浆中的辅酶Q10。 方法: 血浆样品经正己烷液-液萃取2次,以甲醇为流动相,Capcell Pak C18柱(35 mm×2.0 mm,5 μm)进行分离,采用大气压化学电离源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 864→197(辅酶Q10)和m/z 796→197(内标辅酶Q9)。 结果: 测定血浆中辅酶Q10的线性范围为10.0~1000 ng·mL-1,定量下限可达10.0 ng·mL-1,日内、日间精密度(RSD)均小于8.9%,准确度(RE)在-0.9%~3.8%之间,单个样品分析时间为4.5 min。 结论: 本方法分析测试时间短,灵敏度较高,血浆用量少,适用于人血浆样品中辅酶Q10的测定和药物动力学研究。
目的: 用LC/MS/MS方法研究受试制剂是否具有突释现象和缓释行为,并比较受试制剂和参比制剂的相对生物利用度。 方法: 阿奇霉素的血药浓度测定采用LC/MS/MS法测定,色谱柱:Gemini 3 μm,C6-Phenyl,100 mm×3.00 mm,100 ,流动相为0.1%甲酸水溶液-甲醇(30∶ 70),流速0.35 mL·min-1,进样量5 μL。9只Beagle犬口服受试制剂、参比制剂和阿奇霉素普通片剂,每只动物2.0 g。 结果: 血浆标准曲线在0.05~10 μg·mL-1范围内线性良好(r=0.9991),血浆中最低限量0.05 μg·mL-1,绝对回收率80.0%~95.5%,相对回收率94.6%~101.2%,日内、日间RSD小于10%。血浆中阿奇霉素的Tmax分别为(3.17±2.70) h,(2.39±2.29) h,(0.50±0.22) h,Cmax分别为(3507.17±1811.27) μg·L-1,(3582.53±949.30) μg·L-1,(9668.10±3844.02) μg·L-1;t1/2 分别为(56.01±23.07) h,(53.49±20.18) h,(44.29±12.07) h;用梯形法计算,AUC0-t 分别为(67626.24±42712.70) μg·h·L-1,(71198.01±19516.89) μg·h·L-1,(60141.05±18383.66) μg·h·L-1;AUC0-∞分别为(86827.84±61174.14) μg·h·L-1,(87291.59±27710.25) μg·h·L-1,(69769.39±23170.33) μg·h·L-1。以受试制剂和参比制剂的AUC0-t计算,阿奇霉素的相对生物利用度平均为113.03%±41.60%(n=6)。 结论: 该法灵敏、准确,适合测定阿奇霉素血药浓度;受试制剂阿奇霉素缓释干混悬剂具有明显的缓释特征,与参比制剂相比,具有生物等效性。
目的: 建立同时测定家兔体内CYP450 3种探针药物氨苯砜、咖啡因、美托洛尔含量的方法。 方法: 用反相高效液相色谱法测定,选用Diamonsil C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(20∶ 80∶ 0.06∶ 0.1);检测波长:氨苯砜为295 nm,咖啡因为275 nm,美托洛尔为225 nm;流速为1.5 mL·min-1;柱温为35 ℃。 结果: 在上述色谱条件下,3种探针药物可以很好地分离和测定,氨苯砜、咖啡因和美托洛尔的线性范围分别为0.050~62.5 μg·mL-1(r=0.9999),0.10~40.0 μg·mL-1 (r=0.9996),0.10~25.0 μg·mL-1 (r=0.9999);方法回收率分别为:氨苯砜85.6%~101.3%,咖啡因96.1%~112.8%,美托洛尔93.3%~102.7%。 结论: 该方法简便快速,结果准确,可用于同时测定家兔体内氨苯砜、咖啡因和美托洛尔的含量,为研究受试药物对CYP450各亚酶的调控作用及相关研究提供了分析测定方法。
目的: 建立LC-ESI-MS法测定大鼠体内的同型半胱氨酸(HCY)。 方法: 色谱柱为Zorbax SB-C18(2.1 mm×100 mm,3.5 μm),乙腈-水(40∶ 60)为流动相,流速为0.3 mL·min-1,柱温为30 ℃。ESI(电喷雾离子源),正离子检测,雾化气压力设为172.375 kPa;干燥气(N2)流速设为7 L·min-1,干燥气温度设为350 ℃, +,m/z 136。 结果: HCY在2.5~100 μmol·L-1范围内线性关系良好,线性方程C=0.0079X-8.1011,r=0.9981,最低检测限为1 μmol·L-1。HCY日内及日间精密度RSD均低于6%。12周龄的Wistar-Kyoto大鼠,自发性高血压大鼠体内HCY的浓度分别为(9.57±3.49) μmol·L-1和(11.59±3.13) μmol·L-1。 结论: 该法操作简便、快速,灵敏度高,可用于大鼠体内HCY的检测。
