目的:长效注射剂在治疗慢性疾病方面具有优势,由于长效注射剂的多样性,现有药典方法和监管指南尚未提供针对长效注射剂的体外释药检查方法,这增加了这些制剂的研发和审批时间。本文回顾了用于研究长效注射剂体外释放度的检查方法,包括药典方法和非药典方法,如流通池法、取样分离法、透析法等,并讨论了这些方法的优缺点,以期为开发长效注射剂体外释药检查方法提供参考,缩短长效注射剂的研发周期。

目的:建立复方氨基酸注射液(3AA)的主成分和有关物质测定的高效液相色谱方法。方法:采用反相高效液相色谱法并结合二维柱切换LC/MSⁿ法对制剂中主要杂质进行分离和结构鉴定,建立复方氨基酸注射液(3AA)中缬氨酸、异亮氨酸和亮氨酸及其有关物质含量检测方法。采用Capcell PAK AQ C₁₈(250 mm×4.6 mm,3 μm)色谱柱,以0.2 mol·L^-1磷酸二氢钠溶液(用磷酸调pH至2.8)-乙腈(98∶2)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温40 ℃,检测波长210 nm,进样量20 μL。采用Thermo Accucore AQ C₁₈(100 mm×4.6 mm,2.6 μm)色谱柱,以0.1%甲酸溶液为流动相A,以0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相B,流速0.4 mL·min^-1,柱温40 ℃;质谱条件采用ESI电离源,正离子扫描模式,扫描范围为m/z 100~1 000,二级质谱采用数据依赖型扫描开展。结果:主峰和相邻杂质峰分离度良好,缬氨酸的线性范围为1.263~5.050 mg·mL^-1,平均回收率(n=9)为99.0%;异亮氨酸的线性范围为1.350~5.402 mg·mL^-1,平均回收率(n=9)为99.4%;亮氨酸的线性范围为1.647~6.588 mg·mL^-1,平均回收率(n=9)为99.5%。3批样品中主要杂质均为原料引入的工艺杂质,其中甲硫氨酸含量分别为4.344、3.751、4.503 μg·mL^-1,苯丙氨酸含量分别为4.636、4.889、4.753 μg·mL^-1。其他单个未知杂质分别为0.01%、0.02%、0.01%。结论:经方法学验证,本方法可用于复方氨基酸注射液(3AA)的质量控制。

本文针对药品微生物限度检查方法适用性研究的关键实验操作,从供试品溶液的制备、微生物计数方法和控制菌检查方法适用性试验的方法设计、加菌回收试验操作、菌液计数、菌液纯度控制等方面进行文献和经验的总结。重点介绍了具有较强抑菌作用的水溶性供试品、不易溶解分散的非油脂类供试品、油脂类供试品的供试品溶液制备方法,详细介绍了需氧菌总数计数、霉菌酵母菌总数计数、控制菌检查方法的循序实验方案;阐述了关于薄膜过滤法加菌操作的4种方式并分析其对方法结果的影响,总结了3种菌液计数的方法;详细分享了关于菌液纯度控制的操作经验,总结了药品微生物限度检查方法适用性研究的现状。提出了关于药品微生物限度检查方法适用性研究未来发展的4点建议:对薄膜过滤法加菌操作进行科学、合理的统一;加强对药品生产企业的监管和对药品微生物限度检查方法的复核;对国抽品种开展统一其微生物限度检查方法的研究并逐步收载成册;加强药用辅料微生物限度检查方法适用性试验的研究。

目的:建立大青龙汤物质基准指纹图谱,测定其6个指标成分的含量及其转移率,研究大青龙汤物质基准量值传递规律,为大青龙汤复方制剂和质量标准研究奠定基础。方法:制备15批大青龙汤物质基准,测定出膏率;建立HPLC法,采用Dikma Platisil C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以0.15%磷酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量1 mL·min^-1,柱温25 ℃,检测波长207 nm,进样体积10 μL,测定物质基准麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷、肉桂酸的含量;以0.05%磷酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,检测波长237 nm,测定物质基准甘草苷、甘草酸的含量,计算其转移率,开展饮片到物质基准量值传递分析。结果:15批大青龙汤物质基准指纹图谱相似度≥0.921,图谱标定了15个共有峰,其中8个来自麻黄,3个来自桂枝,2个来自炒甘草,2个来自燀苦杏仁;指标性成分麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、肉桂酸、甘草酸的质量分数分别为0.94%~1.30%、0.56%~1.02%、0.70%~1.25%、0.18%~0.32%、0.05%~0.10%、0.46%~1.23%,转移率分别为41.67%~59.47%、42.66%~59.74%、17.59%~36.34%、21.48%~44.75%、31.06%~48.89%、12.95%~25.15%,物质基准出膏率为11.98%~13.38%。结论:指纹图谱结合出膏率和指标成分含量测定对大青龙汤物质基准进行量值传递研究,初步建立了科学稳定的物质基准质量评价方法,为后期复方制剂的研究提供参考。

