目的：为在更高水平上控制康柏西普质量，进一步确保产品的安全性和有效性，对其生物学活性、非还原SDS-PAGE纯度、唾液酸含量、糖基化项目的检测方法和不溶性微粒的质量标准进行提高。方法：建立和验证康柏西普3个质量控制方法，包括康柏西普生物学活性的荧光素酶报告基因分析（reporter gene assay，RGA）方法、唾液酸含量的反相高效液相色谱（reverse phase-high performance liquid chromatography，RP-HPLC）测定方法和糖谱的离子交换高效液相色谱（ion exchange-high performance liquid chromatography，IEX-HPLC）测定方法，并对非还原十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）纯度测定方法的凝胶浓度和上样量进行优化，按照2015年版《中华人民共和国药典》通则0903，采用光阻法测定不溶性微粒。结果：生物学活性测定中，RGA法在准确度、精密度和中间精密度等方面均优于人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）增殖抑制法，且能够更好地反映康柏西普生物学活性的变化；非还原SDS-PAGE纯度检测中，4%~15%梯度胶较10%固定浓度凝胶对主带和杂带的分离度高，3 μg上样量时，能够更准确地测定康柏西普纯度；间苯二酚法测定唾液酸含量中，N-糖的非唾液酸单糖亦可与间苯二酚反应，产物在580 nm处有光吸收，从而影响检测结果，本研究建立的RP-HPLC法通过4，5-亚甲二氧基-1，2-邻苯二胺盐酸盐（4，5-methylenedioxy-1，2-phenylenediamine dihydrochloride，DMB）标记排除该影响，检测结果更准确；建立的IEX-HPLC糖谱测定方法可以有效控制影响康柏西普关键质量属性的N-糖基化类型；康柏西普成品的不溶性微粒检测结果能够满足USP<789>要求。结论：所建立/优化的质控方法和提高的质量标准可在更高水平上对康柏西普质量进行控制。
目的：研究建立抗程序性死亡受体配体1（programmed cell death protein ligand 1，PD-L1）单抗的质量控制方法。方法：利用成像毛细管等电聚焦电泳（imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis，iCIEF）、肽图对抗PD-L1单抗进行鉴别；利用还原/非还原十二烷基磺酸钠毛细管电泳（capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfonate，CE-SDS）、分子排阻高效液相色谱（size exclusion-high performance liquid chromatography，SEC-HPLC）、离子交换高效液相色谱（ion exchange-high performance liquid chromatography，IEC-HPLC）对抗PD-L1单抗的纯度进行控制；利用细胞结合抑制法和转基因细胞法测定抗PD-L1单抗的活性；利用光阻法和液流成像分析法对不溶性微粒进行检测和分析。结果：抗PD-L1单抗的iCIEF检测结果具有特征性主峰，肽图检测具有相应特征峰，起到很好的鉴别作用。还原CE-SDS的轻链与重链峰面积之和的百分比为（98.37±0.21）%，非还原CE-SDS主峰峰面积百分比为（96.33±0.15）%；SEC-HPLC单体的峰面积百分比为（99.43±0.02）%；IEC-HPLC酸性区峰面积百分比、主峰峰面积百分比、碱性区峰面积百分比分别为（13.63±0.40）%、（80.00±0.36）%、（6.37±0.15）%。细胞结合抑制法与转基因细胞法的活性检测均呈现剂量反应曲线，反映抗PD-L1单抗剂量依赖性地阻断程序性死亡受体1（programmed cell death protein 1，PD-1）与PD-L1的结合及后续的生物学效应。光阻法检测≥10 μm及≥25 μm的不溶性微粒数分别为（1.33±0.58）粒·mL-1和（0.00±0.00）粒·mL-1；液流成像分析法检测2~10 μm、≥10 μm及≥25 μm的微粒数分别为（1 243.67±242）粒·mL-1、（45.67±16.07）粒·mL-1和（10.00±5.00）粒·mL-1，其中，蛋白聚体占87.45%，非蛋白聚体占12.55%。结论：研究建立了抗PD-L1单抗的多种质控方法，为国内抗PD-L1单抗的质量检测提供了参考依据。