目的: N3-邻甲苯甲酰基-氟尿嘧啶(N3-o-toluyl-fluorouracil,TFU)是N1-乙酰基、N3-邻甲苯甲酰基-氟脲嘧啶(ATFU,阿托氟啶)降解的次级化合物和5-氟脲嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的前体化合物。本研究观察了TFU对S180小鼠肉瘤的生长抑制作用,利用高效液相色谱(HPLC)法对TFU的代谢进行了检测。方法: 以昆明系小鼠腋部皮下接种S180小鼠肉瘤细胞株,接种后的小鼠以不同剂量TFU每天灌胃,连续10~14 d。末次给药48 h后,处死动物,用本研究所建立的HPLC方法对TFU的代谢进行了检测,测定了血浆和不同组织(肝、肺、瘤)中TFU和5-FU的浓度。结果: 分别以 50,100 和 200 mg·kg-1剂量的TFU,对小鼠连续灌胃10~14 d后,TFU对S180小鼠肉瘤的抑制作用分别达到38.99%,51.83% 和 60.68%,肿瘤细胞生长表现为剂量依赖性。HPLC法检测结果显示,末次给药48 h后,在肝中仍可检测到较高浓度的5-FU,这说明TFU主要蓄积在肝中,在酶的作用下缓慢代谢。其次分布在瘤组织中,在肺组织和血浆中的浓度最低。结果显示TFU的代谢产物可以优先作用于肿瘤细胞,其代谢产物5-FU的分布特点也说明了TFU较高的抗肿瘤活性和较低的机体损害。结论: 研究结果显示TFU是5-FU前体药物中具有进一步研究价值的抗癌药物。
目的: 用酶解法解离茴三硫体内代谢物对羟基苯基三硫酮,建立HPLC方法检测其含量,研究茴三硫体内代谢物对羟基苯基三硫酮在人体内的药代动力学,并评价茴三硫片剂的生物等效性。 方法: 用β-葡糖苷酸酶酶解脱去葡萄糖,使血浆中茴三硫代谢物对羟基苯基三硫酮游离后用HPLC-UV法测定其血浆中浓度;固定相:C18色谱柱,流动相:甲醇-水(80∶ 20,v/v),流速:1.0 mL·min-1,柱温:30 ℃,检测波长:346 nm,进样量:20 μL。运用DAS 2.0软件处理血药浓度数据和计算参数,并进行统计学分析。 结果: 建立的HPLC法测定血浆中对羟基苯基三硫酮浓度,专属性强,线性范围为20~1500 ng·mL-1, r=0.9992,最低检测限为10 ng·mL-1;提取回收率为32.2%~44.0%,方法回收率为102.5%~107.0%,日内、日间RSD均小于9%。 结论: 本项研究所用方法对羟基苯基三硫酮血药浓度检测灵敏度高、特异性强、重复性好,测定结果可靠,统计学分析表明2种制剂的主要药代动力学参数无显著性差异,具生物等效性。
目的: 建立测定附子理中丸中新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的液相色谱-质谱分析方法。 方法: 采用Polaris C18-A(50 mm×2.0 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(90∶ 10),流速0.2 mL·min-1,采用电喷雾电离源正离子质谱检测。 结果: 新乌头碱、乌头碱和次乌头碱浓度分别在0.232~1.392 μg·mL-1(r=0.9997)、0.102~0.612 μg·mL-1(r=0.9994)和0.241~1.446 μg·mL-1(r=0.9996)范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)分别为98.7%(RSD=2.9%)、98.6%(RSD=3.0%)和98.1%(RSD=3.2%)。 结论: 该法是一种快速、灵敏、准确的分析方法,可以为附子理中丸的质量控制提供科学依据。
目的: 将中空纤维膜液相微萃取(HF-LPME)与气相色谱-电子俘获检测(GC-ECD)技术相结合,建立了高灵敏度测定天麻中五氯硝基苯农药残留的新方法。 方法: 对影响萃取富集效率的实验条件进行优化。采用聚丙烯中空纤维膜,以正辛醇为萃取溶剂,萃取溶剂用量20 μL,萃取温度30 ℃,萃取时间30 min,搅拌速率为500 r·min-1,萃取后取2.0 μL有机溶剂直接进样进行气相色谱分离检测。采用DB-1701弹性石英毛细管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm),程序升温,进样口温度:220 ℃;ECD检测器温度250 ℃,载气,氮气。 结果: 该方法对五氯硝基苯的富集倍数为125倍。五氯硝基苯质量浓度在2~60 ng·L-1 范围内,与峰面积之间有良好的线性关系,相关系数均大于0.99,检测限(S/N=3)为1 ng·L-1,实际样品中的加标回收率为90.3%~97.2%,相对标准偏差为2.5%~6.1%。 结论: 本方法灵敏、简便,适用于中药材中五氯硝基苯农药残留的检测。
目的: 建立RP-HPLC测定水黄皮药材中水黄皮素含量的方法。 方法: 以Hypersil-C18 ODS 2(4.6 mm×150 mm,5 μm)为色谱柱,0.1%甲酸溶液(三乙胺调pH=3.0)-乙腈(60∶ 40)为流动相,流速0.8 mL·min-1,检测波长258 nm,柱温35 ℃。 结果: 水黄皮素进样量在0.116~0.696 μg范围内线性良好(r=0.9999,n=6),平均回收率(n=9)为99.3%。 结论: 本方法准确、简便,重复性好,可用于水黄皮药材中水黄皮素的含量测定。
目的: 对京大戟中大戟二烯醇进行含量测定。 方法: 采用反相高效液相色谱法,使用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C8(150 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(92∶ 8),流速1.0 mL·min-1,检测波长210 nm,柱温25 ℃。 结果: 大戟二烯醇进样量在1.388~10.41 μg范围内有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率(n=6)为97.1%(RSD=1.7%)。 结论: 本方法能够准确测定京大戟中大戟二烯醇的含量。
