2025年, 第45卷, 第10期　
刊出日期：2025-10-31

  

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干细胞产品质量研究与检测专栏（续）
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  3种分子检测技术在人源干细胞种属鉴别和细胞交叉污染检测上的应用研究^*

  刘明月, 李慧婷, 付欣悦, 曹译丹, 张瑞瑞, 董莹莹, 陈晓菲, 庞琳, 饶春明

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1649-1659. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0166

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  目的: 探索基于分子技术的STR法、DNA条码法和种属特异性PCR法在人源干细胞种属鉴别和细胞系交叉污染检测的有效性和实用性,用于相应细胞产品的质量控制。方法: STR分型通过提取样品基因组扩增20个STR位点和1个性别位点,进行人源干细胞鉴定和交叉污染检测。DNA条码法通过扩增线粒体的COⅠ基因序列,进行序列比对分析鉴别人源干细胞种属及种属间交叉污染。种属特异性PCR法通过特异性扩增保守线粒体COⅠ基因和细胞色素B基因,进而鉴别人源干细胞种属及种属间交叉污染,比较3种方法的优劣。结果: 基于分子技术的STR法、DNA条码法和种属特异性PCR法均能够准确地鉴别出人源干细胞种属,STR法检测人脐带间充质干细胞、人原代脂肪间充质干细胞等人源细胞系均能够产生良好的等位基因峰,形成各自独特的STR图谱;在细胞交叉污染检测方面,STR法可以检测人源干细胞种属内的污染,但不能检测人源干细胞与其他种属间的污染,如与小鼠细胞、仓鼠细胞的种属间污染。DNA条码法检测人脐带间充质干细胞、人原代脂肪间充质干细胞等人源细胞系均能够使用BOLD系统鉴定引擎识别其对应种属;在细胞交叉污染检测方面,DNA条码法能够检测人源干细胞与其他种属细胞系间的污染,但灵敏度与种属类别相关,部分种属间交叉污染检测灵敏度比较低,而且不能够检测人源干细胞与其他人源细胞的种属内污染。种属特异性PCR法检测人原代脂肪间充质干细胞能够得到预期的391 bp的特异性条带大小。在细胞交叉污染检测方面,种属特异性PCR法能够高效地检测出人源干细胞与其他种属细胞之间的污染,检测灵敏度高于DNA条码法,但检测的种属范围受实验通量的限制。结论: 该3种方法均能够用于鉴别人源干细胞种属,但在检测人源干细胞种属内或种属间污染时,应综合考虑使用多种检测方法,可达到有效检测细胞系间交叉污染的目的,为人源干细胞的质量安全提供重要保障。
  
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  干细胞制品HIV-1病毒检测RT-qPCR方法的建立^*

  袁子维, 王瑶, 李瑶玲, 房吉庆, 杨英, 饶春明

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1660-1669. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0227

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  目的: 建立一种多引物对检测HIV-1病毒的逆转录实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法,用于干细胞产品的病毒安全性质量控制。方法: 利用SnapGene软件,选择HIV-1病毒gag-pol基因相对保守位置设计多组模板引物探针,建立RT-qPCR探针法,验证方法的特异性、灵敏度、精密度和耐用性。结果: 本方法共设计6组引物探针,可检测到83.0%的HIV-1病毒,hMSCs无明显扩增曲线,加标回收率为70%~130%;检测灵敏度为2 copies · μL^-1;重复性验证通过检测3个不同拷贝浓度质粒对照品（2×10⁷、2×10⁵、2×10³ copies · μL^-1）进行评价,3个浓度的3次重复检测的RSD为2.2%~8.3%;使用不同型号荧光定量PCR系统对上述3个浓度质粒对照品进行耐用性验证,结果显示RSD为0.34%~2.3%。结论: 本研究建立的检测HIV-1病毒的方法特异性和重复性好,灵敏度高,经验证可用于生产检定用细胞基质、干细胞制品HIV-1的检测。
  
