目的：为维生素D生物活性或类维生素D活性的药物筛选建立体外检测模型。方法：利用分子生物学技术构建了含有荧光素酶报告基因的载体。PCR扩增CYP24A1启动子上下游区域，并插入到含有红色荧光蛋白（red fluorescent protein，RFP）和荧光素酶报告基因（luciferase reporter gene）的pRP-RFP-luciferase载体中。经PCR、双酶切和测序鉴定后，转染至Hela细胞，以RFP的表达反映转染效率，荧光素酶的活性水平反映维生素D药物活性的强弱。结果：经鉴定，构建的荧光素酶报告基因载体转染Hela细胞后有红色荧光表达，荧光素酶报告基因检测可有效反映1，25（OH）₂D₃生物活性。结论：在体外细胞水平上，利用荧光素酶报告基因检测维生素D生物活性的方法简单可行，为后续筛选和研发具有维生素D活性的药物奠定基础。