真菌类中药作为中医药产业的重要组成部分,在临床应用中日益增多。本文统计了我国颁布的真菌类中药质量标准共计442项,其中《中华人民共和国药典》标准19项,地方标准398项,其他法定标准包括局颁标准、部颁标准25项;共涉及真菌中药品种67种,涉及真菌物种66种。本文在分析现有质量标准的基础上,从真菌类中药质量控制的角度,系统论述了真菌类中药的性状、显微特征、DNA鉴别、理化鉴别、含量测定（多糖、核苷、甾醇、萜类、蛋白/肽、酯类、糖醇等）、有害物质等质量特征及相关技术;并对真菌类中药质量标准未来的发展提出了建议,为真菌类中药的质量评价提升及质量保障提供参考。

目的: 建立超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）方法同时测定复方三七胶囊中16个皂苷类成分（三七皂苷R₁、三七皂苷Fa、三七皂苷Fe,人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rf、人参皂苷F₃、人参皂苷Rg₂、人参皂苷Rb₁、人参皂苷F₁、人参皂苷Rb₂、人参皂苷Rb₃、人参皂苷Rd、人参皂苷F₂、人参皂苷Rg₅,20（S）-人参皂苷Rg₃）的含量,并对复方三七胶囊进行质量评价。方法: 样品采用甲醇超声提取;采用Thermo Fisher Scientific Accucore Phenyl Hexyl色谱柱（2.1 mm×100 mm,2.6 µm）,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL · min^-1,柱温35 ℃,进样量2 μL。质谱采用加热电喷雾离子源（HESI）,负离子平行反应监测PRM扫描模式进行数据采集测定,喷雾电压为2.8 kV（-）。结果: 所建方法线性关系良好（r≥0.997 0）,精密度、重复性、稳定性良好,加样回收率在96.6%~102.3%,RSD为1.1%~5.1%。含量测定结果表明,不同厂家样品之间和同一厂家不同批次复方三七胶囊样品之间的16个皂苷类成分含量差异均较大。3个厂家的样品总皂苷含量均值分别为33 019.650 8、32 801.840 8、27 108.822 0 μg · g^-1,10批样品中含量最低的均为人参皂苷Rf,含量前五的皂苷成分依次为人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、三七皂苷R₁、人参皂苷Rd、人参皂苷Re,且3个厂家的样品中这5个皂苷成分含量总和均值均占总皂苷的95%以上,可作为质量差异贡献较大的标志物。聚类分析可按厂家分为3类：聚类为Ⅰ类的样品中除人参皂苷Rb₂外,其余皂苷类成分含量箱型图离散程度均较Ⅱ类、Ⅲ类大,人参皂苷Rg₅含量显著高于Ⅱ类、Ⅲ类（P<0.001）;聚类为Ⅱ类的3批样品质量较为稳定,其中人参皂苷Rb₂与Ⅰ类、Ⅲ类样品具显著性差异（P<0. 001）;聚类为Ⅲ类的样品中各皂苷成分含量均较Ⅰ类、Ⅱ类样品低。结论: 本方法可快捷、高效、灵敏和准确地测定复方三七胶囊中16个皂苷类成分含量,为复方三七胶囊的质量控制提供参考依据。

黄酮的药理研究证明其对人体健康的重要性。药理活性的确定需要单体化合物参与,然而,精准医疗对化合物,尤其是作为药物的化合物提出了更严格的要求。在手性药物研究中,药物旋光异构体对药效的影响不容忽视,而大部分药物以外消旋体形式在临床上应用,某些异构体不仅会降低疗效,增加机体代谢负担,甚至产生毒性。手性固定相（CSP）是分离单一构型黄酮类化合物的重要材料,是手性分离的核心材料之一。本文对近年来有关黄酮类化合物手性拆分的固定相发展进行综述,以期对黄酮类化合物的手性拆分提供参考,为黄酮类化合物的深入研究与开发利用提供新的参考方向。

多角度静态光散射技术是生物大分子领域重要的表征手段之一,能够获得生物大分子丰富的结构信息,如分子量、分子量分布、均方根旋转半径、第二维里系数、分子链构象等,但该技术原理较为复杂,表征的准确性受多种因素影响。本文介绍了生物大分子稀溶液中多角度静态光散射的基本原理,针对该技术准确表征的影响因素,从dn/dc、第二维里系数（A2）、延迟体积、外推形式、荧光干扰等方面进行文献综述和经验总结。本文可以帮助分析工作者更好地理解并掌握这一技术,以获得准确的表征数据。

