目的：建立HPLC-ELSD同时测定猴头菌丝固体培养物及胃乐宁片中麦角甾醇和β-谷甾醇含量方法。方法：采用Kromasil C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以甲醇为流动相，流速1 mL·min^-1，柱温35℃，检测器为ELSD，漂移管温度70℃，载气压力275.8 kPa。结果：麦角甾醇和β-谷甾醇峰面积的对数与浓度的对数呈良好的线性关系（r>0.999 2），猴头菌丝固体培养物中麦角甾醇和β-谷甾醇平均回收率分别为92.6%和94.1%；胃乐宁片中麦角甾醇和β-谷甾醇平均加样回收率分别为103.0%和94.6%。10批猴头菌丝固体培养物中麦角甾醇和β-谷甾醇的含量分别为0.081~0.178和0.101~0.128 mg·g^-1；10批胃乐宁片中麦角甾醇和β-谷甾醇的含量分别为0~0.252和0~0.380 mg·g^-1。结论：该方法可用于猴头菌丝固体培养物及胃乐宁片质量控制。