2014年, 第34卷, 第1期　
刊出日期：2014-01-25

  

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综述专论
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  保健食品中非法添加药物检测技术研究进展

  王静文¹, 曹进¹, 王钢力¹, 张庆生¹, 丁丽霞²

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 1-11.

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  通过对保健食品行业近年来存在的非法添加药物现状的总结，以常见的六大类保健食品为代表，依据与保健功能声称相关的药物药理作用及副作用为溯源基础，对保健食品中可能非法添加的药物及危害进行总结；同时针对性地介绍了非法添加药物的检测技术，包括高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法、直接实时分析质谱及离子迁移谱，以期在保健食品打击非法添加重点监测和日常检测中提供参考，为保健食品非法添加行为的发现提供思路。
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  符合法规和指南要求的生物样本分析

  魏敏吉¹, 李可欣²

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 12-16.

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  用于新药申报的生物样本分析过程需要接受药政管理部门的严格监管，以往的研究结果提示，我国的生物样本分析质量还存在很大的提高空间。本文回顾了国内外针对生物样本分析的法规和质量体系建设情况以及目前在生物样本分析的方法学开发、确证和测试等方面需要注意的问题，提醒有关人员注意提高生物样本分析的测试数据质量。
代谢分析
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  超高效液相色谱-串联质谱法测定Beagle犬血浆中抗癌新药CC1007

  汤瑶^1,2, 李佐刚¹, 周太峰³, 曹科³, 闻镍¹, 孙旭¹, 王秀文¹, 汪巨峰¹, 李波¹

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 17-23.

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  目的：建立超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）测定Beagle犬血浆中抗癌新药CC1007。方法：以甲醇为沉淀剂处理犬血浆样品。采用Phenomenex Synergi 4μ Polar-RP 80A分析柱（50 mm×2.00 mm，4 μm），预柱为Phenomenex Security Guard C₁₈ Cartridges Polar-RP（4 mm×3.0 mm），以甲醇-0.1 %甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱（0～0.5 min，30%A;0.5～1 min，30%A→90%A，保持3 min;4.1～5 min，30%A），流速0.2 mL·min^-1，柱温40℃，5 min内实现快速分离。采用电喷雾负离子（ESI^-）模式电离，选择反应监测（SRM）模式检测，以P1作为内标物质进行定量。用于监测的离子分别为CC1007 m/z 402.0→384.0/213.2和P1 m/z 312.0→170.1/95.3。结果：犬血浆中CC1007的质量浓度在1～1000 μg·L^-1范围内线性良好（r=0.9974，权重系数W=1/X²）;血浆中CC1007的检出限（信噪比为3）为0.2 μg·L^-1;其平均回收率在85%～115%之间;日内及日间的RSD均小于15%，满足生物样品检测的要求。结论：该方法可用于犬口服灌胃、静脉与阴道给药后的血浆样品中CC1007的检测。该方法选择性强、灵敏度高、操作简便快速、重复性好，适用于CC1007药代动力学等方面的研究。
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  UFLC-MS/MS法测定胎盘灌流液中格列本脲浓度

  张峻¹, 黄桦¹, 闫晨², 姚勤¹, 郑巧玲¹, 王晶晶¹

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 24-29.

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  目的：建立测定胎盘灌流液中格列本脲浓度的超快速液相色谱-串联质谱（UFLC-MS/MS）方法。方法：以格列齐特为内标，胎盘灌流液样品用乙腈沉淀蛋白后进样分析。采用Shim-pack XR-ODS II C₁₈（2.0 mm×75 mm，2.2 μm）色谱柱，以0.1%（v/v）甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱（0～0.5 min，90%A，10%B；0.5～1.5 min，90%A→10%A，10%B→90%B；1.5～2.7 min，10%A，90%B；2.7～3.5 min，90%A，10%B），流速0.4 mL·min^-1。质谱采用多反应监测（MRM）扫描模式，以电喷雾离子源（ESI）在正离子电离模式下进行测定，格列本脲和格列齐特的定量分析离子分别为m/z 494.0→369.0和m/z 324.1→110.1。结果：胎盘灌流液中格列本脲浓度在0.25～250 ng·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.9998），日内及日间RSD均小于15%，稳定性考察结果良好。结论：该方法快速、灵敏，专属性强，可用于胎盘灌流液中格列本脲浓度的测定。
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  液相色谱-质谱联用同时测定大鼠血浆中替硝唑、达克罗宁和氯己定的浓度及其药动学研究

  吴丽颖, 吕红博, 刘建芳, 侯艳宁

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 30-35.

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  目的：建立大鼠血浆中替硝唑、达克罗宁和氯己定的HPLC-MS/MS定量分析方法。方法：采用固相萃取预处理血浆样品。使用Phenomenex Gemini C₁₈色谱柱（50 mm×2.0 mm，5 μm），以甲醇-10 mmol·L^-1甲酸铵-甲酸（56：44：0.2）为流动相，流速0.2 mL·min^-1，柱温25℃，酚妥拉明为内标;通过电喷雾离子化四极杆串联质谱，以正离子多反应监测方式（MRM）检测，用于定量分析的离子反应分别为m/z 247.9→m/z 82.0（替硝唑）、m/z 290.0→m/z 98.0（达克罗宁）、m/z 505.0→m/z 335.5（氯己定）、m/z 282.1→m/z 212.0（酚妥拉明）。结果：测定替硝唑、达克罗宁和氯己定的线性范围均为2～1000 ng·mL^-1，最低定量限为2 ng·mL^-1，提取回收率均 > 81.3%，日内RSD均 < 11.0%，日间RSD均 < 14.1%，准确度在-7.2%～2.9%范围内;替硝唑、达克罗宁、氯己定T_max分别为（1.50±0.93）、（1.50±0.43）、（1.50±1.05）h，C_max分别为（111.23±39.14）、（42.17±23.15）、（8.95±6.45） ng·mL^-1，t_1/2分别为（5.09±2.17）、（5.93±1.93）、（7.34±6.28）h，AUC_0-t分别为（804.52±87.66）、（145.57±21.86）、（99.31±24.01） ng·h·mL^-1。结论：该方法快速、灵敏、准确，可用于替硝唑、达克罗宁和氯己定在大鼠体内的药动学研究。
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  UHPLC-MS/MS法测定比格犬血浆中硝苯地平的浓度