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  Adv载体PCV3-B19-TTSuV1假病毒作为PCR检测阳性对照的研究与应用^*

  李瑶玲, 王瑶, 房吉庆, 袁子维, 杨英, 饶春明

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1670-1679. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0025

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  目的: 通过荧光定量PCR（qPCR）和微滴数字PCR（ddPCR）技术评价多基因假病毒作为外源病毒PCR检测阳性对照的可行性。方法: 采用qPCR法和ddPCR法检测Adv载体PCV3-B19-TTSuV1假病毒（以下简称为PBT3）中4个基因片段的拷贝数,并进行比较研究;采用ddPCR法检测PBT3假病毒B19基因拷贝数,以2倍进行稀释,选择3个倍比稀释度,评价ddPCR法检测假病毒基因拷贝数的准确性;采用ddPCR法检测pDC-PBT3质粒DNA对照品拷贝数,与吸收度法计算的理论拷贝数进行比较研究;采用qPCR法检测人间充质干细胞中B19病毒,评价PBT3假病毒作为外源病毒PCR检测阳性对照的适用性。结果: 采用qPCR法检测,结果显示PBT3假病毒4个基因片段的拷贝数分别为（8.23±0.62）×10⁵、（8.58±1.35）×10⁵、（9.66±0.12）×10⁵和（8.17±0.36）×10⁵ copies · µL^-1,4个基因片段拷贝数比例为1.00 ∶ 1.04 ∶ 1.17 ∶ 0.99,接近1 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 1;采用ddPCR法检测,结果显示PBT3假病毒4个基因片段的拷贝数分别为（4.62±0.23）×10⁵、（4.84±0.01）×10⁵、（4.92±0.04）×10⁵和（4.62±0.12）×10⁵ copies · µL^-1,4个基因片段拷贝数比例为1.00 ∶ 1.05 ∶ 1.06 ∶ 1.00,接近1 ∶ 1 ∶ 1 ∶ 1。ddPCR法扩增倍比稀释的PBT3假病毒B19基因片段,阳性微滴比例为4.00 ∶ 2.05 ∶ 1.16。ddPCR法与qPCR法的比较研究结果显示,ddPCR法测得PBT3假病毒基因拷贝数为qPCR法检测结果的0.51~0.57倍,ddPCR法测得pDC-PBT3质粒DNA拷贝数与经典吸收度法拷贝数的理论值比值在0.47~0.75。进一步的应用研究结果显示,qPCR法检测人间充质干细胞B19病毒的2个基因片段的适用性样品回收率分别为68.2%和72.0%。结论: 多基因假病毒可作为外源病毒PCR检测的阳性对照,具有经济、安全及质量可控等优点。
  
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  干细胞检测实验室及质量控制体系的建立^*

  韩春乐, 周金, 杨英, 陈嘉, 廉亦冰, 曹译丹, 张萌, 庞琳, 翟永召, 饶春明

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1680-1689. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0161

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  干细胞检测实验室及其质量控制体系的建立是确保干细胞产品安全和有效的重要保障。通过科学规划和高效实施,干细胞检测实验室能够为干细胞研究与生产提供可靠的技术支持,确保实验数据的准确性、可追溯性以及干细胞产品的安全性和有效性。本文系统综述了干细胞检测实验室建设的关键环节,包括选址与布局、功能分区、环境控制、安全规范、设备配置,同时重点概述质量控制体系的建立,为相关企业及研究机构提供参考,促进干细胞产品的临床研究和产业化进程。
  
综述专论
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  基于LC-MS/MS的分子网络在化学成分表征中的研究进展^*

  杨志明, 胡倩南, 李翔, 詹志来, 邱子栋, 华羽彤, 康利平

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1690-1699. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0083