目的：针对抗白细胞分化抗原38（cluster of differentiation 38，CD38）单抗的关键质量属性建立质控方法。方法：采用肽图法进行鉴别；采用还原/非还原十二烷基磺酸钠毛细管电泳（capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfonate，CE-SDS）和尺寸排阻色谱（size exclusion-high performance liquid chromatography，SEC-HPLC）进行纯度控制；采用成像毛细管等电聚焦电泳（imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis，iCIEF）测定电荷异质性；采用酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）测定结合活性；采用补体依赖的细胞毒作用（complement dependent cytotoxicity，CDC）和抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）的方法测定生物学活性。其他各项指标均应符合2015年版《中华人民共和国药典》以及其他相关要求。结果：肽图检测具有特征图谱，起到很好的鉴别作用。还原CE-SDS的轻链与重链峰面积之和百分比为（97.87±0.72）%，非还原CE-SDS主峰峰面积百分比为（97.70±0.35）%；SEC-HPLC单体的峰面积百分比为（99.15±0.01）%，高分子量物质的峰面积百分比为（0.47±0.002）%，低分子量物质的峰面积百分比为（0.37±0.01）%。iCIEF分析的主要亚型的峰面积百分比为（63.54±0.37）%，酸性亚型的峰面积百分比为（23.07±0.50）%，碱性亚型的峰面积百分比为（13.38±0.12）%。结合活性的半最大效应浓度（concentration for 50% of maximal effect，EC50）值为（7.35±0.06）ng·mL-1。CDC活性EC50值为（270.67±12.42）ng·mL-1，ADCC活性EC50值为（8.71±1.04）ng·mL-1。结论：针对抗CD38单抗的质量属性，研究建立质控方法并进行质量研究，确保产品的安全、有效和质量可控，对抗CD38单抗的质量控制具有借鉴意义。
目的：对英夫利西单抗的质量控制项目进行趋势分析。方法：利用WEHI164-13var细胞株作为靶细胞，通过细胞增殖抑制作用，使用CellTiter 96AQueous检测试剂进行英夫利西单抗的生物学活性检测，以英夫利西单抗参比品计算供试品相对百分效价；采用分子排阻色谱方法，按面积归一化法计算单体峰面积百分比进行抗体纯度检测；采用紫外分光光度法进行蛋白质含量检测；采用电位法进行pH检测；对中国食品药品检定研究院（NIFDC）和企业质控实验室多批次英夫利西单抗的上述检测结果，分别建立警戒限（均值±2SD）和行动限（均值±3SD），绘制趋势分析图，对结果进行连续性趋势分析；并对生物学活性的检测结果进行周期性趋势分析。结果：英夫利西单抗供试品和参比品在生物学活性中均存在量效关系，符合四参数方程式：y=（A-D）/［1+（x/C）B］+D，在半对数坐标纸上呈S型曲线分布。对2008—2017年某企业65批英夫利西单抗的生物学活性检测结果显示，生物学活性相对百分效价均值NIFDC与企业分别为（98.000±9.384）%和（103.046±4.421）%；蛋白质含量均值分别为（96.431±3.000）mg·瓶-1和（99.692±1.185）mg·瓶-1；分子排阻色谱单体峰面积均值分别为（99.771±0.177）%和（99.543±0.179）%；pH均值分别为7.272±0.111和7.309±0.038。对上述结果进行连续性和周期性趋势分析，总体趋势较平稳。结论：通过对英夫利西单抗的部分关键质量属性（CQA）进行趋势分析，结果反映了该制品的变化情况，对评价英夫利西单抗的批间一致性和生产工艺稳定性提供了参考，也为其他单抗质控中的趋势分析提供重要指导。