  张耀文, 吕春晓, 隋振宇, 李清, 陈晓辉, 毕开顺

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 36-41.

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  目的：建立UHPLC-MS/MS法测定硝苯地平缓释片在比格犬血浆中的药物浓度。方法：血浆经乙醚-正己烷（2：1）提取，以地西泮为内标，采用UHPLC-MS/MS方法测定6只比格犬口服硝苯地平缓释片20 mg后血浆中的药物浓度。UHPLC条件:采用Shim-pack XR-ODS色谱柱（75 mm×3.0 mm，2.2 μm），以甲醇（B）-0.05%甲酸水（A）为流动相，洗脱梯度（0～2.00 min，80%B→95%B；2.01～2.20 min，95%B；2.21～3.50 min，80%B），流速0.4 mL·min^-1，柱温40℃，分析时间总计3.50 min，进样量5 μL;条件：硝苯地平：m/z347.0→m/z315.0，DP为58 V，CE为10 V，CXP为21 V；地西泮（内标）：m/z285.0→m/z193.1，DP为80 V，CE为43 V，CXP为20 V。结果：硝苯地平在浓度为0.15～50.00 ng·mL^-1范围内线性关系良好（r=0.9983），日内精密度RSD（n=6）≤6.6%，日间精密度RSD（n=6）≤13.8%，绝对回收率（n=6）为63.1%～68.3%，基质效应（n=6）RSD≤7.5%。6只比格犬口服硝苯地平缓释片20 mg后的主要药动学参数T_max为（4.58±1.39）h，C_max为（30.53±7.38）ng·mL^-1，t_1/2为（8.69±3.42）h，AUC_0-t为（185.9±113.3）ng·h·mL^-1，AUC_0-∞为（188.8±113.6）ng·h·mL^-1。结论：本方法简单、快速、灵敏，重现性好，可用于测定硝苯地平缓释片的血药浓度并进行药动学评价。
生物检定·活性分析
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  纳米银对胚胎细胞基因表达谱的影响和毒性机制

  王志杰^1,2, 邵安良¹, 付海洋¹, 段晓杰¹, 徐丽明¹

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 42-50.

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  目的：利用基因芯片技术考察纳米银对大鼠胚胎细胞基因表达谱的影响，分析其毒性作用的分子机制。方法：胚胎细胞在20 μg·mL^-1纳米银/细胞培养液混悬液内暴露48 h，提取细胞RNA，利用基因芯片技术对受试细胞的基因表达谱和未经纳米银处理的对照组细胞进行对比分析，考察受试细胞的基因表达谱变化。结果：纳米银引起了胚胎细胞总差异表达基因数为355个，其中上调基因132个，下调基因223个;显著地激活了免疫系统相关的自然杀伤细胞介导的毒性、B细胞受体信号通路等生物学反应;抑制了蛋白质氨基酸磷酸化生物学过程；诱导了分泌型白细胞肽酶抑制因子和基质金属蛋白酶3（MMP3）等基因表达的显著增高。结论：纳米银通过激活免疫系统相关的信号通路引起了胚胎细胞广泛的生物学反应;胚胎细胞通过上调分泌型白细胞肽酶抑制因子等来抵御纳米银所引起的刺激和损伤;纳米银抑制了蛋白质氨基酸磷酸化生物学过程，诱导了胚胎细胞MMP3的显著高表达，从而可能造成细胞各种生物学功能的障碍和细胞基质的严重破坏。胚胎细胞不同于癌化细胞株或其他不死化细胞，更接近人体正常细胞的功能和特性。这些新的毒性机制的发现对正确地理解纳米银对正常人体的潜在毒性风险有着非常重要的意义;同时有助于更好地理解纳米银的生殖毒性风险。
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  高效阴离子色谱-脉冲安培检测法测定脑膜炎球菌结合疫苗中A群多糖含量

  王平^1,2, 林海涛^1,2, 张燕斌^1,2, 焦小玲^1,2, 王雪薇^1,2, 刘梅影^1,2

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 51-57.

