目的：建立蒲黄用柠檬黄、酸性黄36染色的定性检查方法。方法：采用TLC法，对染料柠檬黄、酸性黄36进行初步检查；采用HPLC-DAD法进行验证，采用C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以甲醇（A）-0.2 mol·L^-1乙酸铵溶液（B），梯度洗脱（0~10 min，12% A，88% B； 10~15 min，12% A → 90% A，88% B → 10% B； 15~20 min，90% A → 12% A，10% B → 88% B； 20~30 min，12% A，88% B），在428 nm波长检测柠檬黄，在422 nm波长检测酸性黄36；采用HPLC-MS法对2种色素的检出进行确证，采用乙腈-0.02mol·L^-1乙酸铵（35∶65）流动相系统，ESI+扫描模式。结果：薄层色谱斑点清晰，分离度好，专属性较强。HPLC-DAD法供试样品中被检成分与对照品保留时间一致，且UV图谱一致。HPLC-MS法供试样品中相关分子离子峰及碎片特征与2种对照品一致。结论：本文所建立的方法可用于蒲黄用柠檬黄、酸性黄36染色的检查。关键词:蒲黄；柠檬黄；酸性黄36；薄层色谱；高效液相色谱-二极管阵列检测器；高效液相色谱-质谱联用中图分类号：R 917文献标识码：A文章编号：0254-1793（2017）04-0670-07doi：10.16155/j.0254-1793.2017.04.18