目的: 对中国药典新增药材辣椒质量标准进行研究。 方法: 建立药材的来源、性状、显微特征和辣椒素TLC鉴别;采用HPLC方法,色谱柱为DiamonsilTM C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)柱,流动相为甲醇-水(50∶ 50),流速1.0 mL·min-1,检测波长280 nm,柱温40 ℃,测定辣椒中辣椒素和二氢辣椒素的含量并制定含量限度。 结果: 辣椒的显微鉴别特征性强;辣椒素TLC色谱斑点清晰;辣椒素、二氢辣椒素进样量分别在0.0542~1.3552 μg(r=0.9999)和0.0198~0.4952 μg(r=0.9999)范围内呈良好的线性关系,平均回收率(n=9)分别为102.0%和98.38%,二者的总平均回收率(n=9)为100.8%。 结论: 本标准方法简便、可靠、准确,可用于辣椒药材的质量控制。
目的: 建立磷酸泰乐菌素脂质体中药物含量及包封率测定的RP-HPLC法。 方法: 采用Kromasil C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相:0.05 mol·L-1高氯酸钠溶液(用1 mol·L-1盐酸调节pH至3.0±0.1)-乙腈(65∶ 35),流速:1.0 mL·min-1,紫外检测波长:290 nm,柱温:30 ℃,进样量:20 μL。采用低温高速离心法(4 ℃,12000 r·min-1,45 min)分离磷酸泰乐菌素脂质体与游离药物,测定包封率。 结果: 在所选定的色谱条件下,磷酸泰乐菌素各组分峰与辅料及溶剂峰分离良好,磷酸泰乐菌素在5.0~320.0 μg·mL-1浓度范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9999,n=7),回收率在99.9%~100.1%之间(n=5),日内RSD及日间RSD均小于2%(n=5)。低温高速离心法对游离药物的回收率为99.4%~101.4%,RSD均小于2%(n=3)。 结论: 该方法准确可靠、方便快捷,可用于磷酸泰乐菌素脂质体中药物含量及包封率的测定。
目的: 克服现有色谱流动相易使分析系统堵塞等问题,建立新的盐酸多西环素及其制剂含量和有关物质测定的HPLC方法。 方法: 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以醋酸盐缓冲液 10∶ 1),用冰醋酸或氨水调节pH至8.8]-乙腈(85∶ 15)为流动相;柱温35 ℃;检测波长280 nm,流速1.0 mL·min-1;进样体积20 μL。 结果: 新建色谱条件克服了堵塞问题,可使多西环素与相邻杂质基线分离,在0.07~122.556 μg·mL-1范围内线性良好(r=1.0),检测限和定量限分别为0.016和0.063 μg·mL-1,方法精密度良好,片剂和胶囊的回收率分别为99.2%和99.4%,盐酸多西环素在0.01 mol·L-1的盐酸溶液中24 h内稳定。该色谱条件微调后,可用于土霉素、四环素、金霉素、米诺环素和美他环素的含量和有关物质的测定。 结论: 新建色谱条件优于中国药典2005年版、美国药典32版、英国药典2008年版、欧洲药典6.0版和日本药局方XV版,被中国药典2010年版采用。
目的: 检测阿托伐他汀钙原料有关物质的含量及光学纯度。 方法: 采用反相高效液相色谱法,测定阿托伐他汀钙有关物质的含量。色谱条件:色谱柱为Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:乙腈-四氢呋喃-0.05 mol·L-1枸橼酸铵溶液 (0.05 mol·L-1枸橼酸溶液用氨水调节pH至4.0) (42∶ 3∶ 55);同时采用正相高效液相色谱法测定阿托伐他汀钙的光学纯度,色谱柱为CHIRALPAK AD-H(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相:正己烷-乙醇-冰醋酸(90∶ 10∶ 0.3),检测波长均为244 nm,柱温为35 ℃。 结果: 检测3批阿托伐他汀钙样品中双胺、脱氟体、非对映异构体和对映异构体含量分别为0.05%~0.09%,0.16%~0.20%,0.03%~0.05%,0.18%~0.24%。 结论: 该方法简单、稳定、可靠、专属性强,可用于阿托伐他汀钙有关物质的检测,为阿托伐他汀钙的质量控制提供了新方法。
目的: 建立氟曲马唑的HPLC测定法及有关物质检查方法。 方法: 采用大连依利特C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(0.05 mol·L-1磷酸缓冲盐,用磷酸调节pH=7.0)(75∶ 25),流速为1.0 mL·min-1;检测波长220 nm;柱温为30 ℃,进样量为20 μL。 结果: 在该色谱条件下,氟曲马唑的浓度在10.47~670 μg·mL-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9995,平均回收率为99.3%(n=9),最低检测限为0.1 μg·mL-1。 结论: 所建立的方法简便,专属性、重复性好,可用于氟曲马唑及有关物质的测定。
