目的：建立柴胡药材活性成分含量的HPLC测定方法，考察钴60射线辐照前后活性成分含量的变化。方法：采用C₁₈色谱柱（4.6 mm&#215;250 mm，5 μm），流动相为0.1%磷酸水溶液-乙腈，梯度洗脱，流速1.0 mL&#183;min^-1，检测波长210 nm，柱温30℃。分别选择剂量为5、8、10 kGy对柴胡药材进行辐照，比较辐照前后活性成分含量的变化，并进行成组t检验考察其显著情况。结果：柴胡皂苷a、c、d质量浓度分别在0.020~0.806、0.022~0.893及0.025~1.003 mg&#183;mL^-1范围内有良好线性，平均加样回收率分别为99.4%、98.7%和99.8%；未经辐照的6批柴胡药材中柴胡皂苷a、c、d含量范围分别为3.023~3.245、1.034~1.341和5.023~5.298 mg&#183;g^-1；经10 kGy辐照后，上述3个成分的含量范围分别为2.975~3.226、0.823~0.978和4.963~5.136 mg&#183;g^-1；经过5、8、10 kGy辐照后，柴胡药材所含的成分柴胡皂苷a、c、d均有变化，经成组t-检验，在超过5 kGy后，柴胡皂苷c辐照前后含量变化显著（P<0.01）。结论：所建立的柴胡活性成分测定方法可作为柴胡质控方法。在辐照剂量不超过5 kGy时，各成分变化不显著，可为柴胡药材辐照灭菌手段提供参考。