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  目的：采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法（HPAEC-PAD）测定A群脑膜炎球菌多糖及脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中6-磷酸甘露糖胺的含量，并对该方法进行验证，实现微量A群脑膜炎球菌多糖的定量检测。方法：A群脑膜炎球菌多糖酸水解处理后，经¹H、¹³C NMR及COSY谱图分析，产物结构为6-磷酸甘露糖胺单体，然后进样CarboPac® PA10柱，氢氧化钠-醋酸钠梯度洗脱，脉冲安培检测。筛选样品的水解条件;对HPAEC-PAD法进行专属性、精密度及准确性验证，并进行初步应用。结果：确定样品的水解条件为2 mol·L^-1三氟乙酸煮沸5 h。 载体蛋白破伤风类毒素对检测无干扰；在1～10 μg·mL^-1范围内，标准曲线线性关系良好（r > 0.999），加样回收率在95.73%～102.4%之间;试验内和试验间精密度试验结果RSD小于5%。 HPAEC-PAD法测定疫苗原液的多糖含量与Chen法比色测定结果相当，成品疫苗的A群多糖含量测定符合《A、C群脑膜炎球菌结合疫苗制造及检定规程草案》（每剂均≥10 μg）和《A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗制造及检定规程草案》（每剂均≥4 μg）。结论：HPAEC-PAD法专属性、精密度和准确性良好，可用于A群脑膜炎球菌多糖含量测定，尤其是脑膜炎球菌结合疫苗中A群多糖含量测定。
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  药品微生物限度检查中微生物污染的鉴定和溯源分析

  陈伟盛, 关倩明, 朱荣峰, 简敏骞

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 58-63.

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  目的：结合药品微生物限度检验工作的实例，采用多种技术手段对药品微生物污染情况进行分析，寻找药品微生物污染来源，在确保检验结果准确性的同时，为药品微生物污染追踪溯源提供技术支持。方法：采用API鉴定系统、Vitek2 Compact鉴定系统、RiboPrinter系统和FTIR分析系统等方法，对从样品和环境中分离得到的10株菌株进行鉴定分型及同源性分析。结果：4株样品菌和1株环境菌同源，样品中的微生物污染是通过实验人员的手套进行传播，实验人员应注意无菌操作过程。结论：本文采用传统形态学、生化鉴定、FTIR及分子生物学等方法，阐述药品微生物限度检查中微生物污染鉴定和溯源分析的过程和方法，为药品微生物检查的过程控制提供信息，为药品微生物污染的溯源调查提供解决方案。
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  复方黄连素片微生物限度检查法的建立及检验结果分析

  刘广桢, 胡文红, 徐晓洁, 丁勃, 国明

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 64-70.

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  目的：建立复方黄连素片微生物限度检查法，并对26个生产企业198个批次的产品的微生物限度检查结果进行分析。方法：细菌计数采用薄膜过滤法，霉菌和酵母菌计数采用培养基稀释法，大肠埃希菌和大肠菌群检查采用直接接种法。结果：26个生产企业26个批次的产品进行方法验证，细菌、霉菌和酵母菌计数验证中各菌的回收率均大于70%，大肠埃希菌和大肠菌群检查验证中可检出验证菌，该方法可行。结论：26个生产企业198个批次的微生物限度检查结果均符合规定。
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  第3次低分子肝素国际标准品协作标定

  李京, 王悦, 范慧红

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 71-74.

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  目的：建立第3次低分子肝素国际标准品。方法：中国食品药品检定研究院以第2次低分子肝素国际标准品（01/608）为标准品，采用微量生色底物法测定待标品A（11/174）和待标品B（11/176）的抗FⅩa效价和抗FⅡa效价。结果：实验数据全部被采纳，用于第3次低分子肝素国际标准品的效价计算。结论：英国国家生物制品检定所对全球13个国家的22个实验室提交的数据进行统计分析，待标品B（11/176）的实验室间误差较小，各种方法的结果一致性较好，因此被推荐作为第3次低分子肝素国际标准品使用，抗FⅩa效价为1068 IU·安瓿^-1，抗FⅡa效价为342 IU·安瓿^-1。
成分分析·快速分析
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  HPLC-ELSD法分析庆大霉素中小组分杂质

  杨利红^1,2, 李进¹, 胡昌勤¹

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 75-84.

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  目的：采用高效液相色谱-蒸发光散射法分析庆大霉素原料及注射液中的小组分杂质。方法：采用SHISEIDO ACR C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以1.0%三氟乙酸溶液-甲醇（92：8）为流动相，流速0.4 mL·min^-1，漂移管温度108℃，进行HPLC-ELSD分析;采用XTerra TMMS C₁₈色谱柱（150 mm×2.1 mm，5 μm），以0.4%三氟乙酸（TFA）-乙腈（95：5）为流动相，流速0.4 mL·min^-1，对庆大霉素小组分进行LC-MS分析;采用1D和2D核磁光谱，以D₂O为溶剂，对制备的小组分X2和X3进行结构确证;依据背景噪音和主成分的理论板数，进行2种不同型号ELSD仪器的漂移管温度和载气流速进行优化。结果：ELSD法共检出11个组分，其中包括4个C组分和7个小组分杂质，LC-MS及NMR法推断出其中6个小组分杂质，分别为庆大霉素A2、A、X、B1，西索米星，庆大霉素C2b;庆大霉素组分的色谱保留行为受取代基极性和空间位阻的综合影响，取代基影响的大小顺序为OH>NH₂>H>NHCH₃>CH₃;ELSD分析时应针对每种具体的检测器设定仪器参数，重点对漂移管温度和载气流速这2个参数进行优化。结论：中国药典的HPLC-ELSD方法能够对庆大霉素原料及制剂中表观含量大于0.5%的小组分进行控制，目前仍是相对简便、实用的控制庆大霉素组分/杂质的有效方法。
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  LC-MS法鉴定依普利酮的降解产物

  杜明荦^1,2, 朱婷婷¹, 苏浩明¹, 张云静¹, 宋敏¹, 杭太俊¹

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 85-90.

