目的：建立UPLC/Q Exactive MS法测定PC12细胞释放的神经递质多巴胺、去甲肾上腺素和谷氨酸含量。方法：采用Ultimate 3000系列高效液相色谱仪和Q Exactive四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱系统检测。标准品用超纯水溶解后，以乙腈-水（0.1%甲酸，10 mmol·L^-1醋酸铵）（4：96）为流动相，Hypersil GOLD色谱柱分离，通过高分辨质谱的全扫描/选择离子监测（Full MS/SIM）模式进行定性筛查和定量检测。应用Sigma Plot12.0统计软件包进行数据分析。结果：多巴胺和谷氨酸在3~2000ng·mL^-1浓度范围内线性关系良好，最低定量限为3 ng·mL^-1；去甲肾上腺素在100~2000 ng·mL^-1浓度范围内线性关系良好，最低定量限为100 ng·mL^-1；3种神经递质的加标回收率高，精密度RSD均小于5%；常温放置8 h，4℃冷藏7 d后以及-20℃冷冻1个月后稳定性良好。本实验同时在药物肉苁蓉多糖（CDPS）改善学习记忆功能已有研究的基础上，测定PC12细胞给药后3种神经递质不同时间点的释放浓度，结果显示CDPS对3种神经递质释放量有明显促增趋势。结论：UPLC/Q Exactive MS法适合同时测定PC12细胞分泌的多巴胺、去甲肾上腺素和谷氨酸的含量。