目的:筛选适用于制药环境中寡营养微生物的监测方法,了解制药用水及洁净环境等寡营养条件下的生物负载及微生物特征。方法:通过比较R₂A和TSA培养基对实验室纯水中微生物在不同温度、培养基及培养时间的计数结果比较,优化寡营养条件下微生物的培养条件和检测方法。以传统方法与寡营养检测方法同时开展制药生产环境中寡营养微生物的监测,结合16s rDNA测序和MALDI-TOF MS等技术,对分离的微生物开展多相微生物鉴定及分析。结果:菌落计数方法、培养基种类和培养时间在微生物计数中有显著性影响,采用寡营养R₂A培养基分离环境微生物的效果优于TSA培养基。上述2种培养基的微生物分离谱差异较大,在R₂A培养基中革兰阴性菌的分离率可达37.0%,在TSA培养基中革兰阴性菌的分离率仅为14.0%。此外,初次分离于R₂A培养基的多株条件致病微生物在TSA培养基中生长缓慢,在传统监测方案中易被漏检。结论:随着制药工艺的发展,以革兰阳性球菌为主的人源性微生物污染比例将逐步下降,适时选用寡营养微生物监测方法作为传统技术的补充,有助于在早期发现生产环境中潜在的不可接受微生物污染风险。

目的:建立坐浴安散的HPLC指纹图谱,并结合化学计量学和一测多评法开展坐浴安散质量控制研究。方法:采用HPLC法建立12批坐浴安散的指纹图谱并进行相似度评价,结合聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA),对不同批次坐浴安散进行化学模式识别分析。同时以大黄酸为内标参照物建立一测多评(QAMS)法,建立内参物与药根碱、巴马汀、小檗碱、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的相对校正因子,采用外标法(ESM)与QAMS法分别测定坐浴安散中药根碱、巴马汀、小檗碱、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚8个成分的含量,以验证QAMS结果的可靠性。结果:指纹图谱共标定23个共有峰,通过与混合对照品溶液比对指认出8个成分,样品与对照图谱相似度在0.952~0.994;CA将12批坐浴安散样品分为3类;PCA显示不同批次的坐浴安散化学成分存在一定的差异,并提取影响坐浴安散质量评价的主成分5个;OPLS-DA在23个共有峰中筛选出13个导致不同批次坐浴安散样品间质量差异的潜在标志成分(VIP>1);QAMS计算值与ESM测定值无明显差异。结论:建立的HPLC指纹图谱及多指标成分测定方法准确、简便,结合化学计量学方法可为坐浴安散的质量控制与评价提供参考。

目的:建立固精麦斯哈片HPLC特征图谱,并运用化学模式识别进行质量评价研究。方法:采用Welch Xtimate C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸(B)为流动相进行梯度洗脱(0~10 min,5%A→15%A;10~20 min,15%A;20~40 min,15%A→40%A;40~65 min,40%A→70%A;65~66 min,70%A→90%A;66~80 min,90%A;80~81 min,90%A→5%A;81~85 min,5%A),流速1.0 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温35 ℃。建立固精麦斯哈片特征图谱,并进行相似度评价、聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析。结果:建立了固精麦斯哈片的特征图谱,从10批样品中共确定28个共有峰,指认了其中7个成分,分别为没食子酸、绿原酸、苦番红花素、异槲皮苷、西红花苷-Ⅰ、西红花苷-Ⅱ、丁香酚。10批固精麦斯哈片特征图谱与对照图谱的相似度结果均大于0.98,聚类分析按照欧氏距离为10可将样品分为2类,与主成分分析结果一致。正交偏最小二乘判别分析筛选出5个差异性成分,分别来自丁香、玫瑰花和熏鲁香药材。结论:本次建立的固精麦斯哈片HPLC特征图谱方法高效可行,重复性好,可为本品质量标准提高研究提供参考。

