目的: 建立灵敏的液相色谱-串联质谱法测定人血浆中替扎尼定的浓度。 方法: 血浆样品碱化后经乙醚液-液萃取,以甲醇-10 mmol· L-1醋酸铵-甲酸(55∶ 45∶ 0.1,v/v/v)为流动相,采用Zorbax SB C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)分离,通过电喷雾电离源,以选择反应监测(SRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 254→44(替扎尼定)和m/z 243→210(内标,石杉碱甲)。 结果: 测定血浆中替扎尼定方法的线性范围为10.0~5000 pg·mL-1,定量下限可达10.0 pg·mL-1。日内、日间精密度(RSD)均小于10.0%,准确度(RE)在±3.6%以内。 结论: 本方法灵敏度高,血浆用量少,适用于替扎尼定制剂的人体药物动力学研究。
目的: 建立LC-MS/MS 法测定人血浆中氯马斯汀浓度,并进行其药代动力学和生物等效性研究。 方法: 血浆样品以苯海拉明为内标,经提取溶剂 20∶ 1)]萃取后进行LC-MS/MS分析。采用高效液相色谱分离系统,色谱柱为Inertsil Hilic C18 柱(150 mm×3.0 mm,5 μm),流动相为乙腈10 mmol·L-1 醋酸铵溶液)-甲酸(40∶ 60∶ 1)。采用质谱检测系统,ESI离子源,正离子模式,多级反应监测(MRM)方式,m/z 344→215 (氯马斯汀),m/z 256→167 (内标,苯海拉明)。 结果: 在0.01~5.0 ng·mL-1范围内,氯马斯汀血药浓度呈良好的线性关系(r=0.9972),精密度RSD% 均小于10%,准确度在90.8%~102%。 结论: 本测定方法灵敏准确,适用于人血浆中氯马斯汀浓度的测定。
目的: 建立家兔血浆内α-细辛醚的HPLC-荧光测定法,研究α-细辛醚热熔压敏胶贴剂在家兔体内的相对生物利用度。 方法: 家兔给予α-细辛醚混悬液或α-细辛醚贴剂后于不同时间点采血,血浆样品处理后以甲醇-水(75∶ 25)为流动相,使用ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)进行分离,流速1.0 mL·min-1,荧光检测器激发波长为265 nm,检测波长为365 nm,测定血浆药物浓度,计算药物动力学参数和相对生物利用度。 结果: α-细辛醚在浓度0.01~1 μg·mL-1(r=0.9998)范围内线性关系良好,检测限为0.005 μg·mL-1,方法学回收率为96.2%~102.0%,日内与日间RSD均＜4.5%。家兔口服α-细辛醚混悬液后的AUC0→t为(0.53±0.23)μg·h·mL-1,贴剂给药的AUC0→t为(7.86±2.15)μg·h·mL-1,贴剂的相对生物利用度为1494%。 结论: 该法简便准确,可用于家兔血浆内α-细辛醚浓度的测定;α-细辛醚热熔压敏胶贴剂的相对生物利用度高。
<p><b>目的: </b>建立简便、快速的亲水作用色谱串联质谱法(HILIC-MS/MS)测定人血浆中的拉米夫定。 <b>方法: </b>以<sup>13</sup>C<sub>1</sub>,<sup>15</sup>N<sub>2</sub>(拉米夫定为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,采用Luna HILIC(100 mm×3.0 mm,3 μm)柱分离。流动相为乙腈-5 mmol·L<sup>-1</sup>醋酸铵-甲酸(95∶ 5∶ 0.01,<em>v/v/v</em>),进样体积2 μL,样品分析时间3 min。采用ESI源正离子模式、多反应监测(MRM),用于定量分析的离子反应分别为<em>m/z</em> 230 (112(拉米夫定)和<em>m/z</em> 233 (115(内标)。 <b>结果: </b>测定人血浆中拉米夫定的线性范围为8.0~2000 ng·mL<sup>-1</sup>,定量下限为8.0 ng·mL<sup>-1</sup>,日内、日间精密度(RSD)均小于9.0%,准确度(RE)在-7.1%~2.7%之间。本法成功应用于健康受试者口服2种拉米夫定片后的生物等效性研究。 <b>结论: </b>采用稳定同位素内标的HILIC-MS/MS法更为简便、快捷和准确,适用于人血浆样品中拉米夫定的测定。</p>