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  高效实现天然产物成分的表征鉴定是阐明其药效物质基础和药物作用机制的前提。近年来,基于液相质谱-串联质谱（LC-MS/MS）的分子网络技术已被广泛应用于中药、微生物、海洋生物、真菌及植物等天然产物的定性研究中,其对化合物的发现和鉴定比传统方法省时省力,具有强大的快速定性能力。本文以分子网络为主线,通过系统查阅国内外近10年的文献,在对分子网络技术的构建及其发展简要概述的基础上,不仅描述了多种分子网络技术的应用,还从定性、定量、活性成分的筛选与鉴定、代谢组学中的应用和辅助疾病诊断5个方面进行研究进展介绍,并基于分子网络的研究现状提出了下一步发展的建议。
成分分析
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  补白乳膏中7个成分含量的UPLC-MS/MS同时测定研究^*

  孙启予, 张晓琳, 王强利, 赖美玲, 唐明慧, 于宸华, 张萍, 王莹

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1700-1708. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0133

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  目的: 建立卡马西平和甘草苷为内标的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法同时测定补白乳膏中补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚、欧前胡素和异欧前胡素7个特征成分的含量。方法: 采用ACQUITY BEH C₁₈（150 mm×2.1 mm,1.7 μm）微径柱,以0.05%乙酸甲醇-0.05%乙酸1 mmol · L^-1乙酸铵水溶液为流动相,梯度洗脱。质谱检测采用电喷雾离子源（ESI）和多反应监测模式（MRM）;补骨脂酚和甘草苷为负离子化检测,其他成分均正离子化检测。结果: 补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚、欧前胡素和异欧前胡素均在各自浓度范围内呈良好线性响应（r≥0.993 5）,平均加样回收率（n=6）为96.2%~102.1%,RSD为0.8%~4.4%。补白软膏中7个成分的含量在0.012 6~2.868 mg · g^-1。所建方法专属、准确,灵敏度高。3批样品中补骨脂酚含量最高,其次为补骨脂苷、异补骨脂苷及其苷元,欧前胡素和异欧前胡素含量较低。结论: 研究结果可为补白乳膏的质量控制提供参考。
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  UFLC-MS/MS法同时测定加味西黄丸中5个成分的含量^*

  杨艳, 宫睿, 王星, 李玉华, 于文杰, 刘杨, 李乐乐, 于春宇, 关皎, 朱鹤云

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1709-1716. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0241

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  目的: 建立一种同时测定加味西黄丸中5个成分（沙蟾毒精、蟾毒它灵、蟾毒灵、酯蟾毒配基和华蟾酥毒基）含量的超快速液相色谱-串联质谱法。方法: 运用UFLC-MS/MS技术,采用Shimadzu Shim-Pack XR-ODS（75 mm×3.0 mm,2.2 μm）色谱柱,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱,流速0.6 mL · min^-1,柱温35 ℃;采用电喷雾离子源,正离子方式检测,多反应监测模式。结果: 沙蟾毒精、蟾毒它灵、蟾毒灵、酯蟾毒配基和华蟾酥毒基的质量浓度分别在0.1~4 μg · mL^-1（r=0.999 3）、0.05~2 μg · mL^-1（r=0.998 3）、0.05~2 μg · mL^-1（r=0.998 7）、0.025~1 μg · mL^-1（r=0.999 6）、0.1~4 μg · mL^-1（r=0.999 0）范围内与峰面积呈良好的线性关系;5个成分的平均回收率（n=9）分别为99.1%、98.9%、100.0%、98.9%和99.7%。6批次加味西黄丸样品中上述5个成分的含量范围分别在19.28~23.58、3.31~4.04、3.64~4.30、1.58~1.93、5.54~6.91 μg · g^-1。结论: 本方法简便、快速,灵敏度高,可用于加味西黄丸的质量控制研究。
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  基于指纹图谱和多成分定量结合化学计量学及熵权TOPSIS法评价新疆不同产地桑椹质量^*

