目的: 建立白花蛇舌草中车叶草苷的提取分离工艺及车叶草苷的高效液相色谱含量测定方法。 方法: 用硅胶柱层析分离白花蛇舌草醇提取液中的车叶草苷,以甲醇-乙酸乙脂-水(3∶ 3∶ 2;4∶ 3∶ 2;5∶ 3∶ 2;6∶ 3∶ 2;7∶ 3∶ 2;8∶ 3∶ 2;9∶ 3∶ 2;10∶ 3∶ 2)进行洗脱。将馏分(甲醇-乙酸乙脂-水比例4∶ 3∶ 2;5∶ 3∶ 2;6∶ 3∶ 2)合并,经几次硅胶柱层析后再次合并相似馏分,回收洗脱剂,得无色结晶,即车叶草苷;将分离得到的车叶草苷作为对照品,使用HPLC法对白花蛇舌草中车叶草苷的含量进行测定。色谱柱为Kromasil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸(5∶ 95),流速0.8 mL·min^-1,检测波长240 nm,柱温30.0 ℃。 结果: 所得车叶草苷纯度在99%以上;车叶草苷进样量在0.4~2.0 μg范围内线性关系良好(r=0.9998),平均回收率(n=6)为97.7%。 结论: 该方法结果准确、简便,为车叶草苷的提取分离及白花蛇舌草含量测定提供了新方法。