目的: 建立液相色谱-串联质谱的方法测定Beagle犬血浆中升麻苷H-1的浓度。 方法: 采用20(S)-人参皂苷Rg3为内标,血浆样品经液-液萃取后,以甲醇和水为流动相,梯度洗脱进行分离。通过液相色谱-串联质谱法以多反应监测(MRM)方式检测。用于定量的离子反应分别为m/z 615.5→369.6(升麻苷H-1)和783.5→161.1(内标人参皂苷Rg3)。 结果: 血浆中升麻苷H-1的线性范围为0.5~1000 ng·mL-1,定量下限为0.5 ng·mL-1。在升麻苷H-1浓度为2.0,50,500 ng·mL-1时的提取回收率分别为90.4%,94.0%,89.0%。方法的日内和日间精密度(RSD)分别为5.9%,4.7%,3.8%和10.8%,6.3%,7.8%。 结论: 该方法灵敏、准确,重复性好,可用于Beagle犬血浆中升麻苷H-1的浓度测定。
目的: 研究吗替麦考酚酯(MMF)、麦考酚酸(MPA)在大鼠肠道的吸收特性。 方法: 采用大鼠在体肠吸收实验模型,考察不同药物浓度、不同肠段、不同pH对MMF、MPA肠吸收特性的影响。 结果: MMF在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率常数分别为0.0176,0.0219,0.0311,0.0333 h-1,统计结果显示,不同肠段间吸收有明显差异(P＜0.05);在pH 5.4~7.4范围内,药物吸收不受pH影响;65,135,200,300 μg·mL-1不同浓度MMF的吸收速率常数分别为0.0964,0.1325,0.1655,0.1222h-1,而不同浓度MPA的吸收速率常数基本不变(P＞0.05)。 结论: MMF在整个肠段均有吸收,剂型设计时可考虑缓控释制剂。
目的: 建立UPLC法同时测定山茱萸中没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷和当药苷的含量。 方法: ACQUITY UPLCTMHSS C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm);流动相:乙腈(A)-0.1%甲酸水(B);梯度洗脱(0~3 min,5%A;3~12 min,5%A→20%A);流速:0.2 mL·min-1;检测波长:250 nm;柱温:30 ℃。 结果: 在上述条件下,没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷和当药苷的质量浓度分别在10.50~525.2 μg·mL-1(r=0.9993),10.85~542.5 μg·mL-1(r=0.9994),13.50~652.4 μg·mL-1(r=0.9999),11.85-592.6 μg·mL-1(r=0.9992),5.06~252.8 μg·mL-1(r=0.9991)范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系;低、中、高浓度的平均加样回收率(n=3)均在97.5%~102.5%之间,RSD均小于2.9%。 结论: 该方法简便、快速、准确,重复性好,可用于山茱萸药材的质量控制。
目的: 建立用高效液相色谱法同时测定代温灸膏中主要药效成分肉桂酸、桂皮醛、辣椒碱、二氢辣椒碱及6-姜酚的含量。 方法: 采用Alltima C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长280 nm,柱温30 ℃。 结果: 肉桂酸、桂皮醛、辣椒碱、二氢辣椒碱、6-姜酚浓度分别在5.66~42.45,20.40~153.0,16.20~121.5,10.16~76.20,13.12~98.40 μg·mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。上述化合物的回收率和RSD分别为98.2%,1.4%;100.0%,1.0%;99.2%,1.1%;99.2%,1.2%;100.1%,1.0%。 结论: 该方法能准确、快速分析代温灸膏中5个主要成分,灵敏度高,重现性好,可用于控制代温灸膏的质量。
