基因检测

BCR-ABL融合基因检测试剂盒质控品的建立

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  • 1. 中国食品药品检定研究院, 北京 100050;
    2. 河南省医疗器械检验所, 郑州 450003;
    3. 中国科学院北京基因组研究所, 北京 100101;
    4. 大连晶泰医学检验所, 大连 116635

网络出版日期: 2024-05-31

Establishment of control materials for human BCR-ABL fusion gene

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  • 1. National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050, China;
    2. Henan Medical Equipment Inspection Institute, Zhengzhou 450003, China;
    3. Beijing Institute of Genomics Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;
    4. Dalian GenTalker Clinical Laboratory, Dalian 116635, China

Online published: 2024-05-31

摘要

目的:建立BCR-ABL融合基因质控品,评价人类BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能。方法:根据人类BCR-ABL e1a2和e14a2型融合基因mRNA序列,设计覆盖断裂点序列,合成目的融合基因序列。用限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ对含有目的融合基因的质粒和表达载体进行酶切,连接酶切产物。将连接产物转化DH5α感受态细胞,筛选单个阳性菌落进行验证。将正确的单个菌落进行超声诱导,制备假病毒溶液。用荧光逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对假病毒溶液提取的RNA进行检测。结果:PCR结果和测序结果表明成功构建人类BCR-ABL融合基因e1a2和e14a2型假病毒质粒;荧光RT-PCR结果表明构建的e1a2和e14a2型假病毒质粒能够表达目的RNA,并且能被市售试剂盒正确检出,可以作为RNA质控品。结论:本研究建立人类BCR-ABL融合基因RNA质控品,用于评价BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能,为BCR-ABL融合基因相关白血病的临床诊断及靶向治疗提供指导。

本文引用格式

曲守方1, 于婷1, 张娟丽2, 胡小许3, 郭李平3, 赵金银4, 高尚先1, 黄杰1 . BCR-ABL融合基因检测试剂盒质控品的建立[J]. 药物分析杂志, 2016 , 36(9) : 1629 -1633 . DOI: 10.16155/j.0254-1793.2016.09.17

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