目的: 建立高效液相色谱法检测羟尼酮原料及其胶囊的含量和有关物质。 方法: Waters Sunfire C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.05%三乙胺缓冲溶液(冰醋酸调pH为6.5)(50∶ 50)为流动相,流速1 mL·min-1;检测波长225 nm。 结果: 羟尼酮浓度在1~600 μg·mL-1范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=1.000,n=5);平均回收率(n=3)分别为100.6%,99.5%,99.2%;最低检测限为0.1 ng。 结论: 本法简单、快速,专属性强,适用于测定羟尼酮及其胶囊的含量和有关物质。
目的: 建立快速、简便、准确的瑞斯托菌素的高效液相检测方法,在瑞斯托菌素菌种选育、有效组分的分离纯化等研究工作中及时提供可靠的,有指导意义的检测数据。 方法:采用 Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,0.1%三氟乙酸-甲醇(30∶ 70)为流动相,流速0.5 mL·min-1,柱温45 ℃,紫外检测波长254 nm的色谱条件。 结果: 瑞斯托菌素在0.01~2.5 mg·mL-1浓度范围呈良好的线性关系,r=0.9987;最低检测限5 ng,最小定量限20 ng;精密度RSD=0.04%。 结论: 该方法测定瑞斯托菌素样品的含量准确可靠,在分离纯化过程中也可以有效地检测和控制瑞斯托菌素的纯度。
目的: 建立氨基酸含量的柱前衍生化HPLC的定量测定方法。方法: 采用OPA-FMOC柱前衍生化法测定复方氨基酸注射液中各个氨基酸的含量并用内、外标法进行了方法比较。结果: 表明2种方法在0.025~2.5 μmol·mL-1范围内线性关系良好,相关系数在0.9994~1.000之间,平均回收率96.2%~103.6%,RSD<1.4%(n=6),重复性RSD为0.08%~2.82%(n=6),最低定量限0.2~1.1 ng。结论: 该方法准确、灵敏、简便。内、外标法均适用于各个氨基酸的含量测定。
目的: 建立一种快速灵敏的同时测定DNA酶解液中5'-腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP)、5'-胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTMP)、5'-鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP)、5'-胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP)的超高效液相色谱质谱(UPLC-MS)方法。 方法: 采用UPLC-MS色谱质谱系统,安捷伦ZORBAX SB Aq-C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以20 mmol·L-1醋酸铵缓冲盐溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱(0~10 min,B相从5%→10%;10~11 min,B相从10%→90%;11~15 min,B相为90%;15~16 min,B相从90%→5%;16~18 min,B相为5%),流速0.6 mL·min-1;在电喷雾正离子模式下,采用多反应监测模式(MRM)选择性监测5'-腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP)(m/z 332.1/ 81.1和332.1/136.2)、5'-胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTMP)(m/z 323.1/ 81.1和323.1/207.2)、5'-鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP)(m/z 348.1/152.1 348.1/313.3)和5'-胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP)(m/z 308.1 /81.1和308.1 /112.1)。 结果: 5'-腺嘌呤脱氧核苷酸(dAMP)、5'-胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTMP)、5'-鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGMP)和5'-胞嘧啶脱氧核苷酸(dCMP)的线性范围分别为34.8~1160.0 ng· mL-1(r=0.9997),32.8~820.0 ng· mL-1(r=0.9997),60.0~1200.0 ng· mL-1(r=0.9990),37.6~940.0 ng· mL-1(r=0.9998),检出限分别为9.4,8.48,11.43,10.35 ng·mL-1;定量限分别为31.35,28.28,38.10,34.50 ng·mL-1;样品加标回收率为71.1%~117.2%;日内、日间精密度试验的RSD为0.94%~4.99%。 结论: 该方法快捷,灵敏度高,专一性强,重复性好,可用于DNA酶解液中4种脱氧核苷酸的分析。