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  目的：采用高效液相色谱-质谱联用技术鉴定依普利酮的降解产物结构。方法：采用Zorbax Extend C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以10 mmol·L^-1醋酸铵溶液作为流动相A，以甲醇-乙腈（50：50）为流动相B，进行梯度洗脱[0 min（70%A-30%B）→8 min（70%A-30%B）→45 min（20%A-80%B）→53 min（20%A-80%B）→55 min（70%A-30%B）→65 min （70%A-30%B）]，电喷雾正离子化高分辨TOF/MS和MS/MS检测并解析降解产物结构。TOF/MS雾化气压力345 kPa，温度350℃，干燥气流量10 L·min^-1，毛细管电压4 kV，碎片电压100 V，MS/MS测定氩气CID压力0.2 Pa，碰撞能量20 eV。结果：检测到依普利酮的4个降解产物，通过有机反应机制分析和质谱解析鉴定了他们的结构，并结合色谱制备和NMR测定确证了主要降解产物结构。结论：色谱-质谱联用技术能有效地用于有关物质的鉴定，依普利酮降解产物的鉴定结果可为其质量控制提供参考依据。
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  HPLC法同时分析测定明目上清片中10个化学成分

  施法^1,2, 白旭东², 董斌³, 沈书博², 毕开顺¹

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 91-95.

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  目的：建立同时分析测定明目上清片中10个活性成分（栀子苷、芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、盐酸药根碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素）的方法。方法：采用HPLC-整体柱色谱法，色谱柱为MERCK chromolith RP-18e（100 mm×4.6 mm），以乙腈为流动相A，0.1%磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱（0～2 min，8%A；2～10 min，8%A→25%A;10～23 min，25%A→70%A），流速2.0 mL·min^-1，检测波长为0～11.0 min时230 nm（测定栀子苷、芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、盐酸药根碱、黄芩苷、盐酸小檗碱），11.0～23.0 min时254 nm（测定大黄素、大黄酚、芦荟大黄素）。结果：栀子苷、芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、盐酸药根碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素的线性范围分别为9.94～198.8 μg·mL^-1（r=0.9997），10.19～203.8 μg·mL^-1（r=0.9996），10.23～204.6 μg·mL^-1（r=0.9998），10.48～209.6 μg·mL^-1（r=0.9996），10.11～202.2 μg·mL^-1（r=0.9998），10.31～206.2 μg·mL^-1（r=0.9997），10.84～216.8 μg·mL^-1（r=0.9998），10.39～207.8 μg·mL^-1（r=0.9997），10.22～204.4 μg·mL^-1（r=0.9998），10.42～208.4 μg·mL^-1（r=0.9998）;平均加样回收率（n=6）分别为98.8%、97.2%、97.4%、98.3%、99.2%、98.5%、97.9%、98.1%、98.2%、97.6%，RSD分别为1.1%、1.2%、1.0%、1.2%、1.0%、1.3%、1.5%、1.2%、1.3%、1.5%。结论：该方法操作简单，重复性好，为评价和监控明目上清片的质量提供了可靠的方法。
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  HPLC波长切换技术同时测定复方黄连素片中6个成分的含量

  林林, 林永强, 汪冰, 郭东晓, 徐丽华

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 96-99.

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  目的：建立HPLC法同时测定复方黄连素片中芍药苷、吴茱萸内酯、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、木香烃内酯、去氢木香内酯的含量。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈（A）-0.033 mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（B）为流动相，梯度洗脱（0～15 min，9%A;15～55 min，9%A→35%A），柱温和流速分别为35℃和1 mL·min^-1，波长切换（0～25 min，在230 nm波长下检测芍药苷;26～50 min，在215 nm波长下检测吴茱萸内酯、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、木香烃内酯和去氢木香内酯）。结果：芍药苷、吴茱萸内酯、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、木香烃内酯和去氢木香内酯进样量分别在0.1285～1.285、0.2008～2.008、0.1139～1.139、0.1151～1.151、0.1186～1.186和0.1034～1.034 μg范围内与色谱峰峰面积呈良好线性响应;平均回收率（n=6）分别为99.4%、98.6%、98.7%、98.9%、98.9%和98.6%，RSD分别为0.46%、0.64%、0.60%、1.1%、0.61%和0.38%。结论：该方法多种成分同时测定，操作简便、准确，重复性好，可用于复方黄连素片的质量控制。
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  马比木根中喜树碱和9-甲氧基喜树碱的HPLC分析

  白永花^1,2, 宋启示¹

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 100-103.

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  目的：建立测定马比木根中喜树碱和9-甲氧基喜树碱的高效液相色谱法。方法：采用5种方法对马比木根中的喜树碱和9-甲氧基喜树碱进行提取;运用高效液相色谱法，采用Waters Symmetry C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以甲醇-水（50：50）为流动相，流速0.8 mL·min^-1，检测波长254 nm，柱温26℃。结果：喜树碱和9-甲氧基喜树碱进样量分别在0.24～4.00 μg（r=0.9997）和0.24～4.00 μg（r=0.9995）范围内线性关系良好;乙醇溶液室温浸泡提取得到的喜树碱含量（0.944%）和9-甲氧基喜树碱含量（0.237%）明显高于其他方法。马比木是目前发现的喜树碱类含量最高的植物。结论：本文建立的HPLC检测法简便、准确、灵敏度高，乙醇溶液室温浸泡提取法安全，成本低，提取率高，适用于喜树碱类提取和马比木的质量检测。
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  HPLC-UV-ELSD联用法测定双黄连系列制剂中连翘含量并同时检查山银花

  笔雪艳^1,2, 王宪平², 张清波¹, 匡海学²

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 104-107.