目的：建立电化学发光免疫分析（electrochemiluminescence immunoassay，ECLI）测定贝伐珠单抗与免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ（FcγRⅠ）结合活性的方法，并评价贝伐珠单抗生物类似药（similar biotherapeutic products，SBP）候选物和其原研药（reference biotherapeutic product，RBP）与FcγRⅠ结合活性的相似性。方法：先使用封闭液对链霉亲和素（streptavidin，SA）预包被的96孔MSD板进行封闭，再将生物素（biotin）标记的FcγRⅠ与之结合，之后加入不同稀释倍数的贝伐珠单抗，最后加入SULFO-TAG（Ru（bpy）32+）标记的羊抗人检测抗体上机读数。按照试验设计分别对FcγRⅠ浓度、单抗样品初始浓度、倍比稀释倍数、检测抗体浓度等试验参数进行优化，并对优化后方法的准确性和精密性进行初步验证，还将建立的方法用于评价贝伐珠单抗SBP候选药和RBP与FcγRⅠ结合活性的相似性。结果：采用优化后的方法检测，贝伐珠单抗与FcγRⅠ的结合呈现良好的剂量效应曲线，R2>0.99。该方法具有较好的准确性和精密性，靶值为50%~150%样品的回收率在95.2%~103.7%之间；RSD均小于10%。贝伐珠单抗SBP候选药与FcγRⅠ的相对结合活性均在为RBP相对结合活性均值±3SD之间。结论：电化学发光免疫分析法能够用于评价抗体与FcγRⅠ的结合活性，并可应用于对SBP候选药和RBP与FcγRⅠ结合活性的相似性分析。该方法的灵敏度和准确性较好，为评价抗体与FcγRⅠ的结合提供了新的技术手段。
目的：探索并建立一种均相时间分辨荧光（homogeneous time-resolved fluorescence，HTRF）检测方法，用于快速、灵敏、稳定检测单克隆抗体的活性。方法：将检测试剂、待检样品加入96半孔板，室温振荡孵育3 h后在酶标仪上读取荧光信号值，用软件对信号值进行四参数曲线拟和，根据四参数方程计算单抗的相对活性；同时对该方法进行验证。结果：本文构建的检测方法呈典型的反S型剂量效应曲线，且反应缓冲液中添加0.4 mol·L-1氟化钾可提高荧光响应值。对该方法进行验证，专属性强，只与抗PD-1/PD-L1单抗发生反应；2名不同分析人员重复检测6次，相对效价范围为85%~117%，总RSD为13%；准确性良好，不同浓度供试品溶液回收率均在80%~120%范围内；理论相对活性与实际测得相对活性线性良好，相关系数在0.99以上，斜率接近1.0，符合方法验证要求。结论：通过对HTRF检测条件的摸索及验证，建立了一种新型测定单抗活性的方法，且该方法快速简便，可用于单抗的前期筛选或后期活性检测。
目的：利用转基因细胞法建立抗人表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）单抗的抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）生物学活性检测方法。方法：利用Jurkat-hFcγRⅢa-NFAT转基因细胞系作为效应细胞，SKBR3细胞系作为靶细胞，通过荧光素酶检测系统（BioGloTM Luciferase Assay system）进行抗HER2单抗的ADCC生物学活性检测，同时对试验条件进行优化及方法学验证，并将该检测方法用于不同类型的抗HER2单抗ADCC效应的评价。结果：抗HER2单抗在该方法中存在量效关系，且符合四参数方程式：y=（A-D）/［1+（x/C）B］+D，方法经优化后确定靶细胞为SKBR3细胞，抗体稀释起始工作质量浓度为4 000 ng·mL-1，1∶4倍的稀释倍数，效靶比为15∶1，诱导时间为20 h。该方法具有良好的专属性；3次独立检测的板间、日间最大诱导倍数（fold of induction，FI）及半数有效浓度（concentration for 50% of maximal effect，EC50）的RSD均小于10%；4个不同稀释组回收率样本经3次测定，相对效价分别为（46.27±2.01）%、（71.18±1.55）%、（133.17±9.91）%以及（166.55±15.73）%；对应的回收率分别为（92.53±4.01）%、（94.91±2.07）%、（106.54±7.93）%、（111.04±10.48），RSD均小于10%，且该方法也适用于不同变性程度及各类抗HER2单抗的ADCC效应评价。结论：本研究利用转基因细胞法成功建立抗HER2单抗ADCC生物学活性检测方法，该方法专属性强、重复性好，准确性高，可作为抗HER2单抗ADCC生物学活性的常规检测方法。