目的: 利用传统四大鉴定、DNA条形码分子鉴定以及染色体倍性鉴定不同来源的五叶型半夏种质资源。方法: 利用组织培养对收集的13份资源进行组培扩繁,按照《中华人民共和国药典》 （2020年版,一部）对13份资源的基原、性状、显微特征进行鉴定;以三氯甲烷 ∶ 甲醇=6 ∶ 1为展开剂,10%硫酸乙醇为显色剂,对13份资源进行薄层鉴定;利用PCR扩增不同资源的ITS2核酸序列,用Snapgene和Mega软件进行剪切比对,并构建系统发育树;利用染色体计数法对五叶型半夏的倍性进行鉴定。结果: 五叶型半夏资源均与《中国植物志》中半夏描述相符,初步鉴定为半夏资源;五叶型半夏资源性状、显微特征与《中华人民共和国药典》 （2020年版,一部）半夏描述一致,薄层鉴定结果显示传统半夏与五叶型半夏斑点一致,且可以很好与虎掌区分开来。ITS2的扩增、测序成功率均为100%,基于NCBI数据库内天南星科半夏属资源ITS2序列构建的NJ系统发育树,五叶型半夏与半夏属资源亲缘关系更近,且与传统半夏资源聚为一类。染色体计数结果表明来自云南的3份种质资源SY-3、WY-8和WY-9为六倍体（2n=6x=78）;来自湖北9份种质资源（SY-1、SY-2、WY-1、WY-2、WY-3、WY-4、WY-5、WY-6和WY-7）为八倍体（2n=8x=104）;1份虎掌资源为二倍体（2n=2x=26）。结论: 五叶型半夏为半夏属半夏资源,明确半夏五叶突变体的倍性水平,为其新种质培育提供重要依据。

目的: 建立青白通痹胶囊的指纹图谱,结合化学计量学和网络药理学方法,分析预测青白通痹胶囊潜在的质量标志物（Q-Marker）,并对Q-Marker成分进行含量测定,为其质量控制提供参考。方法: 采用Agilent 5 TC-C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL · min-1,柱温30 ℃,进样体积10 µL,紫外检测波长210 nm（0~45 min）、260 nm（45~70 min）,建立指纹图谱并确定共有峰,通过与对照品相对保留时间及紫外光谱的比对进行色谱峰对应化合物的指认,经单煎液对各共有峰进行归属。采用化学计量法对10批青白通痹胶囊进行质量评价,借助正交偏最小二乘-判别分析（OPLS-DA）分析筛选青白通痹胶囊的主要差异性标志物;结合网络药理学,通过相应数据库筛选差异性标志物的核心靶点和关键通路,构建“成分-靶点-通路”网络图,结合上述结果筛选可用于预测青白通痹胶囊的Q-Marker,并建立对预测得到的标志性成分进行含量测定的HPLC方法。结果: 建立了青白通痹胶囊的HPLC指纹图谱,标记24个共有峰,对其进行峰归属,其中1~3、5~8、10~11、13、16号峰来自青风藤,4、9、12、14、16、18~19号峰来自白芍,15、17、20~24号峰来自炙甘草,并指认了其中的8个共有峰,分别为儿茶素、青藤碱、没食子酸、木兰花碱、芍药苷、甘草苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、甘草酸。相似度评价显示,10批青白通痹胶囊样品的相似度为0.934~1.000。主成分分析（PCA）显示前4个主成分的累积方差贡献率为93.998%,OPLS-DA显示有8个成分变量重要性投影（VIP）值较大。采用网络药理学的方法分析得出儿茶素、青藤碱等活性成分可能通过37个核心靶点、10条主要通路发挥药效作用,初步筛选儿茶素、青藤碱、没食子酸、木兰花碱、芍药苷、甘草苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、甘草酸为青白通痹胶囊潜在的Q-Marker。同时测定这8个成分的含量,方法学考察结果良好,平均加样回收率为96.81%~103.44%,RSD为0.6%~3.7%。10批样品中儿茶素、青藤碱、没食子酸、木兰花碱、芍药苷、甘草苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、甘草酸的质量分数分别为0.907 1~1.189 3、2.183 3~3.118 6、 0.397 0~1.427 6、3.507 9~5.446 6、14.207 7~19.570 1、1.412 8~3.577 5、0.442 0~1.697 7、2.738 8~4.761 2 mg · g-1。结论: 本研究建立的青白通痹胶囊指纹图谱方法简单,重复性好,筛选的指标性成分将为青白通痹胶囊的质量控制提供依据。