目的:建立高分辨采样二维液相色谱法(HiRes 2D-LC)对维生素D滴剂中维生素D₃进行准确定量分析。方法:第一维液相色谱采用Thermo HYPERSIL Gold Silica(100 mm×2.1 mm,1.9 μm)色谱柱,以正己烷-正戊醇(996∶4)为流动相,流速0.2 mL·min^-1,检测波长265 nm,柱温40 ℃;第二维液相色谱采用ShimPack Velox Hilic(50 mm×2.1 mm,2.7 μm)色谱柱,以正己烷-正戊醇-异丙醇(98∶1∶1)为流动相,流速0.5 mL·min^-1,检测波长265 nm,柱温40 ℃。二维接口采用六位十四通阀,并配置2个多中心切割阀,对前维生素D₃峰和维生素D₃峰进行多次连续切割。结果:维生素D₃质量浓度在1.018 4~5.092 mg·mL^-1范围内线性关系良好(r≥0.999 8),前维生素D₃和维生素D₃精密度试验RSD分别为0.95%和0.40%,重复性试验RSD为0.41%,平均加标回收率为101.4%。供试品溶液在4 ℃和10 ℃放置12 h稳定,RSD分别为0.58%、0.66%。采用本法测得6批维生素D滴剂样品中维生素D₃的含量分别为100.4%、101.6%、100.9%、101.6%、102.7%、101.6%,与采用2020年版《中华人民共和国药典》四部通则0722第四法所测结果基本一致。结论:本方法具有优异的灵敏度、重复性和定量准确性,且省去烦琐的样品前处理步骤,缩短分析时间,改善长样品环带来的峰展宽等问题,显著提高了维生素D₃的含量测定效率,降低分析成本,为维生素D滴剂等主成分与辅料难分离制剂的准确定量提供新方法。

代谢组学是系统生物学的分支学科,通过高通量组学技术研究生物体内的代谢物变化,并探究这种变化与疾病病因或演变的关系,为寻找相关生物标志物和疾病筛查提供了新的研究思路,近年来已被广泛用于肿瘤领域的研究,同时应用网络共享数据库可以深入探讨代谢通路的变化。结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是我国位居第2的恶性肿瘤,寻找有临床价值的肿瘤标志物意义重大。本文将重点介绍近5年在不同基质中进行的寻找CRC潜在生物标志物的代谢组学研究进展,为CRC的早期筛查提供参考。

目的:建立同时测定雷公藤饮片中雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷酚内酯、雷公藤次碱、雷公藤内酯甲、雷公藤红素6个活性成分RP-UPLC-PDA分析方法。方法:雷公藤饮片采用乙酸乙酯超声提取,甲醇溶解分离,利用RP-UPLC-PDA法对其6个成分进行定量分析,采用Acquity^TM UPLC BEH C₁₈ (100 mm×2.1 mm, 1.7 μm)色谱柱,柱温30 ℃,以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相,进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,进样量2 μL。结果:6个活性成分在测定浓度范围内线性关系良好(0.999 2≤r≤0.999 7);加样回收试验中平均回收率为99.2%~103.1%,RSD为1.2%~2.9%。对10批不同产地雷公藤饮片进行含量测定,结果显示不同产地饮片中成分含量具有差异性,雷公藤甲素含量最高为140.2 μg·g^-1,最低为103.2 μg·g^-1;雷公藤内酯酮含量最高为224.7 μg·g^-1,最低为112.2 μg·g^-1;雷酚内酯含量最高为306.7 μg·g^-1,最低为189.6 μg·g^-1;雷公藤次碱含量最高为283.2 μg·g^-1,最低为211.2 μg·g^-1;雷公藤内酯甲含量最高为31.2 μg·g^-1,最低为16.8 μg·g^-1;雷公藤红素含量最高为87.6 μg·g^-1,最低为52.1 μg·g^-1。结论:建立RP-UPLC-PDA法能够同时测定雷公藤饮片中6个成分,方法稳定,结果可靠,适用于雷公藤饮片定量分析测定。