目的: 建立孕马尿中主要结合雌激素的定性定量方法。 方法: 孕马尿样品通过HPD-400大孔树脂固相萃取处理后,采用银化硅胶薄层色谱法快速鉴别孕马尿中雌酮硫酸钠、马烯雌酮硫酸钠、17α-二氢马烯雌酮硫酸钠3种主要结合雌激素;采用merck整体化柱分离,测定样品中3种主要结合雌激素含量。 结果: 薄层色谱中,供试品色谱与对照品色谱在相应位置显相同颜色的条带,条带清晰,分离效果好,阴性无干扰;建立的含量快速测定方法,3种主要结合雌激素在10 min内可达到完全分离,浓度分别为0.8~6.4 μg · mL-1 (r=0.9996),0.4~3.2 μg · mL-1(r=0.9998),0.3~2.4 μg · mL-1(r=0.9998)线性关系良好,平均回收率分别为96.1%,96.5%,98.2%。 结论: 该方法快速、准确、可靠,适合孕马尿中主要结合雌激素的定性、定量检测,对于孕马尿品质评价具有参考价值。
目的: 建立液相色谱-紫外光谱-离子阱质谱法分析灰黄霉素原料中主要杂质。 方法: 采用反相梯度色谱系统对灰黄霉素溶液进行分离,以紫外检测。对其中的主要杂质采用电喷雾离子阱质谱进行多级质谱分析,鉴定结构。 结果: 经多级质谱解析,鉴定了灰黄霉素原料中的6个杂质,分别为去氯灰黄霉素、去氢灰黄霉素、异灰黄霉素、灰黄霉酸、4-去甲灰黄霉素和6-去甲灰黄霉素。 结论: 本研究为测定灰黄霉素中相关杂质提供了新的分析方法,有助于加强灰黄霉素的质量控制。
目的: 建立高效液相色谱法测定布洛芬及其制剂中的有关物质。 方法: 采用Kromasil C18色谱柱,以甲醇-乙腈-水-甲酸(50∶ 9∶ 41∶ 0.02)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长为214 nm。 结果: 在选定的条件下,布洛芬与其中的10余种杂质分离良好;布洛芬和杂质4-异丁基苯甲酸、4-异丁基苯乙酮的检测限分别为0.16 μg·mL-1、0.093 μg·mL-1、0.18 μg·mL-1;布洛芬在4~64 μg·mL-1,4-异丁基苯甲酸和4-异丁基苯乙酮在0.4~6.4 μg·mL-1范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系;以布洛芬为参比,测得以上2种杂质的校正因子分别为1.68和0.77。 结论: 本法简便、专属、准确,可用于布洛芬及其制剂中有关物质的检查。
目的: 建立重酒石酸去甲肾上腺素有关物质的高效液相色谱-电化学检测方法(HPLC-ECD)。 方法: 采用TSK C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);以0.05%庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调节pH至2.2)-乙腈(925∶ 75)为流动相,玻碳圆盘电极为工作电极,银-氯化银电极为参比电极,工作电位为+0.6 V。 结果: 去甲肾上腺素、肾上腺素、去甲肾上腺酮、多巴胺和2-氯-1-(3,4-二羟基苯基)乙酮均在0.05~5 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9998,0.9999,1.0000,0.9999,0.9994 (n=7);检测限分别为0.07,0.07,0.08,0.1和0.2 ng (S/N≥3)。4种有关物质的平均加样回收率为97.2%,100.4%,98.2%,103.1%;RSD为1.6%,1.5%,1.3%,2.8%(n=6)。 结论: 采用高效液相色谱-电化学检测法测定重酒石酸去甲肾上腺素有关物质,方法灵敏度高,选择性强,重现性好,能够用于重酒石酸去甲肾上腺素的质量控制。