目的: 建立脂肪乳注射液及卵磷脂中溶血磷脂酰胆碱(LPC)的薄层色谱检查方法。 方法: 样品用正庚烷-异丙醇(1∶2)溶解后直接点于硅胶G薄层板上;展开剂为氯仿-无水乙醇-三乙胺-水(10∶ 13∶ 5∶ 3),显色剂为Dittmer-Lester试剂;薄层扫描条件:双波长锯齿扫描,测定波长680 nm,参比波长400 nm,线性参数SX=3,狭缝宽度0.4 mm×0.4 mm,灵敏度中等。 结果: 在上述条件下,样品中LPC斑点与其他磷脂斑点分离良好,LPC在0.4~10 μg范围内线性良好,r=0.9997,平均加样回收率为99.4%,RSD=2.1%。 结论: 本法简便、快速、成本低,可用于脂肪乳注射液及卵磷脂中LPC的常规检查。
目的: 建立鸡蛋粉中12种磺胺类药物残留量的测定方法。方法: 样品用乙腈提取,正己烷脱脂,抽干,盐酸酸化,过Waters Oasis MCX小柱净化,用甲醇淋洗杂质,6%的氨化甲醇溶液洗脱磺胺类药物,洗脱液氮气吹干,流动相溶解后上HPLC仪分析。采用Inertsil ODS-3(250 mm×4.6 mm,5 μm)柱分离,以乙腈-水-冰醋酸 (23∶[KG-*2]77∶[KG-*2]0.5)为流动相进行等度洗脱,265 nm波长检测,外标法定量测定磺胺类药物。结果: 12种磺胺类药物在22 min 内出峰,在0.1~10.0 μg·mL-1范围内呈良好的线性关系,r值均在0.9995以上;最低检出浓度为0.002~0.045 μg·mL-1,相当于鸡蛋粉中12种磺胺药物的最小检出限在0.002~0.045 μg·g-1;当加标水平在0.1~1.0 μg·g-1时,12种磺胺类药物平均回收率在(71.13±5.02)%~(99.53±5.13)%之间, RSD为0.3%~4.8%。结论: 该法测定鸡蛋粉中的磺胺类药物具有快速、准确、灵敏的特点,符合出口食品残留分析质量控制规范方法要求。
目的: 研究制剂组成对抗表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)单克隆抗体稳定性的影响。 方法: 应用体积排阻色谱、离子交换色谱、酶联免疫反应对加速试验条件下的单克隆抗体的降解、多聚体的产生、表面电荷的不均一性和活性进行测定。 结果: 在pH相同的制剂中缓冲组分是稳定单克隆抗体的关键因素,制剂溶液中其他保护成分如非离子型表面活性剂的浓度、糖的类型及浓度对单克隆抗体稳定性有一定的影响。 结论: 选择合适的制剂组分与浓度能够有效地提高单克隆抗体的稳定性,在单克隆抗体药物制剂工艺开发中,对制剂组成进行优化是必要的。
目的: 建立高效液相色谱法测定六味地黄大蜜丸中糖转化产物5-羟甲基糠醛的含量。方法: 采用Agilent TC C18色谱柱,甲醇-0.1%醋酸(3∶[KG-*2]97)为流动相,柱温:30 ℃,流速:1.0 mL·min-1;检测波长:284 nm。结果: 5-羟甲基糠醛进样量在0.00054~2.2 μg范围内线性关系良好(r=1.000),最低检出限为2.1581×10-4μg,加样回收率(n=6)为100.1%(RSD%=1.7%)。结论: 本法简便、准确,可用于六味地黄大蜜丸中5-羟甲基糠醛的含量测定。
目的: 制备纳米银,并测试其特性。[STHZ] 方法: [STBZ] 用柠檬酸三钠还原硝酸银的方法制备了正电性纳米银胶,并分别用透射电镜和UV-Vis光谱对其进行了表征。[STHZ] 结果: [STBZ] 进一步对银胶表面的吸附特性进行了深入了解。[STHZ] 结论: [STBZ] 证实了不同分子在银胶表面的竞争吸附特性。
目的: 建立一种间接测定磺胺嘧啶含量的新方法。 方法: 在HAc-NaAc缓冲溶液条件下用过量的Cu2+溶液与磺胺嘧啶盐作用,产生沉淀,离心分离,电感耦合等离子体原子发射光谱法测定上层清液中剩余的Cu2+光谱信号强度I。 结果: 空白液与上层清液Cu2+光谱信号强度之差△I与磺胺嘧啶浓度C呈良好的线性关系,工作曲线相关系数为0.9996,线性范围为 47.1~200.2 mg·L-1(r=0.9996),回收率在94.0%~99.2%之间。 结论: 本方法不使用任何有毒溶剂,快速、简便,结果准确。用该方法进行磺胺嘧啶片和磺胺嘧啶混悬液样品测定,结果满意。
目的: 建立用高效液相色谱法测定石斛夜光丸中五味子醇甲含量的方法。 方法: 采用C18柱,流动相为甲醇-水(48∶52),检测波长为250 nm。 结果: 五味子醇甲在0.03401~2.38 μg范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)为98.7%,RSD为2.1%。 结论: 本法分析方法简便,准确,可作为该制剂的定量分析方法。
目的: 建立益智药材中诺卡酮的含量测定方法。 方法: 采用超高效液相色谱法测定益智中诺卡酮的含量。色谱柱:Waters ACQUITY UPLCTM BEH Cl8(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);流动相:乙腈-水(48∶ 52);检测波长:238 nm;流速:0.3 mL·min-1;柱温:30 ℃。 结果: 诺卡酮与其他成分分离良好;诺卡酮进样量在0.021~0.129 μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率(n=6)为98.9%。 结论: 该方法简便、准确,重复性好,可用于测定益智药材中诺卡酮含量。
目的: 建立清热解毒口服液中木犀草苷的HPLC含量测定方法。 方法: 采用Agilent Zorbax SB C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以0.2%磷酸(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长350 nm,柱温30 ℃。 结果: 木犀草苷进样量在36.6~366.0 ng范围内线性关系良好(r=0.9999);方法回收率(n=6)为99.8%,RSD=3.4%。 结论: 方法简便、准确,可用于清热解毒口服液中木犀草苷的含量测定。
