目的：建立药用丁基橡胶塞中添加剂［抗氧剂264（2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚，简称BHT）和硫化剂可提取硫］的含量测定方法。方法：以二氯甲烷-无水乙醇为提取溶剂，利用高效液相色谱法对药用丁基橡胶塞的BHT和可提取硫含量进行测定，以含0.1%三氟乙酸的乙腈-含0.1%三氟乙酸的水（90∶10）为流动相，流速1.0 mL·min^-1，检测波长280 nm。结果：抗氧剂BHT的线性检测范围0.41~103.00μg·mL^-1（r²=1.000），可提取硫的线性检测范围0.10~103.50 μg·mL^-1（r²=0.999 9），BHT和可提取硫的平均回收率分别为95.2%和86.8%。测定7批药用胶塞中BHT与可提取硫含量范围分别为4~206 μg·g^-1和1~143μg·g^-1。结论：本文建立的检测方法经方法学验证，可用于考察药用丁基橡胶塞中BHT和可提取硫的含量及质量控制。