目的: 建立间充质干细胞（MSCs）生物学活性检测方法,应用于MSCs产品的质量控制。方法: 采用流式细胞术检测MSCs表面标志物;采用抗坏血酸、β-甘油磷酸钠等诱导MSCs成骨分化,诱导后用茜素红S染色,检测成骨分化能力;采用IBMX、罗格列酮等诱导MSCs成脂分化,诱导后用油红O染色,检测成脂分化能力;采用ITS、TGF-β3等诱导MSCs成软骨分化,诱导后用阿利新蓝染色,检测成软骨分化能力;采用细胞共培养和ELISA方法检测MSCs对巨噬细胞极化的作用,将THP-1细胞诱导为巨噬细胞后与MSCs共培养,ELISA方法检测共培养上清中IL-10、TNFα表达水平;采用CFSE标记细胞法、CD3/CD28刺激PBMC活化法和细胞共培养方法,用流式细胞术检测MSCs对淋巴细胞增殖抑制的能力。结果: 间充质干细胞表面标志物CD105、CD73和CD90表达均≥95%,CD45、CD34、CD14、CD19和HLA-DR表达≤2%;MSCs经成骨诱导分化后显微镜下可观察到红色钙结节;MSCs经成脂诱导分化后显微镜下可见红色的脂质空泡,呈典型的脂质分化;MSCs经软骨诱导分化形成软骨细胞球,显微镜下可见典型的软骨陷窝;MSCs与诱导的THP-1巨噬细胞共培养后,MSCs能刺激IL-10表达增多,并下调TNFα分泌;MSCs对CD3/CD28活化后的PBMC的增殖具有抑制作用,抑制率为76.4%。结论: 本研究建立了MSCs表面标志物、分化能力、促进巨噬细胞极化和淋巴细胞增殖抑制的检测方法,可用于MSCs产品生物学活性检测。

目的: 建立一种简便、高效的端粒酶活性检测方法,用于评价间充质干细胞产品的成瘤性风险。方法: 针对端粒酶催化亚基（TERT）的保守结构域设计特异性引物和探针,并对TERT基因的引物和探针进行优化筛选,同时设置内参基因的引物和探针,在一个反应体系内使用双色荧光探针进行多重定量PCR反应,建立RT-qPCR探针法。应用该法对人间充质干细胞中是否表达TERT基因来间接判断细胞中是否存在端粒酶活性。结果: 该方法可稳定特异地检测到阳性对照细胞293T/17的TERT基因,Ct平均值为23.96,RSD为1.5%。内参基因GAPDH均可以正常检出,Ct平均值为14.13,RSD为1.3%。阴性对照细胞MRC-5内参基因GAPDH可以正常检出,Ct平均值为12.81,RSD为0.46%,TERT基因未检出,该细胞端粒酶活性为阴性。人间充质干细胞HMSC内参基因GAPDH可以正常检出,Ct平均值为13.01,RSD为3.8%,TERT基因未检出,人间充质干细胞HMSC的端粒酶活性为阴性。结论: 本研究建立的RT-qPCR探针法重复性好,特异性高,能够准确检测端粒酶阳性细胞催化亚基mRNA的转录。可用于间充质干细胞的端粒酶活性分析,间接评估间充质干细胞成瘤性风险。

目的:研究参葛补肾胶囊中葛根素和淫羊藿苷在小鼠血浆及脑内海马核团动力学和海马抑郁症相关蛋白表达的变化,探讨参葛补肾胶囊体内药代动力学变化及其与海马相关蛋白表达的相关性。方法:运用UPLC-MS/MS-ABSCIEX QTRAP 5500三重四极杆串联线性离子阱质谱方法,采用Waters ACQUITY HSS T3(50 mm×2.1 mm, 1.8 μm)色谱柱,以0.05%甲酸水-含0.05%甲酸的乙腈甲醇溶液(1∶1)为流动相梯度洗脱,流速0.2 mL·min^-1,采用电喷雾离子源,在负离子模式下对正常小鼠灌胃后不同时间点的血浆及海马中葛根素、淫羊藿苷测试分析。用Western blot方法表达海马蛋白。结果:口服给药后血浆和海马均检测到葛根素和淫羊藿苷,其中血浆葛根素半衰期(t_1/2)为2.45 h, 淫羊藿苷t_1/2为3.59 h;海马葛根素t_1/2为4.37 h,淫羊藿苷t_1/2为8.5 h。葛根素血浆浓度占给药量的27.3%,淫羊藿苷血浆浓度占给药量的1.34%。海马葛根素占吸收入血葛根素的2.47%,海马淫羊藿苷占吸收入血淫羊藿苷的73.56%。给药后海马神经元限制性沉默因子(NRSF)、脑源性神经营养因子(BDNF)及其下游原肌球蛋白相关激酶受体B(TrkB)、溶质载体转运体6a4(SLC6A4)、糖皮质激素受体(GR)、μ阿片受体(MOR)等蛋白表达出现不同程度的上调,其中淫羊藿苷与NRSF表达呈现明显负相关,葛根素与BDNF-TrkB、MOR表现出明显正相关,GR则无明显相关性。结论:小鼠口服参葛补肾胶囊后,葛根素和淫羊藿苷均能进吸收进入血液且分布于海马,淫羊藿苷较葛根素更易透过血脑屏障并在海马分布。海马相关蛋白表达与葛根素、淫羊藿苷浓度变化呈现一定的相关性,提示2个成分的作用靶点与这些蛋白有关。本研究为参葛补肾胶囊药代动力学及其抗抑郁作用的物质基础提供了重要的实验依据。

