目的：建立高效液相色谱串联电喷雾检测器（HPLC-CAD）同时测定30批白茅根样品中果糖、葡萄糖和蔗糖的方法，并对不同来源白茅根所测糖类成分的含量进行比较，为其质量标准提高提供依据。方法：采用Xbridge Amide色谱柱（4.6 mm×250 mm，3.5 μm），以乙腈-0.2%三乙胺水（75：25）为流动相，流速1 mL·min^-1，柱温30℃。结果：在建立的液相色谱条件下，上述3个糖类成分分离完全，果糖、葡萄糖、蔗糖进样量分别在2.125~12.749、2.017~12.101、5.274~31.646 μg范围内线性良好；精密度、重复性、稳定性及回收率实验结果均符合含量测定要求，果糖、葡萄糖和蔗糖进样量的平均回收率（n=6）分别为99.8%、99.8%、100.7%。30批白茅根样品中果糖、葡萄糖和蔗糖的含量分别为2.019~63.319、2.835~64.797、1.289~175.816 mg·g^-1。以3个糖为指标，经过系统聚类分析，性状有问题的样本被聚成一类，该类样品中3个糖的含量均比较低，果糖小于17.500 mg·g^-1，葡萄糖低于12.800 mg·g^-1，蔗糖多小于51.900 mg·g^-1；符合《中华人民共和国药典》规定的样本为一类，此类样品中3种糖含量较高，果糖与葡萄糖的含量大于性状有问题的样本。结论：该方法适用于白茅根中果糖、葡萄糖和蔗糖的含量测定，3个糖的测定对白茅根具有一定的鉴别意义。