目的: 用优化的cIEF方法分析叶酸受体α单抗(McAb)及其参照品的异构体分布,根据等电点差异,将样品带电荷的异构体分离开来,更好地评价叶酸受体α单抗电荷不均一性。 方法: 毛细管等电聚焦电泳条件:中性涂层的毛细管50 μm×30 cm(有效长度为20 cm);阳极电泳缓冲液200 mmol·L-1磷酸,阴极电泳缓冲液300 mmol·L-1氢氧化钠;聚焦电压25 kV,迁移电压30 kV,温度20 ℃ 检测波长280 nm。 结果: 用优化后的方法使样品的电荷异构体能够有效分离,电泳图谱与参照品电泳图谱一致。样品主峰峰面积百分比为60.59%,等电点为7.78,次主峰面积百分比为24.38%,等电点为7.59,主峰与次主峰分离度为1.185(USP)。连续5针进样,主峰面积百分比的RSD为7.05%,等电点的RSD为0.31%;次主峰面积的百分比RSD为5.99%,等电点的RSD为0.69%;待测样品在12 h内稳定。 结论: 采用优化的cIEF方法分析叶酸受体α单抗的电荷不均一性,具有更高的分离度,更好的重现性,为质量控制提供了更准确的手段。
目的: 建立微流控芯片非接触电导检测法测定盐酸吗啉胍片中盐酸吗啉胍含量。 方法: 在高电场强度条件下利用微流控芯片上特殊的微通道实现组分快速、高效的分离,以非接触电导检测器进行检测;探讨了缓冲液种类和浓度、添加剂种类和浓度、分离电压和进样时间等因素对分离检测的影响。 结果: 优化选择2 mmol·L-1 HAc+2 mmol·L-1 NaAc(pH=4.5)为缓冲溶液,0.3 mmol·L-1十二烷基硫酸钠为添加剂,分离电压为2.20 kV,进样时间为10 s,2 min内可实现盐酸吗啉胍快速分离和检测。在优化条件下,盐酸吗啉胍的线性范围为20~200 μg·mL-1(r=0.9999),检出限为2.0 μg·mL-1(S/N=3),RSD为1.4%,加标回收率为98.3%~101.2%。 结论: 方法简便快速,重复性好,适用于盐酸吗啉胍的快速检测和质量控制。
目的: 建立正相高效液相色谱拆分盐酸普萘洛尔对映异构体的方法。 方法: 采用自行合成的纤维素衍生物大粒径手性固定相,考察了拆分方法,以正己烷-异丙醇-三乙胺溶液(95∶ 5∶ 0.1%) 为流动相,流速0.5 mL·min-1,检测波长为276 nm。 结果: 盐酸普萘洛尔两对映异构体的保留时间分别为8.67 mim、14.36 min,分离度良好;日内、日间精密度的RSD均小于3%。加样回收率在95.5%~101.4%之间,RSD为2.4%。 结论: 结果表明所建立的大粒径纤维素衍生物手性固定相高效液相色谱拆分盐酸普萘洛尔制剂中对映异构体的方法,简便、可靠、高效,可用于盐酸普萘洛尔制剂中对映异构体的测定。
目的: 建立巫山淫羊藿饮片中朝藿定C的含量测定方法及巫山淫羊藿饮片的HPLC特征图谱。 方法: 采用HPLC法对20批巫山淫羊藿饮片进行特征图谱研究,建立HPLC特征图谱共有模式,进行相似度比较,并将巫山淫羊藿饮片与淫羊藿饮片进行相似度比对。色谱条件:采用Welchrom C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温25 ℃。 结果: 朝藿定C进样量在0.0996~4.980 μg(r=0.9996)范围内线性关系良好,巫山淫羊藿饮片羊油炙品和生品中的平均加样回收率(n=6)分别为100.7%(RSD=0.64%)和99.78%(RSD=1.5%);建立了巫山淫羊藿的HPLC特征图谱,确定了5个共有峰,巫山淫羊藿饮片生品和羊油炙品的平均相似度为0.91;巫山淫羊藿饮片与淫羊藿饮片的平均相似度为0.84,二者特征图谱差异明显。 结论: 巫山淫羊藿饮片和淫羊藿饮片特征图谱差异明显,可以作为饮片辨识和鉴别的参考方法。且该方法简便、准确,专属性强,为2010年版中国药典一部增订巫山淫羊藿饮片含量测定项进行了研究。
目的: 建立泽兰及其S-8型大孔树脂精制提取物的HPLC特征图谱,研究饮片与提取物特征图谱的相关性。 方法: 采用Zorbax SB C18色谱柱;流动相为乙腈-体积分数为0.1%的磷酸溶液(梯度洗脱);流速为1.0 mL·min-1;检测波长为330 nm;柱温为40 ℃。 结果: 泽兰饮片及其提取物均标示出20个共有峰,峰2,6,7,13,17为五强峰,峰2为咖啡酸。10批泽兰饮片的相似度为0.961~0.998;10批泽兰提取物的相似度为0.963~0.998;同批次饮片与提取物之间的相似度为0.988~0.998。 结论: 方法准确可靠,重复性好,为泽兰及其提取物的质量控制提供了方法依据,同时为含泽兰复方制剂的质量控制提供了参考。