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  目的：建立HPLC-UV-ELSD联用法对双黄连系列制剂中连翘含量进行测定，并同时进行山银花的检查，在有效控制连翘质量的同时，考察双黄连系列制剂中金银花药材的投料情况。方法：采用相同色谱条件，不同检测器同时测定连翘苷含量与灰毡毛忍冬皂苷乙，HPLC-UV法测定连翘药材中连翘苷的含量，HPLC-ELSD测定灰毡毛忍冬皂苷乙，对金银花药材和山银花药材进行区别。结果：在2种双黄连系列固体制剂中检出山银花。结论：所建立的方法简便、准确，能够准确测定连翘苷的含量，并判断处方中金银花药材的投料应用情况。
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  夫定类药物的太赫兹光谱及密度泛函理论研究

  赵容娇, 杜勇, 洪治

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 108-114.

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  目的：获得齐多夫定和司他夫定在太赫兹（THz）波段的特征响应，得到其低频振动光谱，并从理论上分析光谱产生的原因。方法：室温下，利用太赫兹时域光谱（THz-TDS）技术测量得到2种药物的频谱响应，再运用密度泛函理论的B3LYP方法结合基组6-31G（d，p）分别对2种药物进行单分子结构和晶体结构的模拟计算，分析实验和模拟结果，并对吸收峰处的振动模式进行归属。结果：实验表明，这2种药物在THz波段都存在特征吸收峰，且两者的吸收谱有差异明显；单分子结构的模拟计算预测出了2种药物在0.2～1.8 THz范围内的部分实验特征峰，而晶体结构的模拟计算成功预测出了所有的实验特征峰，明显优于单分子模拟。结论：利用THz光谱分析可以有效地对夫定类药物进行鉴别;利用晶体密度泛函理论模拟可以较为准确地对物质在THz波段的吸收峰进行指认和振动归属。
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  近红外光谱技术在活血止痛胶囊质量控制中的应用

  聂黎行, 戴忠, 鲁静, 林瑞超, 马双成

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 115-120.

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  目的：探讨近红外光谱技术在中药质量控制中的应用。方法：采用3种不同方式采集活血止痛胶囊的漫反射光谱，分别建立真伪鉴别、厂家区分和多成分含量测定模型，并对近红外光谱在中成药的均一性和稳定性评价中的应用进行初探，同时比较了光谱采集方式对模型预测能力的影响。结果：定性分析模型误判数均为0，水分（A）、阿魏酸（B）、11-羰基-β-乙酰乳香酸（C）和龙脑（D）的定量分析模型相对验证标准偏差在5.4%～12.8%之间，均一性和稳定性评价模型可准确反映样品的差异和变化。结论：所建方法简便、快速、无损，可用于活血止痛胶囊的快检初筛和全面质量控制，为近红外光谱技术在中药分析领域的应用提供了新的思路。
安全监测
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  中药及保健食品中PDE₅抑制剂检测的再研究

  石岩^1,2, 魏锋¹, 朱晓鹏³, 熊婧¹, 马双成¹, 林瑞超^1,2

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 121-129.

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  目的：尝试优化和建立可同时快速检测多种PDE₅抑制剂类非法添加化学成分的方法。方法：分别采用TLC法、HPLC-PDA-MS联用及UPLC技术。TLC法:使用硅胶GF₂₅₄薄层板，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（40：40：15：12）下层溶液为展开剂，254 nm和366 nm下观察。HPLC-PDA-MS法:采用Inertsil ODS-3（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以0.01 mol·L^-1乙酸铵（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱（0～17 min，36%B；17～18 min，36%B→42%B；18～27 min，42%B；27～28 min，42%B→52%B；28～43 min，52%B；43～44 min，52%B→80%B），流速1 mL·min^-1，检测波长229 nm，UV光谱扫描（200～400 nm）;正离子模式，氮气为雾化和干燥气体，毛细管电压3 kV，锥孔电压60 V，气体流量80 L·h^-1，离子源温度120℃，去溶剂温度200℃，去溶剂气体流量350 L·h^-1。UPLC法:采用Waters BEH柱（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）色谱柱，以甲醇（A）-水（B）为流动相，梯度洗脱（0～3 min，90%B→65%B；3～10 min，65%B→50%B；10～13 min，50%B→25%B；13～16 min，25%B；16～20 min，25%B→90%B），流速0.4 mL·min^-1，检测波长229 nm，UV光谱扫描（200～400 nm）。结果：在TLC检测中添加了366 nm作为检测波长，提高了检测的灵敏度与准确度;优化HPLC-PDA-MS法，获得了更好的8个PDE₅抑制剂色谱峰的分离度;建立了快速准确的UPLC法，可在13 min内实现6个PDE₅抑制剂的快速分离与检测。结论：该法可用于中药及保健食品中非法添加PDE₅抑制剂类化合物的检测，具有高效、简便、专属性强等特点。
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  金胺O染色物在中成药中的检测方法研究

  余新启^1,2, 何轶², 鲁静², 何风艳², 戴忠², 林瑞超², 马双成²

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 130-135.

