目的：建立大鼠肝微粒体药物代谢酶体外转化模型，探讨虫草素的体外代谢情况，为规模化制备虫草素的代谢产物提供方法。方法：将虫草素与大鼠肝微粒体药物代谢酶共温孵，用液质联用的方法检测肝微粒体中虫草素代谢产物（2种生物碱类，2种葡萄糖醛酸结合产物，1种谷氨酰胺结合产物）。色谱条件：采用Diamonsil^TM ODS C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱分离，以含0.1%甲酸的甲醇-含0.1%甲酸的水（15：85）为流动相，以0.5 mL·min^-1的流速进行洗脱，洗脱时间为32 min，进样量10 μL；质谱条件：电喷雾离子源（ESI源），正离子模式检测。采用虫草素代谢产物的MS和MS/MS以及MS-DIAL V1.57，MassLynx V4.1和CFM-ID等软件和本项目组建立的数据库来推测其化学结构式。结果：虫草素在大鼠肝微粒体药物代谢酶作用下可以被代谢，并且发现了8个代谢产物，其中鉴定7个代谢产物的分子式。在已鉴定的7个分子式中，确定了4个代谢物的结构式和1个与谷氨酰胺结合的代谢产物，确定的代谢产物分别是4-羧酸咪唑葡萄糖醛酸结合物，3，4，5-三甲氧基氧代四氢呋喃-2-羧酸葡萄糖醛酸结合物，C₆H₅O₂谷氨酰胺结合物，呋喃-2-甲醇葡萄糖醛酸结合物和氧化虫草素。结论：建立的肝微粒体药物代谢酶模型可靠有效，可用于虫草素的体外代谢研究。