目的：采用成像毛细管等电聚焦电泳（imaging capillary electrofocusing electrophoresis，iCIEF）分析单抗的电荷异质性，组织国内多家质控实验室对该方法进行验证；制备用于iCIEF法的系统适用性对照品。方法：邀请19个质控实验室，应用3种品牌（4种型号）的iCIEF设备进行方法学的预验证，确定该方法的关键试剂、仪器参数设置、数据分析要点等；依据ICH_Q2_R1指导原则、2015年版《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）通则9101制定方法学验证方案，邀请11个质控实验室参加验证；制备基于iCIEF法的系统适用性对照品并利用SEC-HPLC、IEC-HPLC、非还原CE-SDS进行稳定性评价。结果：预验证结果显示：等电点标记物（pI Marker）为关键试剂；不同品牌、型号的iCIEF检测设备参数设置无需统一；数据处理可采用自动积分、手动积分相结合的形式。验证结果：完成了该方法的特异性、准确度、精密度、线性及其范围、耐用性、定量下限的评价；制备了iCIEF法的系统适用性对照品，并进行了加速及长期稳定性评价，制定了相应的合格标准。结论：首次组织了iCIEF的方法学验证，为《中国药典》标准提高提供方法学验证依据，为该方法制备了系统适用性对照品。
目的：探讨糖基化修饰对细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4抗体融合蛋白（CTLA4-Ig）融合蛋白稳定性的影响。方法：应用多种糖苷酶N-糖苷酶F（PNGase F）、内切糖苷酶F2（EndoF2）、唾液酸酶（neuraminidase）和O-糖苷酶（O-glycosidase）对样品进行处理。通过分子排阻色谱（SEC）测定不同酶切时间处理后样品纯度变化；应用差示扫描荧光（DSF）测定样品整体热力学参数的变化；应用差示扫描量热（DSC）测定样品各结构域热力学参数变化；在45℃条件下加热，分别于0、1、3、5、7、9、11和12周取样，通过SEC测定样品纯度的变化。结果：在N-糖苷酶F、内切糖苷酶F2和唾液酸酶分别处理过程中，CTLA4-Ig的聚体含量逐渐增加，而O-糖苷酶酶切过程中，聚体虽无明显变化，但碎片含量逐渐增加；经DSF测定，N-糖苷酶F和内切糖苷酶F2处理后解链温度（Tm）均明显下降，而唾液酸酶和O-糖苷酶处理后Tm无明显变化；经DSC测定，N-糖苷酶F和内切糖苷酶F2处理后Tm1下降，Tm2不变，Tm3上升，而唾液酸酶处理后Tm1和Tm3都略微有所上升，Tm2基本不变，O-糖苷酶处理后Tm值均变化；加速试验过程中，N-糖苷酶F和唾液酸酶处理样品的聚体上升，内切糖苷酶F2处理样品的的聚体不变；O-糖苷酶处理样品的的聚体不变，而碎片偏高。结论：通过多种分析手段研究发现，糖基化修饰与CTLA4-Ig的稳定性密切相关。
双特异性抗体（bsAb）因可同时特异性结合2个不同抗原表位，拓展了治疗性单克隆抗体的临床应用范围。制备bsAb需要对传统的抗体结构进行改造，在此过程中衍生出了数十种结构，不同的结构具有不同的作用特点。本综述就当前典型的bsAb结构及其原理进行介绍，对bsAb的作用原理进行分析，并对当前代表性的bsAb的研发阶段进行了简单总结。
代谢组学技术是近10年来国际上提出和发展的新型组学技术，是系统生物学的重要组成部分。其中，非靶标代谢组学是研究最早且应用最广的方法。然而，由于代谢物种类多，理化性质差异大，加之样本对环境变化较敏感，导致了样本从收集、处理到储存过程的波动都会对代谢轮廓的分析产生一定影响。此外，代谢组学研究还涉及分析科学以及化学计量学等专业知识的应用。如何应用现代高通量分析技术（核磁共振和质谱）高精度快速对大量样本进行分析，对海量的原始数据进行预处理及挖掘，对差异代谢物准确定性和定量分析，是非靶标代谢组学研究现存的难点和热点。本文综述分析了近年来非靶标代谢组学研究过程中的一些影响因素及应对策略。