目的:建立在线原位测定多潘立酮片在流化床制粒干燥过程中颗粒水分含量的定量分析模型。 方法:使用微型近红外光谱仪,在线原位收集多潘立酮片制粒干燥过程的近红外光谱,在不同的干燥时间取样以获得不同水分的建模样品,采用一阶导数(FD),多元散射校正(MSC)和Savitzky-Golay卷积平滑的光谱预处理方法,选择1 100~1 600 nm波段,运用偏最小二乘回归建立近红外定量分析模型并进行方法学验证,包括准确度、精密度、专属性、线性和范围、耐用性。结果: 所建模型的交叉验证均方根误差(RMSECV)为0.079 7,决定系数(R²)为0.994 5;预测均方根误差(RMSEP)为0.092 3,R²为0.986 0。方法学验证中各项指标均符合要求。 结论:微型近红外光谱仪应用于在线原位测定多潘立酮片颗粒的含水量是可行的,为过程分析技术在制药行业在线原位的应用提供了实验基础。

目的:通过对羌活和宽叶羌活2个品种中所含的主要有效部位挥发油进行气味分析,为快速、准确鉴别2种羌活挥发油差异提供良好可行的方法,丰富传统评价内涵的同时,为以挥发油为主的提取物的质量评价提供参考。方法:采用感官评价和电子鼻技术对2种羌活挥发油样品进行气味分析,进一步采用主成分分析(PCA)、线性判别分析(LDA)对获得的电子鼻数据进行分析与识别,建立Fisher判别和多层感知器(MLP)神经网络判别2种无损检测模型对样品进行品种区分。结果:感官评价结果表明,松脂味、清凉味和木质味是2种羌活挥发油的主要气味特征;变质腐竹味是影响2种羌活挥发油接受度与区分度的关键气味属性,且宽叶羌活挥发油中变质腐竹味气味属性比羌活挥发油的更加强烈;电子鼻结果显示,宽叶羌活挥发油中氮氧类化合物的响应值明显高于羌活挥发油,而氢化物、醇醚醛酮类化合物的响应值相较于羌活挥发油略低;Fisher判别模型对2种羌活挥发油的训练集与预测集的总体判别率分别为93.8%和87.5%,MLP神经网络判别模型对2种羌活挥发油的训练集与预测集的总体判别率分别为89.3%和91.7%。其中,MLP模型适用于判别羌活挥发油,而Fisher模型更适用于判别宽叶羌活挥发油。结论:人工感官与智能感官结合,从主观与客观2个层面进行表征,可明确2种羌活挥发油的气味差异;建立的Fisher判别函数和MLP判别模型可快速、准确鉴别2种羌活挥发油,可在传统评价角度为羌活挥发油的质量控制奠定前期基础,提供新的思路和方向。

