目的：建立液相色谱-质谱联用方法测定氟胞嘧啶中痕量基因毒性杂质N，N-二甲基苯胺的含量。方法：采用C₁₈（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）色谱柱，以水（含0.1%甲酸）-甲醇（含0.1%甲酸）（95：5）为流动相，流速0.2 mL·min^-1，电喷雾离子化（ESI），正离子模式下MRM采集。结果：N，N-二甲基苯胺质量浓度在0.4~10 ng·mL^-1范围内，与峰面积线性关系良好（r=0.999 5）；检测限为0.1 ng·mL^-1，定量限为0.4ng·mL^-1；平均回收率（n=9）为101.3%。3批样品中N，N-二甲基苯胺的含量均小于0.02 μg·g^-1。结论：本方法可用于氟胞嘧啶中痕量基因毒性杂质N，N-二甲基苯胺含量的检测。