逆流色谱是一种连续高效的液-液分配色谱技术，近年来已广泛应用于天然产物、合成产物中目标成分的分离纯化，在异构体分子的制备分离中也发挥了一定优势。本文以异构体类型分类总结，总结了近年来逆流色谱在构造异构体、立体异构体等异构体分子分离中的应用研究进展。
静电场轨道阱（Orbitrap）质谱是一种新型的高分辨质谱技术，具有高分辨率，高质量精度及宽动态范围等优点。该技术已为生命科学、环境检测、食品安全等领域提供了强大的技术支持，在药物分析领域中也显示出极大的应用潜力。本文综述了近几年来Orbitrap质谱在药物分析领域中的应用进展，主要包括药物代谢、中药组分分析、药品杂质检查和中成药非法添加筛查4个方面，并对其应用前景进行了展望。
目的：利用UPLC-Q-Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱仪联用技术，快速识别与鉴定补肾活血方中的化学成分。方法：采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，质谱采用负离子监测模式、全扫描及自动触发二级质谱扫描功能，对补肾活血方化学成分进行快速识别及鉴定。结果：通过质谱数据、对照品比对共鉴定出58个化合物；结果显示，补肾活血方中的主要化学成分包括异黄酮类、酚酸类、人参皂苷类及少量的环烯醚萜类化合物。结论：该研究能够快速分析和确定补肾活血方的化学成分，为确定补肾活血方防治糖尿病性视网膜病变药效物质提供了依据。
目的：通过对6个不同产地的佛手药材进行定性、定量分析，结合数学模型，找出不同产地佛手药材的差异性。方法：采用Kromasil C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈为流动相A，0.5%醋酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，检测波长284 nm，柱温25℃，流速1.0 mL·min-1，进样量10 μL。对佛手药材中的主要成分—橙皮苷进行定量测定，同时建立了佛手药材的特征图谱。采用ChemPattern型软件构建数学模型，对测定数据进行多元统计分析。结果：以外标法测定18批不同产地的佛手样品中橙皮苷的含量范围为0.019~0.161。特征图谱分析确定了6个共有色谱峰。浙江、福建、四川、广东、广西产的佛手与共有模式比较，相似度在0.85以上，云南产佛手与共有模式比较相似度在0.80以下。数学模型分析结果显示，广东、广西、四川产佛手相距较近。浙江、福建、云南产佛手在建立的模型中与广东、广西、四川的样品相距较远。结论：不同产地的佛手药材，其橙皮苷含量差异明显，通过相似度分析和数学模型统计分析特征图谱数据，可以很好地区分不同产地的佛手药材。
目的：建立手性非水毛细管电泳法（NACE法）测定酒石酸美托洛尔片剂中对映体的含量。方法：以D-葡萄糖酸-硼酸络合酸为手性选择剂，在优化过的NACE手性分离条件下展开相关研究。优化的NACE手性分离条件：未涂层熔融石英毛细管（ 55.0 cm×50 μm，有效长度为45.0 cm）；背景缓冲液为含8 mmol·L-1 D-葡萄糖酸、120 mmol·L-1硼酸、43.2 mmol·L-1三乙胺的甲醇溶液；10 cm，5 s重力进样；运行电压20 kV；检测波长224 nm；柱温为室温。结果：酒石酸美托洛尔的2个对映体质量浓度在7.5~250.0 μg·mL-1范围内，与峰面积呈现良好的线性关系；对映体1的定量下限和检测下限分别为7.5 μg·mL-1和2.5 μg·mL-1；对映体2的定量下限和检测下限分别为25.0 μg·mL-1和7.5 μg·mL-1；对映体1和对映体2的加样回收率分别为99.7%、98.0%、97.2%和97.7%、98.0%、98.0%，均在95.0%~105.0%范围内。6个批次的酒石酸美托洛尔片剂中对映体1和对映体2的标示量百分含量均在96.6%~102.5%之间。结论：该方法经验证可用于酒石酸美托洛尔片剂中对映体含量的测定。