目的: 使用不同种牛、猪源病毒感染人间充质干细胞（HMSC）,并通过对比牛、猪源病毒感染人源细胞系293T/17和MRC-5后的感染和扩增情况,综合分析HMSC对常见猪、牛源病毒的易感性。方法: 将HMSC、人胚肺成纤维细胞（MRC-5）、人胚肾细胞（293T/17细胞）、非洲绿猴肾细胞（Vero细胞）以及猪肾细胞（PK-15细胞）分别按照7×103个 · cm-1接种24孔板和25 cm2培养瓶,分别以感染复数（MOI）为0.02接种猪细小病毒（PPV）;将HMSC、MRC-5、293T/17细胞、Vero细胞以及牛鼻甲骨（BT）细胞分别按照7×103个 · cm-1接种24孔板和25 cm2培养瓶,分别以MOI为0.02接种牛细小病毒（BPV）、牛腹泻病毒（BVDV）、牛副流感病毒3型（PI3病毒）、牛腺病毒3型（BAV-3）以及呼肠孤病毒（REO-3）,其中24孔板细胞培养7 d,25 cm2培养瓶细胞盲传3代,第3代盲传至24孔板,各代次分别进行细胞病变观察、免疫荧光检测和病毒核酸qPCR检测。结果: 与PPV敏感细胞PK-15相比,接种PPV后的Vero、HMSC和MRC-5各代均未观察到细胞病变和荧光,PPV拷贝数随着传代次数持续下降,而293T/17细胞虽未观察到细胞病变,但在盲传3代后观察到绿色荧光,且PPV拷贝数持续维持在较高水平,为1.49× 107 copies · mL-1。与牛源病毒敏感细胞BT细胞相比HMSC对PI3、REO-3、BPV这3种牛源检测相关病毒也呈现出易感性,感染后均能产生不同程度的细胞病变和免疫荧光阳性,通过qPCR法均能检测到对应病毒核酸,其中PI3、REO-3可以在HMSC中扩增,但扩增水平低于293T/17。结论: HMSC和MRC-5相似,对BPV、REO-3和PI3病毒易感染,对PPV、BVDV和BAV-3病毒不易感染;293T/17细胞对PPV、REO-3和PI3病毒易感,对BPV、BVDV和BAV-3病毒不易感染。在HMSC的病毒安全风险控制中,如引入猪源或牛源动物源性材料,应更加关注BPV、REO-3和PI3病毒的感染风险。

目的: 建立肉桂叶的HPLC指纹图谱,并结合化学计量学和一测多评法评价不同批次肉桂叶的质量。方法: 采用HPLC法建立了12批肉桂叶的指纹图谱并进行相似度评价,采用聚类分析（CA）和主成分分析（PCA）,对不同批次肉桂叶进行化学模式识别分析。以肉桂酸为内标参照物,建立一测多评（QAMS）法,计算2-羟基肉桂醛、肉桂醇、桂皮醛、邻甲氧基肉桂醛的相对校正因子,采用外标（ESM）法和QASM法测定肉桂叶中2-羟基肉桂醛、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛、邻甲氧基肉桂醛的含量。结果: 指纹图谱共确定 12 个共有峰,通过对照品指认了7个化学成分,除S3与S11批次外,其余批次肉桂叶样品与对照指纹图谱的相似度均>0.9;CA将12批肉桂叶分为2类;PCA显示不同批次间肉桂叶的化学成分存在一定的差异,并确定了3个主成分,累计方差贡献率为 86.022%;QAMS与ESM测定的以上5个化合物含量值无明显差异。结论: 建立的肉桂叶指纹图谱及含量测定方法稳定、可靠,可为肉桂叶的质量控制及评价提供参考。

