目的：对高效液相色谱法测定美白类化妆品中氢醌、苯酚的色谱条件进行优化。方法：以系统适用性为指标，比较了色谱柱类型、缓冲盐种类及流动相pH 对氢醌、苯酚和化妆品样品分离效果的影响。对优化后色谱条件进行了方法学考察，并在此条件下对抽检的化妆品样品进行测定。结果：最优色谱条件：采用C₁₈（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以10 mmol·L^-1 磷酸二氢钾水溶液（磷酸调pH 3.5）-甲醇为流动相进行梯度洗脱，流速1 mL·min^-1，柱温25 ℃，检测波长280 nm，进样量5 μL。在最优色谱条件下，氢醌质量浓度在0.4~40 μg·mL^-1 范围内，苯酚质量浓度在0.7~70 μg·mL^-1 范围内线性关系良好，相关系数分别为0.999 8 和0.999 9，氢醌、苯酚检测限分别为0.000 5 和0.001 μg，定量限分别为0.002 和0.003 5μg，精密度试验的RSD 分别为0.4%~1.0% 和0.3%~1.8%，回收率分别为98.4%~99.5% 和100.4%~102.2%。对市售的美白祛斑类化妆品200 批进行测定，在本文的样品处理方法下氢醌和苯酚的检出限分别为1 和2μg·g^-1，定量限分别为4 和7 μg·g^-1，杂质峰和目标峰能够实现基线分离、峰形对称。结论：本法测定美白祛斑类化妆品中氢醌、苯酚含量的专属性好，可以为化妆品检验标准的改进提供参考。