  谭梅娥, 罗永冬, 帕依曼·亥米提, 于宁

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1717-1729. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2024-1211

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  目的: 建立桑椹HPLC指纹图谱及同时测定8个化学成分（原儿茶酸、隐绿原酸、绿原酸、新绿原酸、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、金丝桃苷、芦丁及异槲皮苷）含量的方法,结合化学计量学及熵权TOPSIS法评价新疆不同产地不同批次桑椹的质量,为桑椹质量控制提供参考。方法: 采用SHIMADZU VP-ODS C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL · min^-1,检测波长分别为260 nm（原儿茶酸、金丝桃苷、芦丁、异槲皮苷）、330 nm（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸）、520 nm （矢车菊素-3-O-葡萄糖苷）,柱温30 ℃。测定新疆不同产地不同批次桑椹中原儿茶酸、隐绿原酸、绿原酸、新绿原酸、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、金丝桃苷、芦丁及异槲皮苷的含量并建立其HPLC指纹图谱,通过与对照品比对,对其共有峰进行指认。利用聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）及熵权TOPSIS法对15批桑椹质量差异性进行分析,综合评价共同构建桑椹质量评价模型。结果: 15批桑椹指纹图谱相似度为0.962~0.998,共标定20个共有峰,指认8个色谱峰。通过化学计量学分析将其归为2类,S1~S3、S5、S7~S11、S14、S15共11批样品归为Ⅰ类,S4、S6、S12、S13共4批样品归为Ⅱ类,OPLS-DA共筛选出5个主要差异性成分。含量测定结果显示原儿茶酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、金丝桃苷、芦丁、异槲皮苷含量范围分别为0.033 5~0.240 2、0.293 1~0.443 4、0.128 1~0.393 7、0.322 8~0.580 0、1.831 9~5.476 3、0.007 0~0.024 8、0.528 1~1.211 0、0.209 4~0.396 6 mg · g^-1, 表明不同批次间各成分含量存在一定差异,熵权TOPSIS法对15批桑椹质量进行了评价及排序。结论: 建立的指纹图谱和多成分含量测定结合化学计量学及熵权TOPSIS分析评价方法稳定可行,准确度高,重复性好,可用于桑椹质量控制。
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  基于化学计量和多组分定量的不同产地鸡血藤差异分析^*

  张宇, 郭晓晗, 王献瑞, 武哲, 张欣悦, 李灵犀, 程显隆, 魏锋

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1730-1741. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0266

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  目的: 基于化学计量学对不同产地鸡血藤进行化学成分差异分析,寻找差异性标识成分;通过多组分定量分析,明确不同产地鸡血藤化学成分的含量差异为评价不同产地的鸡血藤质量提供科学依据。方法: 采用Waters XTerra C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱,体积流量1 mL · min^-1,检测波长260 nm,柱温25 ℃,进样体积25 μL,建立鸡血藤指纹图谱;基于化学计量学进行差异分析,采用HPLC法同时测定不同产地鸡血藤的多组分含量。结果: 鸡血藤指纹图谱相似度在0.713~0.979,鉴定了表儿茶素、儿茶素、芒柄花素、原儿茶酸、染料木素、毛蕊异黄酮、大豆苷元7个成分。聚类分析和主成分分析均表明来源于中国（广西、云南）及越南鸡血藤可聚为一类,与老挝鸡血藤明显区分。基于OPLS-DA分析,大豆苷元等成分的VIP>1.0,是老挝鸡血藤区别于其他产地鸡血藤的关键成分,而多组分定量结果表明儿茶素、表儿茶素的含量相对较高,质量分数范围分别是0.064 8~0.555 9、0.198 8~0.894 5 mg · g^-1。结论: 基于化学计量和多组分定量分析,可为鸡血藤质量控制研究,规范评价体系提供科学依据。后续研究可以将儿茶素、表儿茶素作为质控指标成分开展标准化研究,以大豆苷元、芒柄花素等作为鸡血藤产地归属的差异性标识成分。
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  右佐匹克隆和左佐匹克隆的绝对构型研究^*