目的:建立HPLC加校正因子的主成分自身对照法测定氢溴酸高乌甲素注射液中2个有关物质(N-去乙酰高乌甲素和冉乌头碱)的含量。方法:采用Kromasil 300-5-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以0.04 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液-甲醇-乙腈(68∶17∶15)为流动相,检测波长252 nm,流速0.8 mL·min^-1,柱温37 ℃,进样体积10 μL。绘制氢溴酸高乌甲素和2个杂质的线性方程,分别以斜率计算各杂质相对于氢溴酸高乌甲素的校正因子,用相对保留时间确定各杂质的位置。测定4家企业共25批氢溴酸高乌甲素注射液中2个杂质含量,并与外标法测得结果进行比较。结果:本方法能较好地分离氢溴酸高乌甲素与2个杂质。N-去乙酰高乌甲素和冉乌头碱的相对保留时间分别为1.20和1.39,校正因子分别为1.23和0.94。氢溴酸高乌甲素、N-去乙酰高乌甲素和冉乌头碱质量浓度分别在0.951 7~38.07、1.047~41.87和1.001~40.02 μg·mL^-1的范围内与峰面积呈良好的线性关系(r均为1.000),平均回收率分别为100.2%、100.5%和100.5%,RSD均小于2.0%,检测限分别为0.095、0.10和0.10 μg·mL^-1,定量限分别为0.32、0.35 和0.33 μg·mL^-1。加校正因子的主成分自身对照法测得25批氢溴酸高乌甲素注射液中N-去乙酰高乌甲素的含量为0.31%~0.82%,冉乌头碱的含量为0~0.09%,与外标法测定结果一致。结论:经方法学验证,所建立的方法简便、快速,可准确测定氢溴酸高乌甲素注射液中有关物质的含量。

目的:基于正交试验设计的多指标加权评分法分析研究并优化醋芫花饮片的炮制工艺,为规范芫花饮片的醋制炮制工艺提供技术支持。方法:采用正交试验设计,以醋制品中绿原酸、银椴苷、木犀草素、芹菜素、羟基芫花素、芫花素6个成分的总含量,醇溶性浸出物的量及外观性状为评价指标,分析辅料醋用量、闷润时间、炮制温度及炮制时间4个因素对炮制工艺的影响,并优选芫花饮片的醋制工艺。结果:辅料醋用量及炮制温度对试验结果有显著影响,而闷润时间及炮制时间对试验结果无显著影响,综合考察各因素对工艺的影响,优化后的醋炙芫花炮制工艺为每1 kg芫花饮片加醋0.3 kg,闷润15 min后160 ℃炒制10 min。结论:本研究对规范芫花的醋制炮制工艺具有一定的指导和参考意义。

目的: 采用高效液相色谱(HPLC)技术,建立同时测定通舒口爽片(大黄、枳实、秦艽等)中马钱苷酸、龙胆苦苷、橙皮苷、丹皮酚、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚9个成分的含量。方法: 样品经甲醇回流提取后,分析采用Thermo Acclaim-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为0.15%磷酸(乙腈,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃,进样量10 μL,检测波长为236 nm(检测马钱苷酸)、280 nm(检测龙胆苦苷、橙皮苷、丹皮酚)、254 nm(检测芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)。结果: 马钱苷酸、龙胆苦苷、橙皮苷、丹皮酚、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚在各自线性范围内呈良好的关系(r为0.999 1~0.999 9),平均加样回收率(RSD)分别为99.6%(RSD=1.9%)、101.1%(RSD=2.0%)、100.5%(RSD=1.5%)、101.6%(RSD=0.51%)、99.8%(RSD=1.4%)、100.9%(RSD=1.4%)、100.8%(RSD=1.8%)、102.7%(RSD=1.2%)、102.9%(RSD=0.86%),6批样品中9个成分的含量范围分别为1.871~3.517 mg·g^-1、6.274~12.55 mg·g^-1、2.140~3.946 mg·g^-1、1.393~2.018 mg·g^-1、0.394 8~0.807 2 mg·g^-1、0.657 5~1.246 mg·g^-1、0.484 7~0.915 8 mg·g^-1、0.839 8~1.429 mg·g^-1、0.327 3~0.547 9 mg·g^-1。结论: 所建立的方法简单准确,可用于通舒口爽片的质量控制与评价。

