目的：建立高效液相色谱-串联质谱法同时测定健脾益肾丸中8个主要成分（丹参素钠、丹酚酸B、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、黄芪甲苷、芒柄花素）的含量。方法：采用ZORBAX C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈（A）-10 mmol·L^-1乙酸铵溶液（B）为流动相，梯度洗脱（0~1.2 min，5% A；1.2~2 min，5% A→20% A；2~4 min，20% A→40% A；4~8 min，40% A；8~10 min，40% A→95% A；10~17 min，95% A；17~25 min，5% A），流速为0.8 mL·min^-1，进样量为5 μL；采用电喷雾离子源（ESI），SIM模式，正负离子同时检测方式。结果：丹参素钠、丹酚酸B、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、黄芪甲苷和芒柄花素检测的线性范围分别为0.04~2.5 μg·mL^-1（r=0.999 7）、0.035~1.0 μg·mL^-1（r=0.999 5）、0.15~20 μg·mL^-1（r=0.999 2）、0.04~20 μg·mL^-1（r=0.999 8）、0.004~2.0 μg·mL^-1（r=0.999 9）、0.06~2.0 μg·mL^-1（r=0.999 4）、0.035~2.5 μg·mL^-1（r=0.999 8）和0.006~0.2（r=0.999 5）μg·mL^-1；精密度、稳定性、重复性试验的RSD小于3%；平均回收率（n=6）均在97.0%~102%范围内，RSD均小于3%。3批样品中丹参素钠、丹酚酸B、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊花糖苷、甘草苷、黄芪甲苷和芒柄花素含量测定结果分别为0.490~0.500、1.792~1.812、0.505~0.511、0.680~0.684、0.609~0.615、0.100~0.110、0.056~0.057和0.020~0.022 mg·g^-1。结论：所建立可作为健脾益肾丸的质量控制提供依据。