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  目的：建立中成药中金胺O染色物的检测方法，对可能存在的化工染料金胺O进行筛查，并建立阳性样品中的含量测定方法。方法：采用HPLC法对中成药中的金胺O进行筛查，并采用HPLC-MS/MS二级质谱对阳性样品进行确认。质谱采用电喷雾正离子扫描（ESI⁺），二级质谱全扫描模式（product ion mode），母离子m/z 268.1，子离子扫描范围m/z 20～300。在此基础上，采用高效液相色谱法对阳性样品中的金胺O进行含量测定。色谱条件:采用Phenomenex Gemini C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.05 mol·L^-1醋酸铵水溶液（冰醋酸调pH 4.5）（30：70）为流动相，流速1 mL·min^-1，检测波长432 nm。结果：采用HPLC法对94批次中成药进行筛查，并采用HPLC-MS/MS对可疑样品进行确认;有4批样品可检出金胺O;金胺O进样在0.00202～2.02 μg的范围内有良好的线性关系。阳性样品元胡止痛片、朱砂安神丸中金胺O的平均回收率（n=9）分别为101.6%（低、中、高3个浓度回收率分别为101.1%、101.2%和102.6%）和98.4%（低、中、高3个浓度回收率分别为99.7%、95.6%和99.9%）。4批阳性样品（2批元胡止痛片样品和2批朱砂安神丸样品），其含量方别为2.7 μg·片^-1（糖衣片）、1.7 μg·片^-1（糖衣片）、100.8 μg·g^-1（水蜜丸）和252.6 μg·丸^-1（大蜜丸）。结论：本方法准确可靠，可作为元胡止痛片、朱砂安神丸中金胺O染色物的检测方法。
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  电感耦合等离子体质谱法测定培菲康胶囊中4种有害元素

  陈阳, 金薇, 杨永健

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 136-139.

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  目的：建立培菲康胶囊中铅、砷、镉、汞4种有害元素的测定方法。方法：采用电感耦合等离子体质谱法，样品经微波消解前处理后测定，选择内标法定量以消除基体效应和干扰。结果：在一定的浓度范围内，各元素和内标元素的质量数比值均与浓度呈良好的线性关系，相关系数均大于0.999，加样回收率为73.5%～103.2%，检测限均满足测定的要求。结论：该方法专属性好，灵敏度高，准确快捷，可为同类药品、保健品中有害元素的限量检查提供参考。
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  2种定量PCR法与探针杂交法在检测重组白介素1受体拮抗剂中宿主DNA残留量的比较

  李京敬¹, 郜尽^1,2, 韩伟^1,2

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 140-145.

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  目的：建立Taqman探针技术的定量PCR方法，对大肠杆菌E.coli/BL21菌株生产的重组白介素1受体拮抗剂（rhIL-1ra）中的残留宿主DNA进行了定量分析，并与SYBR Green法和地高辛探针杂交法进行比较。方法：以BioRad Chromo 4荧光定量PCR仪为平台，选择大肠杆菌23S核糖体RNA基因为靶基因，设计引物和Taqman探针，以纯化的宿主基因组DNA为标准品，对供试品中残留DNA进行定量。同时在重复性，精密度，检测限等方面与SYBR Green方法和地高辛探针杂交法进行比较。结果：本实验建立的Taqman探针法检测限为0.01 ng·mL^-1，在0.01～1000 ng·mL^-1区间同样具有良好的线性（r=0.997），回收率89.7%～136.0%。测定4批次供试品中残留DNA浓度为0.052、0.092、0.096、0.025 ng·mL^-1。结论：Taqman探针法与SYBR Green法检测灵敏度均达到0.01 ng·mL^-1，在重复性与精密度方面效果一致，且均优于探针杂交方法。
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  UPLC-MS/MS法检测抗癫痫中成药中非法添加苯巴比妥和卡马西平

  沈国芳, 励炯, 裘一婧, 朱健

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 146-150.

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  目的：建立抗癫痫中成药中非法添加苯巴比妥和卡马西平的UPLC-MS/MS检测方法。方法：采用Waters ACQUITY UPLC/Quattro Premier液质联用仪，以BEH-C₁₈（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）色谱柱分离，0.02 mol·L^-1醋酸铵水溶液-乙腈（1：1）为流动相，质谱检测器采用多反应监测（MRM）模式进行定性定量检测;供试样品的处理，采用以甲醇为溶剂的超声提取方法。结果：苯巴比妥和卡马西平的保留时间分别为1.1 min和1.3 min，检测限分别为2.2 μg·mL^-1和0.10 μg·mL^-1，定量限分别为7.5 μg·mL^-1和0.35 μg·mL^-1，标准曲线范围分别为11.2～112 μg·mL^-1和1.04～52 μg·mL^-1，重复性的RSD（n=6）分别为3.7%和1.7%，3种浓度的平均回收率分别为101.3%～105.4%和98.8%～101.0%，日间精密度的RSD（n=9）分别为2.7%和1.7%。9批样品中3批检出苯巴比妥，1批检出苯巴比妥和卡马西平。结论：本方法专属性强，操作简单，快捷，可作为中成药中非法添加苯巴比妥和卡马西平的有效检测方法。
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  UPLC-MS/MS法检测清热散结胶囊中阿多尼弗林碱

  胡娟妮¹, 聂平², 方磊², 丁野², 李文莉²

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 151-154.