目的: 利用丹皮酚在超微电极上的电化学行为,建立快速准确的丹皮酚检测新方法,监控丹皮酚软膏质量。 方法: 以无水乙腈-0.01 mol·L-1 NaOH水溶液为提取液,超声提取丹皮酚软膏中的丹皮酚,使用超微电极、快速方波伏安扫描(SWV)技术进行电化学检测。 结果: 可获得丹皮酚的重现性良好的氧化峰,该峰电流与丹皮酚的浓度在1.0×10-3~5.0×10-7 mol·L-1范围内呈良好的线性关系,回归方程为:I=4.083×103C+0.002(r=0.9997),检出限为1.0×10-7mol·L-1。 结论: 该方法快速准确,检测灵敏度高,重复性好,仪器便携性好,在生产实时监控及微芯片分析等方面有诱人的应用前景。
目的: 建立能有效分离18α-、18β-甘草酸的高效液相色谱方法并用于甘草酸二铵原料及制剂产品中异构体组成及相关杂质的控制。 方法: 采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以0.1 mol·L-1高氯酸铵溶液(用氨水调节pH至8.0)-甲醇(48∶ 52)为流动相,检测波长250 nm,柱温50 ℃,流速0.8 mL·min-1。 结果: 18β-甘草酸与18α-甘草酸分离度不小于1.2,方法耐用性好;测得国内1个厂家3批甘草酸二铵原料及2个厂家各3批甘草酸二铵注射液中甘草酸二铵均为18α-、18β-2种构型的混合物,以18α-构型为主,18β-构型含量分别为27.4%~28.5%,27.2%~29.3%,20.4%~20.7%;样品中均存在EP 5.0甘草酸单铵药品标准中收载的杂质A,发现杂质A也存在18α-、18β-2种构型,在上述色谱条件下得到有效分离。 结论: 甘草酸二铵产品为18α-、18β-两种构型的混合物,而国内现有药品标准方法不能分离18α-、18β-甘草酸,可采用本文中方法对其构型组成及相关杂质加以合理控制。
目的: 建立白及葡甘露聚糖中单糖含量的亲水作用色谱-蒸发光散射检测(HILIC-ELSD)测定方法。 方法: 白及葡甘露聚糖水解条件:三氟乙酸浓度2.0 mol·L-1,温度120 ℃,时间2 h。采用Sugar-D waters色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)分离,流动相为乙腈-水(体积比为85∶ 15),等度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温30 ℃。采用蒸发光散射检测器检测,漂移管温度40 ℃,雾化气(空气)压力350 kPa。 结果: D-甘露糖的线性范围为0.07765~1.553 mg·mL-1 (r=0.9983) ,检测限为0.4659 μg,加标回收率(n=3)为99.4%~101.8%,RSD为1.3%~2.0%;D-葡萄糖的线性范围为0.08112~1.622 mg·mL-1 (r=0.9988),检测限为0.4730 μg,加标回收率(n=3)为98.9%~102.0%,RSD为1.1%~2.1%。 结论: 该方法简便快速,结果准确,重复性好,可作为白及葡甘露聚糖中单糖含量及其组成测定的有效方法。
目的: 建立HPLC法测定注射用氨曲南的有关物质检查方法。 方法: 采用Agilent HC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇－磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾0.8g,加水溶解并稀释至1000 mL,用1 mol·L-1磷酸溶液调pH至3.0) (20∶ 80)为流动相,检测波长:254 nm;流速:1.0 mL·min-1。 结果: 氨曲南与氨曲南开环物、氨曲南反式异构体及各种杂质能够完全分离。氨曲南开环物在0.04~0.36 μg之间呈良好的线性关系(r=0.9999),其平均回收率为99.2%,RSD为0.9%,最低检出限为1.6ng。 结论: 方法简便、准确,灵敏,可用于注射用氨曲南的有关物质检查。
目的: 采用高效液相色谱法和薄层色谱法测定羟基脲及羟基脲片中的有关物质和降解产物。 方法: HPLC使用Cl8色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-水(5∶ 95)为流动相,流速为0.5 mL·min-1;检测波长为214 nm。TLC法中薄层板:硅胶G薄层板;展开剂:吡啶-水-乙酸乙酯(2∶ 2∶ 10);显色剂:对甲氨基苯甲醛盐酸溶液。 结果: 各降解产物均可与羟基脲主峰(或主斑点)良好分离,方法的精密度和重复性良好(RSD<0.3%)。 结论: 经方法学验证,该法灵敏、准确,适用于羟基脲及羟基脲片的有关物质的测定。
目的: 采用HPLC-ELSD法建立了测定果糖二磷酸钠胶囊含量的方法。 方法: 采用Symmetry Shield C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相:甲醇-水(6∶ 94),流速:0.6 mL·min-1,柱温:35 ℃。蒸发光散射检测器条件为:撞击器状态:关,漂移管温度:110 ℃,载气流速:2.0 L·min-1。 结果: 果糖二磷酸钠的线性范围为0.5~5.0 mg·mL-1,相关系数为0.9988。回收率(n=3)分别为98.9%,99.4%,99.8%;RSD为2.1%,1.3%,0.9%。 结论: 该方法操作简便,灵敏度高,快速、准确,适用于果糖二磷酸钠胶囊含量的质量控制。
