目的：建立UPLC-MS同时测定小鼠组织中芦丁、野黄芩苷和半枝莲碱B的分析方法，并对该3种成分在小鼠体内的组织分布进行研究。方法：以2-氰基-3，12-二氧代齐墩果烷-1，9（11）-二烯-28-酸甲酯（CDDO-Me）为内标，通过甲醇沉淀组织样品蛋白，使用LC-MS技术进行定量分析，采用ACQUITY UPLC BEH-C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相，梯度洗脱，正、负离子检测模式，检测离子质荷比（m/z）为芦丁609.2、野黄芩苷463.3、半枝莲碱B558.4和CDDO-Me 506.7。结果：在小鼠肝脏、心脏、脾脏、肺脏、肾脏等组织中，芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B分别在0.005 0~0.160 0、0.004 0~0.133 0、0.003 3~0.106 7 μg·mL^-1的线性范围内线性关系良好（r≥0.991 3）；方法的精密度和稳定性RSD均小于15%；回收率为90.0%~98.4%，RSD小于15%，符合化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则。芦丁等3个成分在小鼠体内分布比较广泛，其中在肝脏和肾脏中分布较多，在肺脏中分布含量最低。结论：本方法经方法学验证，可对小鼠组织中的芦丁、野黄芩苷、半枝莲碱B含量进行测定；在用于小鼠体内化学成分的组织分布研究中，芦丁在肾脏中含量多、脾脏中最少，野黄芩苷在心脏中含量最多、肺脏中最少，半枝莲碱B在肝脏中含量最多、肾脏中最少。