目的：探索斯诺普利（Cap-NO）干预循环肿瘤细胞（CTCs）粘附于人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的作用。方法：UV-Vis检测在不同时间点及不同浓度梯度下Cap-NO的特征吸收峰（300 nm）峰值；MTT法检测Cap-NO对HUVECs和HT-29的毒性；粘附实验检测Cap-NO抑制肿瘤细胞HT-29粘附到HUVECs的效率；流式检测Cap-NO对肿瘤细胞粘附分子及整合素活性的作用；qRT-PCR和三磷酸腺苷（ATP）检测Cap-NO对肿瘤细胞HK1、HK2、MMP2的mRNA表达和ATP水平。结果：Cap-NO的特征峰（300 nm）峰值，随着浓度的减小和时间的延长而减小；Cap-NO对2种细胞都表现为低毒性；Cap-NO可抑制肿瘤细胞粘附到人脐静脉内皮细胞，且与给药浓度成正比；对肿瘤细胞的分子CD44具有抑制作用，且与给药浓度成正比；Cap-NO也可抑制HK1、HK2、MMP2的mRNA表达并降低ATP的形成，抑制肿瘤能量代谢。结论：Cap-NO是一种有效的NO供体化合物，在低细胞毒性浓度范围内能有效干预肿瘤细胞粘附于血管内皮细胞，抑制肿瘤细胞能量代谢，可能具有预防肿瘤转移的作用。
目的：研究一枝蒿黄酮类成分6-去甲氧基-4'-O-甲基茵陈色原酮（DM）在Caco-2细胞模型中的转运特性。方法：采用Caco-2细胞单层模型研究DM的双向转运，考察药物质量浓度、方向和温度对DM细胞转运的影响。应用HPLC法，采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%醋酸水溶液为流动相，流速1.0 mL·min-1，检测波长280 nm，柱温25℃，检测DM在介质中的含量，计算其表观渗透系数（Papp）。结果：DM的细胞转运Papp随着浓度的增大而减小，呈现浓度依赖性；低温条件下时，DM的双向的Papp值均显著性降低。结论：DM在Caco-2细胞单层模型中的转运过程主要以主动转运载体介导的方式，没有方向依赖性，也不涉及外排蛋白转运载体。
目的：从分子生物学的角度比较分析冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草的核糖体DNA内部转录间隔区（ITS）和细胞色素C氧化酶亚基1（CO Ⅰ）条形码序列，并验证冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草虫和菌的来源是否符合《中华人民共和国药典》规定。方法：通过聚合酶链式反应（PCR）对冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草的ITS和CO Ⅰ序列进行扩增，利用邻接法比较冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草的亲缘关系；通过与GenBank数据库进行Blast比对，确定冬虫夏草虫与菌的科属。结果：冬虫夏草人工繁育品与野生冬虫夏草ITS和CO Ⅰ序列的电泳结果均显示为明亮单一条带，且条带大小介于500 bp和750 bp之间；CO Ⅰ序列的系统树结果中冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草除野生冬虫夏草-18、野生冬虫夏草-20这2个样品均各自聚为一支，且支持率为99%，呈现良好的单系性，ITS序列的系统树结果中冬虫夏草人工繁育品和野生冬虫夏草混聚在一起，没有明确的分支；冬虫夏草人工繁育品的CO Ⅰ序列经GenBank数据库比对结果均为小金蝠蛾（Hepialus xiaojinensis），为蝙蝠蛾科Hepialidae sp.昆虫，野生冬虫夏草的CO Ⅰ序列经GenBank数据库比对结果均为蝙蝠蛾科Hepialidae sp.昆虫，其中野生冬虫夏草-8为人支蝠蛾（Thitarodes renzhiensis），野生冬虫夏草-12为贡嘎蝠蛾（Thitarodes gonggaensis），冬虫夏草人工繁育品及野生冬虫夏草的ITS序列与GenBank数据库比对后，相似度达99%以上，比对结果显示20批冬虫夏草人工繁育品和26批野生冬虫夏草的虫菌均为冬虫夏草菌（Ophiocordyceps sinensis）。Ophiocordyceps sinensis和Cordyceps sinensis为同物异名。结论：20批冬虫夏草人工繁育品的虫体及虫菌来源与26批野生冬虫夏草的虫体及虫菌来源均符合《中华人民共和国药典》2015年版中的描述：冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis（Berk.）Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。
