目的：利用wako DNA 提取试剂盒结合荧光定量聚合酶链式反应（PCR）技术，建立重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA 残留量测定的方法并进行验证，用于对该产品进行质量控制。方法：通过wako DNA提取试剂盒提取重组人/门冬胰岛素原料中的宿主残留DNA，再利用SYBRGreen 染料法对样品和标准DNA 进行定量PCR 测定，根据标准曲线对样品中的DNA 残留量进行分析。对建立的方法进行引物特异性以及结果准确性和精密性验证，同时对本室留样的3 批重组人胰岛素原料和3 批重组门冬胰岛素原料中的残留DNA进行测定。结果：该方法检测酿酒酵母菌基因组DNA的最低准确定量质量浓度可达0.137 8 ng·mL^-1，DNA 质量浓度在0.137 8~137 800 ng·mL^-1 范围内，其质量浓度的对数值与Ct 值呈良好线性关系，标准曲线的相关系数（r）为0.994；DNA 提取试剂盒提取不同量的加标样品回收率均在50%~200% 范围内；该方法检测3 批重组人胰岛素原料和3 批重组门冬胰岛素原料中的DNA 残留量均小于10 ng·剂量^-1，符合进口药品注册标准中关于重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA 残留量的要求。结论：wako DNA 提取试剂盒能解决重组人/门冬胰岛素原料中样品前处理的技术难点，与定量PCR 法结合能够简便、快速、准确地对重组人/门冬胰岛素原料中残留的DNA 进行定量测定。