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  目的：建立清热散结胶囊中阿多尼弗林碱的含量检查方法。方法：采用UPLC-MS/MS法，以野百合碱为内标计算浓度。色谱分离采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×50 mm，1.7 μm），流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱（0～2.5 min，6%B；2.5～4 min，6%B→40%B；4～9 min，40%B;9～11 min， 40%B→6%B；11～15 min，6%B），流速为0.3 mL· min^-1， 柱温为30℃，进样量2 μL;采用电喷雾离子源，多反应监测模式（MRM）检测。结果：阿多尼弗林碱浓度在0.001～ 0.046 μg·mL^-1范围内呈现良好线性关系（r=0.9990），加样回收率为95%～105%，RSD小于2.5%；方法重复性及精密度良好。结论：所建立的方法专属性强，灵敏度高，重复性好，适用于清热散结胶囊中阿多尼弗林碱的检测。
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  在线渗析-离子色谱法检测中药材中二氧化硫残留量

  吴越^1,2, 王玉^1,3, 梅雪艳², 霍世欣⁴, 张锐⁵

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 155-158.

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  目的：建立了离子色谱法电化学检测器测定中药材中的亚硫酸盐（以二氧化硫计）的残留量。方法：采用碱溶液提取中药材，提取液经在线渗析技术去除大分子杂质，离子色谱法测定亚硫酸根离子。色谱条件:保护柱Metrosep RP2 Guard、分析柱Metrosep A Supp 10-100，以100 mmol·L^-1氢氧化钠溶液作为淋洗液，流速为1.0 mL·min^-1，采用安培检测器检测。结果：亚硫酸钠浓度在2.042～51.05 μg·mL^-1范围内线性关系良好，r=0.9999。结论：本方法操作简便，干扰少，选择性高，测定结果较为准确，可用于中药材中二氧化硫残留量的研究。
标准研讨
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  HPLC-RID法替代滴定法测定百令胶囊中甘露醇含量的研究

  刘薇¹, 肖新月¹, 宋宗华², 程显隆¹, 魏锋¹, 刘燕¹, 张昀³

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 159-162.

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  目的：建立HPLC-RID法测定百令胶囊中甘露醇的含量。方法：样品以乙醇为溶剂，加热回流提取甘露醇。采用氨基柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-水（86：14）为流动相，流速1.0 mL·min^-1，采用示差折光检测器进行检测。结果：甘露醇浓度在0.28～7.00 μg范围内，与色谱峰面积积分值呈良好线性关系，定量限8.55 μg，回收率在98.81%（n=6）。测定了3批样品，甘露醇含量范围为5.9～7.3 mg·粒^-1。结论：本方法简单、准确，专属、灵敏，适用于百令胶囊中甘露醇的含量测定；可以替代百令胶囊及其他发酵虫草制剂标准采用的，以测定含羟基化合物总量为甘露醇含量的氧化还原滴定法。
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  新健胃片质量控制方法的研究

  李云霞^1,2, 郭艳玲^1,2, 段树卿¹, 胡晓梅¹

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 163-168.

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  目的：对新健胃片的质量控制方法进行研究。方法：对新健胃片中黄芩苷和汉黄芩苷的稳定性进行考察;对黄芩苷、汉黄芩苷的对照品在酸碱条件下的稳定性进行研究;采用反相高效液相色谱法测定新健胃片中汉黄芩苷含量。采用Agilent Eclipse Plus C₁₈（4.6 mm×150 mm，5 μm）色谱柱，以1%甲酸（A）-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱（0～15 min，78%A;15～25 min，78%A→75%A；25～40 min，75%A→68%A;40～45 min，68%A→78%A），流速1.0 mL·min^-1，检测波长280 nm。结果：新健胃片中黄芩苷不稳定，同时研究表明，黄芩苷本身不稳定，易受酸碱等因素的影响而受破坏;反相高效液相色谱法测定新健胃片中汉黄芩苷含量，线性范围0.10～0.50 μg（r=0.9999）;精密度试验的RSD（n=6）为0.2%;10 h内RSD（n=10）为0.3%；重复性试验的RSD（n=9）为1.0%;回收率在98.15%～100.7%之间，平均回收率为99.21%。结论：酸碱环境对黄芩苷影响较大，制剂中的黄芩苷以及黄芩苷对照品均不稳定、易分解，而汉黄芩苷几乎不衰减，相对稳定。建议以汉黄芩苷代替黄芩苷作为新健胃片中黄芩的投料量的检测指标;方法简便、可靠，重复性好，可用于新健胃片的质量控制。
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  钟乳石炮制前后FT-IR指纹图谱分析

  房方, 李祥, 陈军, 刘圣金, 马瑜璐, 李珍

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 169-173.

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  目的：为了能直观而准确地鉴别，控制生、煅钟乳石的质量，从而为钟乳石的质量标准研究奠定基础。方法：通过对10批主产地的钟乳石生品和炮制品与同种化学试剂碳酸钙和氧化钙、其他含钙矿物药生品和炮制品之间进行FT-IR光谱比较分析，找出它们的“指纹”特征。结果：所收集的10批主产地的钟乳石生品、炮制品的FT-IR光谱相似度均达到95%以上，表明各产地钟乳石组成结构相近，其最佳炮制工艺条件稳定可控。同时，钟乳石生品、炮制品与其他含钙矿物药紫石英和玄精石的生品、炮制品之间的相似度不高，说明红外光谱分析具有一定的指纹性特征，可以很好地将它们区分。钟乳石生品与化学试剂碳酸钙（CaCO₃）之间有较高相似度，这是因为钟乳石的主要化学成分为CaCO₃；而钟乳石炮制品与化学试剂氧化钙（CaO）之间相似度不高，说明在其明煅过程中，只有部分CaCO₃分解成CaO。结论：10批钟乳石生品、炮制品的FT-IR光谱共有峰明显，可用于生、煅钟乳石质量标准的制定，对钟乳石进行质量控制。
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  桂枝茯苓丸脂溶性成分GC-MS指纹图谱研究

  耿放¹, 葛亚南¹, 方衡², 朴成玉², 杨东霞², 何录文², 吴修红²

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 174-177.

