目的：建立HPLC-MS同时测定L-02肝细胞中五味子甲素和五味子乙素的分析方法，并应用于研究2个木脂素成分在L-02肝细胞的摄取过程。方法：以睾丸酮为内标，细胞样品经乙腈沉淀蛋白后进行HPLC-MS分析，采用依利特ODS-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），以乙腈-0.05%甲酸水溶液（45：55）为流动相，流速1.0 mL·min^-1；正离子选择性检测（SIM）模式，选择的检测离子质荷比（m/z）为五味子甲素401.0、五味子乙素417.0和睾丸酮289.0。结果：在L-02肝细胞中，2个木脂素成分在测定的线性范围内线性关系良好（r ≥ 0.9966）；方法的精密度和稳定性RSD均小于15%；回收率为94.99%~100.8%，RSD小于15%，符合化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则。2个木脂素成分均能够被L-02肝细胞所摄取，并呈现先升高后下降的趋势。结论：本文方法应用于研究2种木脂素成分在L-02肝细胞的摄取过程，获得了满意的结果。