目的：通过对醋酸亮丙瑞林的杂质谱研究，建立基于杂质谱的有关物质HPLC分析方法。方法：采用全覆盖键合硅胶色谱柱[Sepax GP-C₁₈（150 mm×4.6 mm，3 μm）]，以三乙胺缓冲液-正丙醇乙腈混合溶液为流动相，等度洗脱90 min，流速0.9 mL·min^-1，柱温35℃，检测波长220 nm，进样量20 μL。结果：醋酸亮丙瑞林与各已知杂质及强制破坏产生的降解产物分离良好；杂质B（2-D-His-leuprorelin）和杂质M（缺失肽4-Ser-leuprorelin）质量浓度在0.001~0.02 mg·mL^-1范围内呈良好的线性关系（r² ≥ 0.999，n=6），且校正因子（相对于醋酸亮丙瑞林）均为1.09；杂质B和M的平均回收率（n=9）分别为96.1%和108.3%，RSD分别为1.6%和3.0%；重复性试验杂质B、杂质M和总杂质RSD（n=6）分别为0.85%、1.9%和1.7%；各考察项下进样精密度试验中峰面积的RSD（n=5）最大值为1.4%，保留时间RSD（n=5）最大值为0.34%。经检测表明，稳定工艺的3批产品中，单个杂质均不大于鉴定限0.5%，总杂质均不大于0.6%。结论：本法可用于醋酸亮丙瑞林有关物质的检测。