目的: 基于前期胆南星菌种分离及炮制原理研究,对优势菌种进行筛选并进一步优化混合菌种发酵胆南星的炮制工艺,为胆南星混合菌种发酵新工艺提供实验依据。方法: 将前期分离的菌种分别进行单菌种发酵制备胆南星,采用HPLC-ELSD法测定不同菌种制得的胆南星中猪胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸含量,筛选出胆南星发酵优势菌种。以游离型胆酸总量、牛磺酸、甘氨酸和胆红素为指标,以混合菌种的加入量、发酵温度、发酵时间为考察因素,采用正交试验联合多指标加权评分法对混合菌种发酵工艺进行考察,确定胆南星混合菌种发酵新工艺。结果: 筛选出铅黄肠球菌和肠球菌（厌氧）为优势菌种;混合菌种发酵炮制的新工艺为：在天南星细粉中加入含有10%~15%混合菌液[铅黄肠球菌液和肠球菌（厌氧）液1 ∶ 1混合]的猪胆汁1 ∶ 1混匀,置于32 ℃、80%湿度的恒温恒湿箱中发酵培养15 d,取出,蒸1 h至透,切块,晒干。结论: 优选出的胆南星混合菌种发酵工艺稳定可行,可提高胆南星产品质量及其稳定性,为后续发酵制胆南星的规范化生产提供科学依据。

目的: 采用超高效液相色谱串联四极杆-飞行时间质谱（UHPLC-Q TOF/MS）技术对聚山梨酯80（PS80）组分谱进行全面表征和降解产物的分析鉴定,研究不同缓冲液体系、酸碱及氧化破坏对PS80组分谱的影响,识别新的PS80降解产物,揭示PS80在不同破坏条件下的降解行为及可能机制。方法: PS80及其分别置于柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液和组氨酸缓冲液体系中进行酸碱破坏或Fe²⁺诱导氧化破坏的样品,经Agilent ZORBAX RRHD SB-C₈（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）柱,用0.1 %甲酸溶液-0.1 %甲酸乙腈流动相梯度洗脱分离;电喷雾正离子化Q TOF/MS m/z 100~3 000内进行全扫描,以碰撞能量为80 eV（双电荷）和120 eV（单电荷）进行二级质谱检测;分析PS80成分的分子离子峰、碎片离子峰及降解规律,推断降解产物结构,解析PS80可能的降解行为及机制。结果: 采用UHPLC-Q TOF/MS技术在PS80中成功分离并鉴定了9个主要成分。PS80在酸性条件下较碱性条件更加稳定;在组氨酸缓冲液中,Fe²⁺极易诱导PS80中的不饱和酯类成分发生氧化降解,产生以聚氧乙烯异山梨醇9-氧代壬酸单酯、聚氧乙烯异山梨醇环氧硬脂酸单酯、聚氧乙烯山梨醇酐酮油酸单酯和聚氧乙烯酮油酸单酯为代表的氧化降解产物。结论: UHPLC-Q TOF/MS技术适用于PS80组分谱的识别和鉴定,研究结果有助于深入理解PS80在复杂药物体系中的降解行为,为药物配方设计提供重要参考。

目的: 建立基于Nb2-11细胞增殖的聚乙二醇化重组人生长激素（PEG-rhGH）体外生物学活性测定标准化方法,研究Nb2-11细胞法替代体内动物法的可行性。方法: 利用Nb2-11细胞法检测9批PEG-rhGH注射液体外生物学活性,拟订实验有效标准。按照2020年版《中华人民共和国药典》通则9401进行方法学验证。4家实验室协作研究检测2批PEG-rhGH原液与9批注射液的生物学活性,研究方法的精密度。利用Nb2-11细胞法和体内动物法分别检测8批PEG-rhGH原液和9批PEG-rhGH注射液的生物学活性,研究体内外方法测定结果的一致性。检测24批不同效期PEG-rhGH注射液的体外生物学活性,研究PEG-rhGH注射液体外生物学活性的标准限度。结果: 本方法相对准确度的相对偏倚范围在-3.059%~3.557%,线性回归方程的斜率为0.984,中间精密度几何变异系数范围为5.667%~6.923%,拟订实验有效标准通过率为100%,实验室间几何变异系数为2.281%,体内外检测结果的平均比率为0.938,不同效期PEG-rhGH产品的相对效价在100%~119%。结论: 本方法具有良好的实验室内及实验室间重现性,与体内动物法检测结果具有良好的一致性。本方法可作为测定PEG-rhGH产品生物学活性的标准化方法替代体内动物法应用于PEG-rhGH的质量控制和放行检验。