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  目的：建立桂枝茯苓丸脂溶性成分的气相色谱-质谱联用（GC-MS）指纹图谱。方法：采用5HP-MS色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），载气为He，流速1.0 mL·min^-1，进样量1 μL，分流比1：20;采用电子轰击（EI）离子源，辅助线温度280℃，离子源温度230℃，四极杆温度150℃，质量扫描范围m/z 50～550。采用Chemstation和Nist 05a谱库。结果：分析了10个批次的桂枝茯苓丸，建立了桂枝茯苓丸脂溶性成分GC-MS的指纹图谱，确定并鉴定了9个共有色谱峰。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2004 A版）进行指纹图谱分析，10批桂枝茯苓丸相似度均在0.90以上。结论：桂枝茯苓丸脂溶性成分的GC-MS指纹图谱特征性及专属性强，该指纹图谱可作为桂枝茯苓丸脂溶性成分质量控制的稳定方法。
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  藕节药材中3-表白桦脂酸的含量测定及HPLC指纹图谱的研究

  张阳¹, 张昭¹, 刘海涛¹, 齐耀东¹, 高刚峰², 帅金高³, 张本刚¹

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 178-183.

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  目的：建立藕节药材中3-表白桦脂酸含量测定及HPLC指纹图谱分析的方法。方法：采用Waters Xbridge C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相，流速1.0 mL·min^-1，检测波长203 nm，柱温35℃。结果：测定了不同产地藕节药材中3-表白桦脂酸的含量，并建立了藕节药材的HPLC指纹图谱，在指纹图谱中共有11个共有峰，并指认了3-表白桦脂酸，指纹图谱的相似度均在0.942～0.999之间，各色谱峰分离效果良好，符合指纹图谱检测要求。结论：该方法较好地反映了藕节药材中的化学成分信息，且操作简单，重复性和耐用性好，为进行藕节药材的质量评价提供了参考。
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  高效液相色谱法测定甜叶菊中的3个甜菊醇糖苷的含量

  朱吟吟, 周凌

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 184-189.

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  目的：建立高效液相色谱法分析甜叶菊中3个甜菊醇糖苷含量。方法：采用Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm，2.7 μm），以乙腈-磷酸水溶液（30：70）为流动相进行分离，在紫外检测波长210 nm下进行检测，外标法定量。结果：3个甜菊醇糖苷的检出限为1.0～1.2 mg·kg^-1，定量限为2.5～3.0 mg·kg^-1;在50～1000 mg·L^-1的浓度范围内线性良好，相关系数为0.9999～1.000;瑞鲍迪苷A、瑞鲍迪苷C和甜菊苷的加标回收率分别为92.8%、87.2%、90.3%，RSD分别为3.9%、2.7%、4.8%;精密度的RSD分别为1.2%、2.1%、1.3%；重复性的RSD分别为3.3%、6.4%和4.7%。结论：本方法操作简便，快速，分离度和准确度高，可用于甜叶菊原料的质量控制。
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  HPLC法测定麻杏口服液中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量

  李翔, 刘皈阳, 马建丽, 周亮, 黄欣欣

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 190-192.

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  目的：建立高效液相色谱法测定麻杏口服液中盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱的含量。方法：采用Agilent Eclipse XDB-C₁₈（4.6 mm×150 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈-0.1%磷酸（40：60，每100 mL加十二烷基硫酸钠0.2 g）为流动相，流速1.0 mL·min^-1，检测波长206 nm，进样量10 μL，柱温为室温。结果：盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱浓度分别在0.01～0.21 μg （r=0.9999）和0.01～0.22 μg（r=0.9999）范围内与各自峰面积线性关系良好，平均回收率（n=6）分别为100.4%和100.6%，RSD分别为2.2%和1.9%。结论：本方法简便准确，快速可靠，能够用于麻杏口服液的含量测定和质量控制。
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  RP-HPLC法同时测定芎菊上清丸中绿原酸、盐酸小檗碱和黄芩苷的含量

  郝乘仪, 郭淑英, 冯波, 崔佰吉

  药物分析杂志. 2014, 34(1): 193-197.

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  目的：建立RP-HPLC法同时测定芎菊上清丸中绿原酸、盐酸小檗碱和黄芩苷的含量。方法：采用DIKMA Platisil ODS色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱温30℃，以甲醇（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱（0～5 min，40%A;5～20 min，40%A→60%A；20～30 min，60%A），流速1 mL·min^-1，变换波长检测（327 nm，绿原酸;345 nm，小檗碱；278 nm，黄芩苷）。结果：绿原酸、盐酸小檗碱和黄芩苷的线性范围分别为0.11～2.2 μg（r=0.9997）、0.021～0.42 μg（r=0.9999）、0.03～0.6 μg（r=0.9998），平均回收率在98.45%和99.07%之间。结论：该法检测效率高，专属性强，重复性好，可用于芎菊上清丸中绿原酸、盐酸小檗碱和黄芩苷的含量测定及其质量控制。