  周晓力, 赵辰, 李莉, 尹利辉

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1742-1748. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0055

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  目的: 对右佐匹克隆和左佐匹克隆采用电子圆二色（ECD）光谱和振动圆二色（VCD）光谱研究其绝对构型。方法: 采用JASCO-1500型圆二色光谱仪对右佐匹克隆和左佐匹克隆进行ECD表征,波长范围为400~190 nm,数据点步长为0.5 nm,光程长度为1 mm,数字积分时间为1 s,狭缝宽度为1.0 nm,扫描速度为100 nm · min^-1;采用FVS-6000型振动圆二色光谱仪对右佐匹克隆和左佐匹克隆进行VCD表征,波数范围为1 850~950 cm^-1,数据点步长为0.96 cm^-1,光程长度为150 µm,累积次数为5 000;使用Gaussian 16软件采用含时密度泛函理论进行量化计算,预测理论ECD光谱,并与实验ECD光谱比较,以解析对映体的绝对构型。结果: 详细表征了右佐匹克隆和左佐匹克隆的ECD和VCD光谱学特征,右佐匹克隆与左佐匹克隆样品的ECD和VCD光谱中Cotton效应的位置一致,符号相反,强度接近,可以确定它们的绝对构型相反。通过量化计算验证了右佐匹克隆样品的绝对构型为S型,左佐匹克隆样品的绝对构型为R型。结论: 将ECD光谱与量子化学计算相结合的方法确认了右佐匹克隆和左佐匹克隆的绝对构型,该技术在对照品标定过程中,可高效辅助手性化合物对照品的绝对构型确证。
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  液液萃取-离子色谱法测定酮康唑乳膏中亚硫酸钠含量^*

  丁德民, 信长颖, 寻延滨, 于新颖, 赵龙山, 王常禹, 杨利红

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1749-1755. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2024-1183

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  目的: 建立离子色谱法测定酮康唑乳膏中亚硫酸钠含量,并评价不同厂家酮康唑乳膏中抗氧剂亚硫酸钠含量的差异。方法: 样品采用乙酸乙酯溶解后,分别用0.1%乙醛溶液与正己烷两步萃取,经阴离子交换色谱柱Dioneslon Pac AS11（250 mm×4 mm,9 µm）分离,以氢氧化钾溶液为淋洗液,梯度洗脱,流速1.0 mL · min^-1,进样体积25 μL,柱温35 ℃。抑制型电导检测器检测。结果: 亚硫酸钠质量浓度在0.001~0.04 mg · mL^-1范围内线性关系良好,相关系数为0.999 1;平均加样回收率（n=9）为93.9%,供试品溶液避光条件下8 h内稳定。处方中含抗氧剂亚硫酸钠的10家企业的85批样品中,亚硫酸钠含量为处方量的2%~83%,其中14批样品中亚硫酸钠含量低于处方量的40%。结论: 该方法可用于测定酮康唑乳膏中抗氧剂亚硫酸钠的含量,为酮康唑乳膏有效期的确定和有关物质产生的原因分析提供参考。
生物检定
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  重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）生物学活性参考品的研制^*

  曹莎莎, 何鹏, 王先翔, 刘晓雅, 韦芬, 李静静, 刘宇, 王婷婷, 王辰飞, 王佳霁, 胡忠玉

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1756-1764. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2024-1237