目的：采用色谱-质谱联用技术鉴定佐匹克隆的有关物质。方法：采用Phenomenex Luna 5u SCX 100A（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以甲醇-乙腈-乙酸铵缓冲液为流动相，梯度洗脱，对佐匹克隆有关物质进行分离，采用电喷雾正离子化-飞行时间质谱法（ESI+-TOF/MS）测定各有关物质母离子的准确质量和元素组成，三重四极杆质谱测定子离子特征，结合对照品对照确定有关物质结构。结果：在所建立的条件下，佐匹克隆及其有关物质分离良好，检测并鉴定出7个主要有关物质。结论：色谱-质谱联用技术能有效地分离鉴定佐匹克隆中的有关物质，鉴定结果可为其质量控制和工艺优化提供参考依据。
目的：建立高效液相色谱法测定塞来昔布原料药的有关物质。方法：采用SUPELCOSIL LC-DP（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以20 mmol·L-1磷酸二氢钾水溶液（磷酸调pH为3.0）-甲醇-乙腈（60∶30∶10）为流动相，流速1.5 mL·min-1，柱温60℃，检测波长215 nm。结果：塞来昔布与6个已知杂质A~F色谱峰之间的分离度良好，其中杂质E、F在各自的线性范围内线性关系良好（r2>0.999，n=6）。3批塞来昔布样品测定结果显示，已知杂质及其他最大单个杂质均小于0.01%，杂质总含量小于0.05%。结论：经方法学验证，本法灵敏度高，专属性好，可用于塞来昔布原料药有关物质的测定。
目的：联合质量平衡法、差示扫描量热法及定量核磁共振法3种定值方法测定熊果苷对照品的纯度。方法：首先，采用高效液相色谱法和气相色谱法测定熊果苷对照品的色谱纯度，采用卡尔费休库伦法、电感耦合等离子体质谱法、顶空气相色谱法分别测定其水分、灰分和残留溶剂，由质量平衡法计算熊果苷对照品的纯度；其次，采用差示扫描量热法对熊果苷对照品纯度加以验证；最后，以定量核磁共振法测定其绝对纯度。结果：质量平衡法和差示扫描量热法定值结果经科克伦法判定互为等精度，取其算术平均值作为最终定值结果，即熊果苷对照品纯度为99.12%，RSD为0.029%；定量核磁共振法测定结果为99.12%，RSD为0.036%。结论：质量平衡法、差示扫描量热法及定量核磁共振法对熊果苷对照品的定值结果基本一致，3种方法能够更好地保证熊果苷对照品赋值的准确性。
目的：建立二乙酰吗啡含量的1H定量核磁共振（1H qNMR）测定方法。方法：以对苯二甲酸二甲酯基准试剂为内标，以氘代氯仿为溶剂，采用Bruker Avance Ⅲ 600型核磁共振谱仪，noesyigld1d脉冲序列在恒温25℃下获取1H NMR谱，测定二乙酰吗啡的含量，驰豫延迟时间为25 s。结果：以二乙酰吗啡的峰（δ 6.76）及对苯二甲酸二甲酯（δ 8.10）峰作为定量峰，测得精密度RSD（n=5）为0.22%，重复性RSD（n=5）为0.43%。1H qNMR测得二乙酰吗啡的含量为98.7%，与质量平衡法结果98.7%（HPLC）、98.3%（GC）以及DSC法结果98.4%基本一致。结论：建立的1H qNMR可测定二乙酰吗啡的含量。此方法准确快捷，简单易行，是对标准物质含量测定的一种良好的补充方法。
探索对药品主成分测定类方法可靠性评价的指标和标准。以美国药典论坛中<1200>、<1210>和USP通则<1225>指导原则为基础，以《中华人民共和国药典》2015年版二部赖诺普利含量测定项下方法为研究对象，应用统计学方法对含量测定方法进行了联合准确度和精密度、线性及范围的考察。该方法从统计学的角度，通过兼顾准确度、精密度和线性的实验设计，确保了该测定法所得到的结果具有较高的概率以达到标准中所规定的限度。该研究符合分析目标特征（analytical target profile，ATP）和决策准则（decision rules，DR）的理念，并与风险控制和科学公正检验的理念相一致。