目的: 采用HPLC法对灯盏花素注射液的特征图谱进行研究。 方法: 采用Zorbax SB C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以0.5%甲酸溶液-甲醇-乙腈为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长330 nm。 结果: 初步建立了由12个共有峰组成的灯盏花素注射液特征图谱,并对89批样品进行了相关系数比较,分析了造成特征图谱差异的可能原因。 结论: 生产工艺的不统一是导致特征图谱差异的主要原因。
目的: 研究木犀草素在4-(2-吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)导电聚合膜修饰玻碳电极上的电化学行为,建立测定木犀草素含量的电化学分析新方法。 方法: 采用循环伏安法研究木犀草素在导电聚合膜修饰玻碳电极上的电化学行为及其电极反应机理,以差示脉冲伏安法建立了检测木犀草素含量的电化学分析新方法。 结果: 在磷酸盐缓冲液(pH 4.0)中,在-0.2~+0.8 V范围内木犀草素在PAR膜修饰电极表面是受吸附控制,发生准可逆单电子转移电极反应过程,电子转移系数α=0.47;在导电聚合膜厚度为40圈(100 mV·s-1),富集电位-0.2 V,富集时间180 s,利用差示脉冲伏安法可测得其氧化峰电流Ip与浓度分别在3.0×10-8~1.0×10-6 mol·L-1内呈良好的线性关系,检出限为1.0×10-8 mol·L-1。 结论: 本法操作简单、快速、灵敏、准确,并可为木犀草素的质量控制提供科学依据。
目的: 考察国产不同成盐注射用阿奇霉素所含杂质谱情况,并对其工艺进行相关性评价。 方法: 以217批注射用阿奇霉素有关物质HPLC检验数据为基础,采用数理统计与化学计量学方法,对其杂质谱及与成盐工艺相关性进行考察,并通过加速实验验证考察结果。 结果: 所检样品中均检出阿奇霉素B(EP-B)和3'-去克拉定糖阿奇霉素(EP-J)杂质,且在不同厂家、不同成盐工艺产品中变化幅度较大,统计标准偏差(SD)分别达2.5和2.0;其他杂质还检出阿奇霉素-N-氧化物(EP-L)、氮红霉素(EP-A)。 结论: 目前国产注射用阿奇霉素中主要杂质为阿奇霉素-N-氧化物、3'-去克拉定糖阿奇霉素、氮红霉素和阿奇霉素B;氮红霉素和阿奇霉素B为工艺杂质,分别源于合成反应残留和起始原料红霉素中红霉素B残留;阿奇霉素-N-氧化物和3'-去克拉定糖阿奇霉素分别为阿奇霉素氧化和酸降解物,其中酸降解物为主要降解形式;不同厂家注射用阿奇霉素中所含杂质的种类、数目及水平均存在较大差异,且与其成盐工艺密切相关。
目的: 建立微波消解－石墨炉原子吸收法测定阿胶中铬的方法;考察商品阿胶中铬的含量。 方法: 采用微波消解法对阿胶样品进行消解,在波长357.9 nm下,通过石墨炉程序升温进行测定,狭缝宽度为0.5 nm,塞曼效应作为背景校正。 结果: 用建立的方法,测得30批市售阿胶样品中铬的含量。 结论: 该方法简便,可行;可用于阿胶中重金属铬的含量测定。
目的: 寻找一种简便有效测定壳寡糖的方法。 方法: 采用Elson-Morgan法、苯酚-硫酸法和3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定壳寡糖含量并进行比较。 结果: Elson-Morgan法不适用于壳寡糖含量的测定;苯酚-硫酸法中盐酸氨基葡萄糖在200~3000 μg范围与吸光度也有很好的线性关系,但苯酚-硫酸法对壳寡糖的测定值较实际值偏大;DNS法测定壳寡糖与实际值接近,平均回收率为96.1%,RSD为2.9%(n=6)。 结论: DNS法操作简单、快速,重现性好,可直接用于壳寡糖含量的测定。
目的: 建立一种血红蛋白氧载体中巯基抗氧化剂的方法。 方法: 研究发现巯基抗氧化剂和聚合血红蛋白之间有一定的吸附作用并且难以分离,因此以血红蛋白为对照品,邻二氮菲-Fe3+为显色剂和氧化剂,在510 nm处直接测定分别含有半胱氨酸、谷胱甘肽和氮-乙酰-半胱氨酸的3种血红蛋白氧载体溶液中这3种巯基抗氧化剂的含量。 结果: 该方法在1×10-6~1.5×10-5 mol·L-1范围内有良好的线性关系,相关系数分别为0.9991,0.9989,0.9985,RSD分别为4.1%,3.4%,3.9%,回收率分别为97.3%±3.5%,96.7%±4.1%,95.5%±4.3%。 结论: 该方法避免了聚合血红蛋白与巯基抗氧化剂的分离并可直接测定血红蛋白氧载体中巯基抗氧化剂含量,是一种简便、准确、回收率高的方法。