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  目的: 研制重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）生物学活性参考品,用于其体外相对效力及小鼠体内效力评价。方法: 选取检定合格的重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）原液,经标定蛋白质含量后,加入佐剂制备的疫苗作为候选参考品;候选参考品经成品检验合格后,进行均一性检查;经5次独立试验使用Ⅲ期临床批疫苗制剂对候选参考品进行体外相对效力及小鼠体内效力检项标定;将候选参考品置（37±2）℃、（5±3）℃考察,分析其稳定性;分别应用Ⅲ期临床批疫苗制剂和候选参考品对6批待测疫苗制剂进行体外相对效力和小鼠体内效力适用性测试。结果: 重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）生物学活性参考品成品检定项目均符合规定;装量不低于标示量且精确度在±1%以内,粒径大小与分布D10、D50、D90的RSD分别为0.45%、0.39%、0.54%,抗原含量RSD为2.7%;Ⅲ期临床批疫苗制剂标定候选参考品,体外相对效力和小鼠体内效力均不低于0.5,且几何均值均为1.0,体外相对效力和小鼠体内效力几何变异系数（GCV）分别为8.9%、31%;候选参考品在（37±2）℃放置28 d、（5±3）℃放置36个月,体外相对效力及小鼠体内效力无明显上升或下降趋势,表明候选参考品稳定性较好;6批待测疫苗制剂体外相对效力和小鼠体内效力检测结果分布范围分别在0.9~1.0和0.7~1.4,表明候选参考品与原参考品一致性较好。结论: 重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）生物学活性参考品,可用于同质重组新型冠状病毒蛋白疫苗（CHO细胞）体外相对效力及小鼠体内效力评价。
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  人乳头瘤病毒16型L1抗原肽图检查方法的建立及色谱特征峰鉴定分析^*

  李涛, 刘冰, 唐茂玲, 胡蓉, 王萌, 梁昊宇, 许楠, 邹寒艳, 黄维金, 聂建辉

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1765-1781. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0264

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  目的: 建立和优化适用于不同表达系统的人乳头瘤病毒16型L1抗原的肽图检查方法,并鉴定肽图特征峰的肽段,保障该方法在16型L1抗原质量控制中的适用性和科学性。方法: 采用ZORBAX SB-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以0.1%三氟乙酸-水为流动相A,0.1%三氟乙酸-乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速1.0 mL · min^-1,检测波长214 nm,柱温30 ℃的色谱参数,筛选出对不同表达系统16型L1抗原肽图检查的最佳样品前处理方法。采用电喷雾离子源（ESI+）,正离子模式,数据依赖型扫描进行鉴定分析,一级扫描范围m/z为150~2 000,分辨率为70 000,AGC target 3×10⁶;二级分辨率为17 500,AGC target 1×10⁵的质谱分析参数鉴定差异特征峰和有效表位肽段所在特征峰。结果: 本研究建立的适用不同表达系统的人乳头瘤病毒16型L1抗原肽图检查方法最佳蛋白酶解量为400 μg,蛋白酶与蛋白质的含量比为1 ∶ 50,37 ℃条件下酶切时间为20 h;方法重复性检查中14个峰高最高的共有特征峰保留时间的RSD不高于0.15%,夹角余弦法检测肽图相似性不低于0.987;日间精密度检测4家企业的样品共有特征峰保留时间的RSD最大值不高于0.34%,相似性不低于0.911;质谱鉴定分析了氨基酸序列差异及特征峰差异对肽段分布的影响,并鉴定了L1抗原主要抗原表位肽段对应特征峰的位置。结论: 本研究建立了适用于来自不同表达系统的HPV 16型L1抗原肽图分析方法,并通过特征峰的肽段鉴定,明确了差异特征峰成分和抗原表位肽段所在特征峰。
质量分析
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  基于HPLC结合化学计量学对不同采收期亳白芍化学成分动态累积规律的研究^*

  荣昱, 程璐, 陈晓桐, 邓晨陽, 罗云, 金传山, 刘军玲, 汪小莉

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1782-1793. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2025-0156

