目的: 目前国内外尚无针对动物源性医疗器械的免疫原性评价的统一标准。本研究参照ISO10993—20《医疗器械免疫毒性实验原则和方法》以及ASTM相关标准,如ASTMF1905-98《材料致免疫毒性测试方法选择标准规范》等,通过淋巴细胞增殖试验对BSA作为细胞免疫检测阳性物的相关技术问题进行了初步的研究,包括免疫剂量、免疫方式、取材时间等。为动物源性医疗器械的免疫原性评价实现标准化积累数据。 方法: ①实验动物:雌性BALB/c小鼠,8周。②免疫方式及免疫剂量:皮下注射高、中、低3个剂量的BSA(1000,500,100 μg·mL^-1)或BSA与佐剂等量混合物,免疫2~3次,每次间隔2周。③淋巴细胞增殖试验:于不同时间点无菌取脾,分离脾细胞,进行淋巴细胞增殖实验。 结果: ①以BSA单独免疫小鼠,各剂量组OD值与阴性对照组比较差异均无统计学意义。②以BSA混合佐剂免疫小鼠,中、高剂量组OD值明显高于阴性对照组(p<0.05),且呈一定的剂量相关。③2次免疫后2周、3次免疫后2周BSA混合佐剂组OD值均明显高于阴性对照组(p<0.05)。 结论: 将BSA与弗氏佐剂等量混合,以剂量为50~100 μg·只^-1的BSA注射至小鼠皮下,每次间隔2周,2次或3次免疫后2周取材行淋巴细胞增殖试验可获得明显的阳性结果。