目的：建立测定桔梗中桔梗炔苷A、桔梗炔苷B和党参炔苷3种聚炔类化合物的HPLC测定方法，并测定我国不同产地桔梗中3种聚炔类化合物的含量。方法：采用加速溶剂萃取法提取，HPLC法测定聚炔类化合物含量。色谱条件：采用依利特Hypersil ODS2（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，流速为1.0 mL·min^-1，检测波长为210 nm。结果：不同产地的桔梗药材中聚炔类化合物含量差别较大。在所测的桔梗药材中，山东潍坊的桔梗含桔梗炔苷A最多，为43.3 μg·g^-1；湖北十堰产的桔梗中桔梗炔苷B含量最高，为82.3 μg·g^-1；四川马尔康的桔梗中党参炔苷含量最高，为461.8 μg·g^-1；山东潍坊产的桔梗3种聚炔类化合物总含量最高，为470.3 μg·g^-1；3种聚炔类化合物最少的都是吉林延边熏硫处理的桔梗。结论：加速溶剂萃取法提取桔梗中聚炔类化合物效果优于超声法、超临界萃取法和渗漉法，且用时最少，适用于聚炔类化合物提取；建立的HPLC方法操作简便，准确可靠，可用于桔梗药材中3种聚炔类化合物含量的测定。在我国不同产地桔梗药材中，桔梗3种聚炔类化合物含量的差异较大，可作为不同产地桔梗质量控制的一种评价指标。