目的：采用反相高效液相色谱法对川芎多波长叠加指纹图谱进行研究。方法：采用Poroshell120 EC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×100 mm，2.7μm），以0.1%磷酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相梯度洗脱（0~20 min，10% → 32%的B；20~25 min，32% → 46%的B；25~36 min，46% → 55%的B；36~60 min，55% → 80%的B；60~63 min，80% → 10%的B；63~70 min，10%的B），流速0.8 mL·min^-1，柱温35℃，检测波长230、260、290、320 nm。运用波长叠加技术建立指纹图谱。结果：多波长叠加指纹图谱体现了川芎230、260、290、320 nm特征吸收波长的指纹信息，标定了22个共有峰，16个不同来源的川芎样品与指纹图谱之间具有良好的相似性，相似度均在0.94以上。结论：建立了川芎多波长叠加谱指纹图谱，该指纹图谱信息更加丰富全面，可用于川芎的质量控制。