目的: 对尼莫地平注射用浓溶液进行配伍稳定性研究及比格犬体内药代动力学研究。方法: 采用Hyper Star BDS C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）;以水-四氢呋喃-乙腈为流动相;检测波长为235 nm;进样量10 μL;流速1.0 ml · min-1;柱温30 ℃;运行时间30 min;采用HALO 90A AQ-C18色谱柱（3.0×30 mm,2µm）;以95%水/5%乙腈（0.1%甲酸）为流动相A,95%乙腈/5%水（0.1%甲酸）为流动相B,梯度洗脱;流速0.6 mL · min-1;自动进样器温度：4 ℃;运行时间：2.30 min,进样量：8.00 mL。质谱条件采用电喷雾离子源,正离子模式,气帘气为35 psi,碰撞气为10 psi,喷雾电压为4500 V,雾化温度为500 ℃,雾化器、辅助气均为50 psi,尼莫地平m/z为417.18→122.20,地塞米松m/z为437.10→361.00。采用HPLC法测定尼莫地平注射用浓溶液及尼膜同®与不同溶液配伍后的含量;采用HPLC-MS/MS法测定2个制剂在Beagle犬体内血药浓度,使用WinNonlin 8.3.4软件计算药动学参数,SPSS Statistics 26软件对主要药动学参数进行统计分析。结果: 尼莫地平注射用浓溶液与不同溶液配伍相容性良好,配伍后含量在48 h内无明显变化,而原研制剂配伍后含量显著下降,并肉眼可见晶体析出;尼莫地平注射用浓溶液与原研制剂的Cmax、Tmax及AUC均无统计学差异（P>0.05）。结论: 尼莫地平注射用浓溶液稳定性好,且未改变API的药代动力学特征,具有良好的临床应用前景。

目的: 建立一种磁性固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱（MSPE-UHPLC-MS/MS）快速检测污水中14个芬太尼类毒品的方法。方法: 污水样品经新型混合模式弱阳离子交换磁性固相萃取材料Fe3O4@poly（ST/DVB/MA-COOH）净化和浓缩后,采用Waters Acquity UPLC HSS T3（150 mm×2.1 mm,1.8 μm）色谱柱进行分离,以0.1%甲酸-水溶液（A）和0.1%甲酸-乙腈溶液（B）为流动相,梯度洗脱,柱温40 ℃,流速0.3 mL · min-1,进样量2.5 µL,随后进入质谱电喷雾离子源,在多反应检测模式下进行检测。结果: 14个芬太尼类毒品质量浓度在0.04~4 ng · L-1范围内线性关系良好（r≥0.998 4）,检出限（LOD）为0.013 ng · L-1,定量限（LOQ）为0.04 ng · L-1。14个分析物在低、中、高3种加标浓度下方法的回收率为85.4%~114.7%,日内精密度（n=6）为2.0%~6.4%,日间精密度（n=3）为0.4%~2.4%。在5份实际污水样品中检测出芬太尼,浓度范围为0.21~0.46 ng · L-1。结论: 本方法具有前处理时间短,操作简单,溶剂用量少,灵敏度高和重现性好等优点,适用于污水样品中芬太尼类毒品的高通量筛查和定量分析。

目的: 为识别制药环境中的污染微生物,并评估其对药品质量的影响,建立应对策略,提供信息参考。方法: 对《伯杰氏系统细菌学手册》、权威文献、监督机构文件的收集、汇总、分析、提取,总结制药行业的微生物特性和风险信息注释模式,并通过对微生物关键特性信息的结构化,将其存储于基于MySQL的知识库管理系统。利用Vue+node.js进行前端设计、ECharts进行数据可视化,构建了便捷、可统计的综合性知识库。结果: 获得包含20 678个微生物物种特性及风险信息的查询云平台——DM-Mpedia（http：//dmcloud.dmicrobe.cn/#/preview）。结论: DM-Mpedia的建立有助于微生物工作者对污染微生物及不可接受微生物进行更好的评估和控制。