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  目的: 研究不同采收期亳白芍中化学成分的动态累积规律,确定最佳采收期,为道地产区亳白芍品种合理采收提供参考。方法: 建立白芍HPLC指纹图谱,采用Thermo C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,检测波长230 nm,柱温30 ℃,体积流量1.0 mL · min^-1,进样量10 μL。运用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》对不同采收期白芍的指纹图谱进行相似度评价;应用化学计量学软件进行差异性及相关性分析。结果: 4~12月白芍指纹图谱共匹配出7个共有峰,相似度范围为0.925~0.996。经与对照品比对,指认出没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酰芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷7个色谱峰并对其中5个成分进行含量测定。不同采收期白芍没食子酸、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酰芍药苷质量分数范围分别为0.620~1.074、0.637~1.253、4.144~9.896、26.480~39.191、0.343~0.913 mg · g^-1。不同生长期内含量测定结果差异较大,开花期白芍含量下降,地上部分开始枯萎后有效成分逐渐升高,9~10月含量较高且趋于稳定。聚类分析与主成分分析可把4~12月白芍聚为4类：4月单独成类;5月、11~12月聚为1类;6~8月归为1类;9~10月另成1类。结论: 以9~10月为亳白芍最佳采收期;不同采收期内芍药内酯苷与儿茶素呈显著正相关,芍药苷与没食子酰芍药苷呈显著正相关;正交偏最小二乘判别分析显示,芍药内酯苷、芍药苷可作为评价不同采收期白芍的关键性指标成分。
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  基于超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱和机器学习算法的茜草掺伪分析^*

  王献瑞, 武哲, 韩婷, 郭晓晗, 李明华, 荆文光, 程显隆, 魏锋, 安抚东

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1794-1804. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2024-1158

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  目的: 基于超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱（UHPLC-Q TOF MS^E）分析,结合机器学习算法构建并优选鉴定辨识模型,以期实现茜草掺伪的数字化鉴定。方法: 首先茜草、大叶茜草、大茜草、小红参、藏茜草以及茜草掺伪品超声（功率500 W,频率40 kHz）处理0.5 h后,经Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）色谱柱分离,以乙腈-0.1%甲酸水为流动相,进行梯度洗脱,电喷雾正离子化Q TOF/MS^E,m/z 100~1 200内进行扫描并进行数字量化处理。然后通过快速过滤算法进行特征筛选。最后以筛选的特征变量结合不同机器学习算法构建鉴定模型,并根据准确率、精确率、召回率等参数优选最佳模型进行外部鉴定验证分析。结果: 基于快速过滤筛选算法,筛选得到153个特征数据变量。而结合支持向量机算法构建的鉴定模型具有最佳辨识效果,准确率、精确度以及召回率均不低于0.990,且外部掺伪鉴定验证的正确率高达100%。结论: 基于UHPLC-Q TOF MS^E和支持向量机算法有助于茜草的掺伪数字化分析,具有一定的实用价值。
安全监测
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  环形离子淌度质谱在多肽类已上市药物拓扑异构体分析中的应用研究^*

  朱绍洲, 樊丽姣, 张拓, 孙葭北, 姚静, 黄海伟

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1805-1815. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2024-1291

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  目的: 在空间维度上,探究环形离子淌度质谱（cIM-MS）对多肽类已上市药物拓扑异构体进行定性检测的可行性,开发多肽类药物拓扑异构体的质量控制策略。方法: 以特利加压素、莫替福肽和替尔泊肽3种多肽类已上市药物的原料药为例进行方法开发,将3种药物分别在0、50、80 ℃条件下处理4 h,采用直接进样法对处理过的药物进行cIM-MS分析,检测这3种药物在不同条件下的构象变化。结果: 这3种已上市药物特利加压素、莫替福肽和替尔泊肽在0 ℃处理条件下均存在拓扑异构体。在稳定性加速实验中,分子量较小的特利加压素在0、50、80 ℃ 3个温度条件下构象未发生明显变化,显示低分子量多肽药物的拓扑结构较为稳定;分子量较大的莫替福肽在3个温度下构象发生了明显变化,在高温条件下产生了可分离的拓扑异构体;大分子量的替尔泊肽在0、50 ℃条件下存在拓扑异构体,在80 ℃高温条件下发生降解。采用cIM-MS中的环形淌度可以精准识别这3种已上市药物的折叠、解体等构象变化。结论: cIM-MS可对复杂多肽类已上市药物原料药的空间构象进行精准分析,能够检测和分离复杂药物微小的构象变化,方法操作简单、准确度高,可用于复杂多肽类已上市药物的构象测定及质量控制。
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  盐酸伊伐布雷定有关物质的二维液相色谱-质谱联用分析