目的: 建立反相高效液相色谱法同时测定清咽类保健食品中非法添加曲安西龙、氢化可的松、地塞米松、倍他米松、醋酸可的松、茶碱及沙丁胺醇的含量测定方法。方法: 采用Halo C18(150 mm×4.6 mm,2.7 μm) 色谱柱,以0.1%磷酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL·min-1,柱温为40 ℃,检测波长分别为240 nm、222 nm和274 nm。结果: 各组分在一定范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系(r>0.9995),平均回收率均在96.0%~103.0%,检出限为1.1~15.4 ng。结论: 本方法简便快捷、结果准确、重现性好、方法可行,可用于该类保健食品中非法添加化学药品的定量检测。
目的: 建立HPLC-MS/MS法检测中成药及保健品中可能非法添加的泼尼松、地塞米松、曲安萘德、醋酸泼尼松龙、醋酸氢化可的松、醋酸泼尼松、醋酸可的松、醋酸地塞米松 、醋酸曲安萘德、泼尼松龙、氢化可的松、倍他米松、醋酸氟轻松、丙酸倍氯米松等14种糖皮质激素类化学药物。 方法: 样品经甲醇提取,采用液相色谱-质谱联用法测定。色谱条件:SHIMADZU Shim-pack VP-ODS(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,14种糖皮质激素类化合物分为两个液相系统,分别以20 mmol·L-1醋酸铵(含0.1%甲酸,v/v)-乙腈进行梯度洗脱,质谱条件:电喷雾离子化正离子检测方式(ESI+),全扫描一级质谱、选择离子二级扫描质谱检测方式,通过与标准谱库中保留时间和多级质谱图的双重对比,对样品中非法添加的糖皮质激素类化学药物进行定性鉴别。结果: 在50批供试品中,检测到有7种样品中含有醋酸泼尼松和醋酸曲安萘德。结论: 本测定方法准确、灵敏度高,可满足定性研究的要求。
目的: 建立准确、灵敏的HPLC-MS/MS方法,检测中药制剂及保健食品中非法添加11种辅助降血糖类化学药物。方法: 样品经甲醇提取后,采用液相色谱/电喷雾离子化质谱法测定。色谱条件:Ultimate XB-C18(2.1 mm×150 mm,3.5 μm),柱温30 ℃,流动相以甲醇-0.1%乙酸铵溶液进行梯度洗脱,流速0.2 mL·min-1;质谱条件:以电喷雾电离源正离子模式进行质谱数据采集。结果: 在上述色谱及质谱条件下,11种辅助降血糖类化学药物的HPLC色谱图分离度良好,质谱分辨率符合鉴别要求。HPLC-MS/MS方法测定上述化学物质的最小检出量为0.01~1.4 mg·kg-1。结论: 该方法简便、快捷,灵敏度、准确性、重现性均可满足定性检查的要求。
目的: 建立专属性强的方法用于甘草酸单铵二铵盐的鉴别。 方法: 借鉴环境空气中微量氨的测定方法-靛酚蓝比色法,在亚硝基铁氰化钠及次氯酸钠存在下,铵根在稀硫酸中与水杨酸生成蓝绿色的靛酚染料,在698 nm波长处测定吸收值,根据显色深浅,比色定量。 结果: 通过显色后样品管与已知氨含量对照管吸收值的比对,可鉴别出样品为单铵盐还是二铵盐,甘草酸对样品测定无干扰;对国内1个厂家的甘草酸单铵及二铵原料,2个厂家的甘草酸二铵注射液样品进行了鉴别实验,结果均为单铵。 结论: 上市甘草酸二铵类产品实际铵含量存在名不符实现象,可用本文方法进行其单铵二铵盐的鉴别。
目的: 应用近红外漫反射(NIRDRS)技术和化学计量学的方法对氨苄西林胶囊进行定量分析,无损、快速测定。 方法: 以全国范围内不同企业生产的氨苄西林胶囊为分析对象,用光纤测定近红外漫反射光谱,通过偏最小二乘法(PLS)建立数学模型,对预测集进行预测。 结果: 对氨苄西林胶囊进行定量分析,建立定量分析模型,由39个样品经内部交叉验证(calibration spectra),浓度范围为68.83%~84.94%,16个样品用于外部验证(Test Spectra),浓度范围为69.07%~84.42%,相关系数为0.9901,训练集(TEST SET VALIDATION)外部检验均方差(RMSEP)为1.7,确定系数R2=85.38,RANK 为6; 检验集(CROSS VALIDATION)交叉验证均方差(RMSECV)为1.67,确定系数R2=81.58,RANK 为5。 结论: 定量模型可按照中国药典要求对氨苄西林胶囊进行快速预测分析,方法快速、简便,可用于药品的快速检验。
目的: 应用近红外漫反射光谱分析技术,建立维C银翘片中L-抗坏血酸成分的快速鉴别方法。 方法: 近红外漫反射光谱法结合高效液相色谱法,选择抗坏血酸的近红外建模谱段,建立L-抗坏血酸成分定性鉴别模型。 结果: 近红外光谱法可正确判别维C银翘片中是否含有L-抗坏血酸。 结论: 方法快速、准确,可运用于维C银翘片中抗坏血酸及其异构体成分的快速识别。
目的: 探讨人血白蛋白快检试剂盒的研制方法以及用其检测人血白蛋白含量的可行性。 方法: 利用蛋白质多肽链中的肽键(-CONH-)在碱性条件下,与铜离子络合形成紫红色化合物,在540 nm处有最大吸收,所产生的络合物颜色与蛋白质的浓度成正比。人血白蛋白快检试剂盒利用其颜色的差异,并通过自制的标准色标板比较,可作为一种快速筛查人血白蛋白的方法。 结果: 用人血白蛋白快检试剂盒测定结果与药典测定方法结果基本一致。 结论: 人血白蛋白快检试剂盒可用于快速筛查人血白蛋白。
