目的：建立高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法（HPAEC-PAD）测定b型流感嗜血杆菌（Hib）结合疫苗的多糖及游离多糖含量。方法：将疫苗中的有效抗原成分-Hib多糖，其结构为多聚磷酸核糖基核糖醇（polyribosylribitol phosphate，PRP），用6 mol·L^-1盐酸进行水解，得到其核糖醇（ribitol）单体；使用CarboPac^® MA1阴离子交换柱（4 mm×250 mm），以580 mmol·L^-1氢氧化钠溶液为流动相，流速为0.4 mL·min^-1，柱温35℃，进样体积100 μL，脉冲安培检测器收集信号，核糖醇的含量以峰面积计算得到，再根据核糖醇占PRP干重的质量分数（41.3%），计算出Hib结合疫苗中PRP及游离多糖（Free PRP）的含量，并评估该方法的重复性和再现性。结果：核糖醇质量浓度在0.075~1.05 μg·mL^-1范围内，与峰面积响应值呈良好的线性关系（r=0.999 9），最低检测限为2.5 ng·mL^-1；标准品供试溶液连续进样6次，峰面积及保留时间的RSD均小于5%；核糖醇加标回收率在80%~120%之间；对来自5个企业的4个不同批次的Hib结合疫苗的PRP及Free PRP含量进行测定，结果均符合规定。结论：本方法在测定Hib结合疫苗的PRP及Free PRP含量时，样品前处理简单，分离效果好，且灵敏度高，结果稳定，可靠，对控制该疫苗的质量具有重要意义。