目的: 建立解郁安神颗粒的多组分含量测定及特征图谱方法与化学计量学结合,对解郁安神颗粒质量进行整体评价。方法: 采用CAPCELL PAK MGⅡC₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长在237 nm(栀子苷、甘草苷、甘草酸铵)和335 nm(斯皮诺素及3,6'-二芥子酰基蔗糖)5个成分进行含量测定并进行方法学验证。基于多组分含量测定方法,建立样品的特征图谱,并通过化学计量学对样品进行分析评价,找出影响样品质量的主要因素。结果: 建立了解郁安神颗粒的多组分含量测定方法,5个成分在各自范围内线性关系良好,回收率在95.6%~100.0%,对145批次样品进行测定,不合格样品共54批,总不合格率为37.2%;建立了解郁安神颗粒的特征图谱,标定了12个特征峰分别归属于6味药材,通过化学计量学软件分析,10个厂家样品质量存在一定差异,炒栀子与炙甘草质量的优劣是影响样品质量的关键因素。结论: 建立的解郁安神颗粒多组分含量测定方法及特征图谱方法便捷可靠,可用于解郁安神颗粒品质的综合评价。

目的: 调查市售淫羊藿来源,采用HPLC指纹图谱及多指标成分含量测定,对市售淫羊藿药材进行质量研究,为其质量评价和资源开发提供参考。方法: 收集到40批市售淫羊藿药材,采用HPLC指纹图谱分析,HPLC测定总黄酮醇苷、UV法测定总黄酮含量,并测定浸出物含量,应用化学计量学分析方法,完成不同淫羊藿药材的综合质量评价。结果: 市售淫羊藿有9种不同植物来源;5种正品淫羊藿质量良好,地方品种以粗毛淫羊藿、湖南淫羊藿含量较高,而黔岭淫羊藿、四川淫羊藿含量甚微;用主成分分析法进行综合质量排序,淫羊藿、箭叶淫羊藿和柔毛淫羊藿排序靠前,同一品种随产地排序变化较大,黔岭淫羊藿及掺假的淫羊藿商品排序最后;聚类分析显示在植物来源、产地、炮制和含量方面有较好区分意义;以淫羊藿(E. brevicornu)建立共有模式,9种淫羊藿共标定了8个共有峰,相似度范围在0.066~0.979,不同品种间存在一定差异。结论: 指纹图谱相似度和含量测定的化学模式均能良好的评价淫羊藿品种和质量。

核磁共振技术不仅是优秀的定性技术,在定量方面,也有着其独特的优势。作为一种高选择性、快速、经济的定量分析方法,核磁定量技术已广泛应用于医药、化工、食品等领域。核磁共振定量技术的基本原理是检测的磁性核共振信号强度与相应核的数成正比,并可根据样品性质,灵活选择相应的技术手段和定量方法,具有广泛的应用价值。本文针对核磁定量技术的定量方法,结合相关文献报道应用研究成果进行了系统的总结,为其实际应用及研究提供借鉴。

目的:建立激光衍射法用于测定吸入用布地奈德混悬液的粒度分布。方法: 采用Mastersizer 3000 激光粒度分析仪和Hydro SV 型湿法进样器,样品超声混匀后立即注入样品池,折射率为1.592,吸收率为0.01,分散介质为0.5%吐温-80的布地奈德饱和溶液,其折射率为1.33,搅拌速率为1 000 r·min^-1,遮光度为6%~12%。结果: 方法学精密度考察结果D₅₀的RSD小于2.0%,D₁₀和D₉₀的RSD均小于5.0%;3批吸入用布地奈德混悬液粒度分布的D₉₀均小于5 μm。结论: 该方法操作简便,准确度高,重复性好,适用于吸入用布地奈德混悬液的粒度分布测定。