目的: 验证ELISA检测疫苗中卡那霉素残留量的实用性。 方法: 采用间接竞争ELISA方法检测卡那霉素,并对方法的回收率、线性、特异性、精密性、耐用性等进行验证。验证方法有效后对相关样品进行检测。 结果: 该方法的回收率达到90%,对卡那霉素的有效检测范围为0.5~40.5 ng·mL-1,标准曲线相关系数r=0.9996,RSD小于10%。 结论: 此方法可以用于检测疫苗中卡那霉素残留量。
目的: 对十一酸睾酮注射液经水萃取后,采用凝胶法进行细菌内毒素检查的方法学进行验证,探讨油剂的细菌内毒素检查方法。 方法: 取十一酸睾酮注射液与水混合振荡,将内毒素从注射用油萃取到水中进行测定;方法学研究中进行水萃取液的凝胶法检查干扰试验;同时考察水和油振荡萃取步骤的内毒素回收率。 结果: 十一酸睾酮注射液与水振荡后,水萃取液对凝胶法内毒素检查无干扰。振荡萃取步骤内毒素回收率在50%~83%之间,符合药典要求。 结论: 注射用油剂的十一酸睾酮注射液,经水萃取后采用凝胶法进行细菌内毒素检查是可行的。
目的: 用高效凝胶渗透色谱 (SEC)和高效凝胶渗透色谱及激光光散射联用(SEC-MALLS)法测定玻璃酸钠的相对和绝对分子质量,并对2种分析方法进行比较。 方法: 色谱柱为SB806HQ,流动相为0.2 moL·L-1的氯化钠溶液(含0.02%叠氮化钠),流速为0.5 mL·min-1,柱温为35 ℃,进样量100 μL, SEC法用示差折光检测器,SEC-MALLS法用DNDC仪和激光光散射仪联用检测。 结果: 不同样品SEC法和SEC-MALLS法测得的分子质量结果接近,并且测定结果在一定范围内与样品浓度有关,浓度对相对分子质量的影响更大。 结论: SEC和SEC-MALLS法均可用于玻璃酸钠分子质量测定,浓度选择0.1 mg·mL-1为宜。
目的: HPLC法定量分析不同产地、不同生长年限的刺五加药材中异嗪皮啶。 方法: 采用高效液相色谱法,色谱柱:Kromasil C18分析柱(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸(20∶ 80);流速:1 mL·min-1;检测波长:343 nm;柱温:30 ℃;进样量20 μL。 结果: 异嗪皮啶进样量在0.0171~0.3024 μg范围内呈现良好的线性关系,平均回收率为99.4%,RSD为2.9%(n=9)。铁西产刺五加根中异嗪皮啶含量2年生最高(110.15 μg·g-1),茎中1年生最高;么河产不同生长年限刺五加中含量差别不大;根中异嗪皮啶的含量明显高于茎;铁西产刺五加中异嗪皮啶含量比么河产高。 结论: 本法操作简便、准确,专属性强,适用于刺五加中异嗪皮啶含量测定,该研究可为刺五加最佳产地、最适宜采收年限及最佳药用部位的确定提供参考。
本文对液质联用技术中基质效应产生的原因、基质效应评价尤其是如何消除基质效应等三方面作了简要介绍,为生物样品液质联用定量分析方法学的建立提供参考。
糖尿病是威胁人类健康的重大疾病,Exendin-4是一种从墨西哥巨蜥蜴的毒液中分离得到的含39个氨基酸的多肽,与GLP-1具有53%的序列同源性,其不但能促进胰岛素分泌,而且具有稳定性好、半衰期长的优点,在糖尿病等治疗方面具有广阔的前景。本文就Exendin-4结构、性质、功能等方面的研究进展作以综述。
手性药物的研究已成为国际新药研究的方向之一。手性药物分析在手性药物研究中作用越来越重要,已成为国际上分析科学中的热点和难点。手性配体交换色谱(CLEC)是直接分离对映异构体的热门方法之一。本文综述了近年来CLEC在手性药物对映体分离分析中的应用,并对这一领域的发展做了展望。
本文介绍一种电泳简易点样器,在使用过程中能达到操作方便、计量、易调节样品使用量和点样形状均匀等方面的效果。
为保证体内植入性生物材料和医疗器械的安全使用,减少其对人体潜在的危害性,有效的致癌性检测试验体系是非常重要的。本文结合致癌性机理的分析,针对目前已有的遗传毒性检测方法,特别是对生物材料及医疗器械生物安全检测中遗传毒性及致癌性检测实施现状做了具体分析,指出了目前的检测体系对高风险医疗产品致癌性检测的不足。为弥补这一不足,确保医疗产品的安全使用,本文详细介绍了目前欧美已进行了广泛研究的细胞形态转化致癌性检测系统。在目前参与替代法验证的三种动物细胞形态转化试验系统中,金黄地鼠胚胎(syrian hamster embryo)细胞形态转化试验被证实是比较成熟的方法。此方法很好地模仿了机体内癌症发生过程,既能检测遗传毒性致癌物又能检测非遗传毒性致癌物的潜在致癌性。据欧洲替代法验证协会的资料分析,金黄地鼠胚胎细胞形态转化试验的敏感性高达87%,特异性达83%,和动物致癌性试验的一致率达85%。ISO推荐这种短期的致癌性检测方法可以用做遗传毒性试验阴性(非遗传毒性)的高风险医疗产品的检测,以弥补缺乏动物致癌性检测的不足或作为动物致癌性检测的前筛选。目前,我们正在优化金黄地鼠胚胎细胞形态转化试验的操作规程,准备将其作为生物材料和医疗器械非遗传性致癌物检测的常规检测方法。
在世界范围内,数以百万计的人由于疾病或外伤患有组织损伤或器官功能衰竭。各国政府和慈善组织都大力支持世界各地研究人员开发新的生物材料和组织工程产品。我们一直致力于各种生物材料的研究近二十年。近年来,我们一直在进行用于组织工程支架及支架制造技术的材料的调查。本文介绍我们在开发新的生物材料和组织工程支架的一些研究和工作。