  金雅文, 朱琼, 郑忠辉, 钞瑞瑞, 练洵羽, 李福享, 王宜运, 杭太俊, 尹莉芳

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1816-1825. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2024-1319

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  目的: 基于二维高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱技术,鉴定盐酸伊伐布雷定原料及其强制降解样品有关物质的结构。方法: 采用ODS（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾4.54 g,加水1 000 mL溶解,用85%的磷酸调节pH至3.0）-乙腈为流动相,进行一维梯度洗脱,对盐酸伊伐布雷定及按ICH指导原则强制降解样品的有关物质进行分离;再经ODS（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以0.1%甲酸水-甲醇为流动相,进行二维梯度洗脱,实现各有关物质与不挥发性盐的良好分离后,进行电喷雾正离子化四极杆飞行时间串联质谱高分辨测定各有关物质母离子及其子离子的准确质量和元素组成,并解析鉴定他们的结构。结果: 在所建立的二维液相色谱-质谱分析条件下,盐酸伊伐布雷定及其有关物质分离良好,分离并鉴定出盐酸伊伐布雷定及强制降解样品中23个主要有关物质。结论: 研究结果为伊伐布雷定的质量控制提供了参考依据。
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  HPLC-MS/MS法检测盐酸乌拉地尔中基因毒性杂质

  钟澳, 王涵, 黄朋勉, 彭元建, 李铭, 吴沐霖, 黄子涵, 郑文超, 马晓宁

  药物分析杂志. 2025, 45(10): 1826-1832. https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2024-1146

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  目的: 建立HPLC-MS/MS法检测盐酸乌拉地尔中基因毒性杂质双（2-氯乙基）胺盐酸盐和邻甲氧基苯胺盐酸盐。方法: 采用Horizon Amide 18（100 mm×2.1 mm,3 μm）色谱柱,以0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL · min^-1,柱温30 ℃;采用Vanquish-TS Quantis Plus三重四极杆质仪,电喷雾离子源（ESI）,正离子模式采集分析,多反应离子监测模式。结果: 双（2-氯乙基）胺盐酸盐质量浓度在0.47~120 ng · mL^-1范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 7）,检测限为0.24 ng · mL^-1,定量限为0.47 ng · mL^-1,3个浓度水平下加样回收率为75.7%~110.2%（RSD=2.9%~7.8%,n=3）;邻甲氧基苯胺盐酸盐质量浓度在2.34~120 ng · mL^-1范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 9）,检测限为0.59 ng · mL^-1,定量限为2.34 ng · mL^-1,3个浓度水平下加样回收率为79.6%~110.9%（RSD=1.8%~7.9%,n=3）。3批盐酸乌拉地尔样品中双（2-氯乙基）胺盐酸盐的含量分别为0.19、0.17、0.27 μg · g^-1,邻甲氧基苯胺盐酸盐的含量分别为1.54、1.57、2.35 μg · g^-1,均符合规定（<5.48 μg · g^-1）。结论: 该方法快速,专属性强,灵敏度高,准确度好,能够有效地检出盐酸乌拉地尔中双（2-氯乙基）胺盐酸盐和邻甲氧基苯胺盐酸盐的含量。