目的:通过测定左氧氟沙星的溶解性和体外渗透性,对比仿制与参比制剂的处方差异,考察差异性辅料对原料渗透行为的影响,并预测2种制剂的生物等效性,旨在探究基于平行人工膜渗透试验(PAMPA)的体外渗透性数据申请生物等效性豁免的可行性。方法:采用高效液相色谱法测定原料在pH 1.0~pH 6.8的溶解性;采用μFlux^TM系统,在供体室中分别精密加入pH 5.0的饱腹小肠模拟液、pH 6.5的空腹小肠模拟液和pH 7.4的磷酸盐缓冲液16 mL,受体室中精密加入Accepter Sink Buffer 16 mL,转子速度200 r·min^-1,采集时间180 min,测定各介质中原料和原料与硬脂富马酸钠混合物中原料的渗透性,以及参比和仿制制剂粉末中原料的渗透性,通过双侧t检验考察是否有显著性差异,以评估处方中新增辅料和其他变更辅料对原料的影响;采用Macro Flux^TM系统,在溶出杯中加入pH 5.0和pH 6.5的肠模拟液1 000 mL作为溶出介质,使用桨法转速为75 r·min^-1,受体室中精密加入Accepter Sink Buffer 12 mL,微搅拌棒的转速为450 r·min^-1,分别取参比制剂和仿制制剂1片置溶出杯中,测定制剂的溶出-渗透曲线,比较溶出曲线相似性,计算渗透速率(J_Flux)和终点时的药物累计渗透量(AMT),以2种制剂J_Flux和AMT几何均值比值的90%置信区间是否落在80%~125%范围内为依据,预测制剂的生物等效性。结果:左氧氟沙星在不同介质的溶解性为16.4~62.7 mg·mL^-1,其渗透性在pH 5.0的饱腹小肠模拟液、pH 6.5的空腹小肠模拟液和pH 7.4的磷酸盐缓冲液中分别为2.92×10^-6、1.01×10^-5和1.07×10^-5 cm·s^-1;加入硬脂富马酸钠后与原料的渗透性相比无显著差异(P＜0.05),参比和仿制制剂粉末中原料渗透性无显著差异(P＜0.05);2种制剂的溶出曲线相似,J_Flux和AMT几何均值比值的90%置信区间结果均在限度范围之内。结论:左氧氟沙星为BCSⅠ类药物,处方变更后的辅料均不影响原料的渗透吸收,仿制与参比制剂生物等效,国产仿制制剂满足生物等效性豁免的核心要求。基于PAMPA的生物等效性研究,可用于原料的渗透性研究、处方的筛选和优化以及制剂的生物等效性预测等,能有效降低仿制药开发的成本和时间,加速高质量药品的研发。

目的:建立能够鉴别川贝母及其混伪品平贝母的方法。方法:使用化学计量学技术对样品四极杆串联飞行时间(Q TOF)质谱仪测定数据进行分析,并结合三重四极杆质谱筛选出特征离子对为m/z 578.3→164.14和m/z 578.3→398.31。采用Waters Acquity UPLC CSH(75 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,流速0.4 mL·min^-1。三重四极杆质谱仪MRM模式检测m/z 578.3→164.14和m/z 578.3→398.31 2个离子对。结果:108批样品的验证结果表明,m/z 578.3→164.14和m/z 578.3→398.31 2个特征离子对能够有效区分川贝母及其混伪品平贝母。结论:方法有较好的专属性和灵敏度,可用于平贝母掺伪川贝母的检测。

目的: 建立UHPLC-MS/MS测定方法测定蒙药文冠木枝和叶中儿茶素、表没食子儿茶素、芦丁、槲皮苷、表儿茶素、二氢杨梅素、杨梅苷和二氢槲皮素的不同周期含量对比研究。方法: 采用WATER-SCORTECS 反相C₁₈(100 mm×2.1 mm;1.6 μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱(0~1 min,5%B;1~10 min,5%B→28%B;10~11 min,28%B→95%B;11~14 min,95%B;14~15 min,95%B→5%B),柱温40 ℃,流速0.3 mL·min^-1,进样体积2 μL,多反应监测(MRM)方法中选择负离子进行检测。结果: 在测定的浓度范围内8个化学成分线性关系良好(r＞0.997 6),精密度、重复性和稳定性良好,平均加样回收率为97.4%~106.0%,RSD≤5.0%。6批叶样品中8个成分测定结果分别为0.090~0.904 mg·g^-1、0.093~2.258 mg·g^-1、0.001~0.005 mg·g^-1、0.530~6.176 mg·g^-1、0.158~1.561 mg·g^-1、0.002~0.056 mg·g^-1、4.008~10.218 mg·g^-1和1.049~16.990 mg·g^-1,枝中8个成分测定结果分别为0.384~1.025 mg·g^-1、0.911~2.427 mg·g^-1、0.008~0.127 mg·g^-1、0.870~2.295 mg·g^-1、0.659~1.746 mg·g^-1、0.125~1.079 mg·g^-1、2.296~4.681 mg·g^-1和1.958~4.946 mg·g^-1。含量测定结果显示8个成分在文冠木不同部位中的含量存在较大差异,叶中杨梅苷、芦丁、槲皮苷随生长周期变化明显,可作为文冠木叶质量控制的主要指标。结论: 该方法准确度和灵敏度高,且稳定性和重复性好,适用于蒙药文冠木药材中8个成分的同时检测,为枝和叶的质量控制提供实验基础。