目的：建立青蒿素有关物质含量的HPLC检查方法。方法：采用高效液相色谱法对青蒿素原料中有关物质进行定量测定，以CAPCELL PAK C₁₈ MG（4.6 mm×150 mm，5 μm）为色谱柱，以乙腈-水（60：40）为流动相，流速为1.0 mL·min^-1，检测波长为210 nm；采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用技术（UPLC-MS/MS）对实测样品中的主要杂质进行结构确认，离子源为ESI，检测模式为正离子模式。结果：主峰与各杂质分离良好，样品中检测出2个主要杂质。其中，杂质Ⅰ为青蒿烯，杂质Ⅱ可能为青蒿素的异构体。所建立的HPLC方法，青蒿素和青蒿烯的检出限分别为2 μg·mL^-1和0.05 μg·mL^-1，线性范围分别为0.01~0.12 mg·mL^-1和0.000 5~0.01 mg·mL^-1；青蒿烯的平均加样回收率为101.4%，RSD为1.8%；青蒿烯和杂质Ⅱ进样精密度分别为0.6%和1.7%。结论：本法经方法学验证，可用于青蒿素中有关物质的测定。