目的：建立HPLC-SPD法同时测定九苷肽蛹虫草软胶囊中还原型和氧化型谷胱甘肽的含量。方法：以流动相为提取溶剂对样品进行超声提取；选用Atlantis T3（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以0.1%三氟乙酸-乙腈（95∶5）为流动相，流速1.0 mL·min^-1，紫外检测波长203 nm，柱温35℃。结果：样品中还原型和氧化型谷胱甘肽在8 min内得到很好的分离；质量浓度分别在50.4~504 μg·mL^-1（r=0.999 7）和6.2~62μg·mL^-1（r=0.999 4）线性良好；检测限分别为0.44和0.12 mg·g^-1；平均回收率（n=9）分别为97.5%和93.4%；3批样品中还原型和氧化型谷胱甘肽含量分别是70.2、70.5、70.1 mg·g^-1和1.3、1.4、1.3 mg·g^-1，其含氧化型谷胱甘肽均小于谷胱甘肽总量的2.0%。结论：本方法能够满足日常分析检测的需要，为含谷胱甘肽保健食品的质量控制提供科学依据。