目的: 研究建立错位双链聚核苷酸(polyI:C12U)注射液的质控方法。 方法: 采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定碱基比例;采用紫外吸收光谱法测定样品的增色效应、最大吸收波长、OD250/OD260和OD280/OD260;采用琼脂糖电泳法测定相对分子质量范围;其余项目按中国药典三部进行测定。 结果: 建立了该产品的质量检测方法,测得样品的碱基比例C/U为15.8,I/C为1.11;增色效应为63.5%,最大吸收波长为263 nm,OD250/OD260为0.98,OD280/OD260为0.60;相对分子质量分布在100~1000bp范围内。其余各项指标均符合规定。 结论: 建立的检验方法和质量标准为有效地控制错位双链聚核苷酸注射液的质量奠定良好基础。
目的: 建立一种测定缩宫素氨基酸组成的柱前衍生化-HPLC法。 方法: 缩宫素经酸水解产生的游离氨基酸用异硫氰酸苯酯衍生后,以0.1 mol·L-1醋酸钠溶液-乙腈 (97∶ 3,pH 5.20)和乙腈-水(4∶ 1)为二元流动相,流速为1.0 mL·min-1,经RP-C18色谱柱梯度洗脱,于254 nm处测定。通过外标法计算样品的氨基酸组成。 结果: 氨基酸浓度在0.12~0.28 μmol·mL-1范围时与峰面积呈良好的线性关系(r均大于0.999);定量限介于4.73~31.7 ng;回收率范围为90.4%~101.8%,RSD范围为0.25%~3.2%。 结论: 本实验建立的分析方法分离效果好、灵敏、可靠,成功用于缩宫素的氨基酸组成测定研究。
目的: 建立牛奶中三聚氰胺检查的薄层色谱法。 方法: 用固相萃取法制备供试品溶液。使用硅胶G预制板,以丙酮-氯仿-氨水(7∶ 0.5∶ 2)为展开剂,以1%对二甲氨基苯甲醛的盐酸乙醇溶液为显色剂,在紫外灯(365 nm)下检视。 结果: 本法的专属性好,灵敏度高,检测限为0.5 μg,可用于牛奶中微量三聚氰胺的检查,最低检出量为0.5 mg·kg-1。采用本法对3家公司的液态奶进行了检查,结果三聚氰胺含量均低于0.5 mg·kg-1。 结论: 本文建立的方法操作简便快速、灵敏度高、成本低,可用于对大量样品的筛查,特别适用于基层的推广应用。
目的: 建立离子色谱法测定中药西瓜霜硫酸盐的含量。 方法: 采用IonPac® AS11-HC色谱柱和DIONEX ASRS® 300 4-mm抑制器,以30 mmol·L-1氢氧化钠为淋洗液,流速为1.0 mL·min-1,进样量100 μL,电导检测器进行检测,西瓜霜的含量以硫酸钠计。 结果: 硫酸钠进样量在1.1~111.7 μg·mL-1范围内线性关系良好(r=1.000);平均加样回收率为99.9%(n=9)。 结论: 本方法操作简单,灵敏度和准确性较高,可用于西瓜霜的质量控制。
目的: 研究体外兔全血法检测热原的可行性。 方法: 分别将细菌内毒素检查用水(阴性对照)、3种来源的热原质溶液 加入兔全血,在CO2培养箱(37 ℃,5% CO2)内孵育8 h,用酶联免疫分析法(ELISA)检测孵育体系中细胞因子(IL-6)的浓度,以IL-6浓度指示热原质的含量。 结果: 家兔热原检查法对细菌内毒素、酵母多糖及脂磷壁酸的最低检测限为0.5 EU·mL-1、2.0 mg·mL-1及0.5 μg·mL-1,体外兔全血法的最低检测限均大于家兔法。 结论: 以细胞因子(IL-6)为检测指标,体外兔全血法不适用于热原质的检测。
目的: 疫苗制品的无菌检查方法中薄膜过滤法的建立和方法学验证。 方法: 选取5个企业21个品种的疫苗制品,采用薄膜过滤法进行无菌检查,选取金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、生孢梭菌、白色念珠菌和黑曲霉作为验证菌进行方法学验证。 结果: 实验结果表明,疫苗类生物制品对真菌的抑菌作用较细菌更弱,疫苗类生物制品的敏感菌株为枯草芽孢杆菌,含防腐剂硫柳汞的疫苗的抑菌作用较其他类的疫苗更强。采用薄膜过滤法进行试验时,某些疫苗样品由于含氢氧化铝佐剂而不易通过薄膜,可将稀释液更换为磷酸盐缓冲液(pH 6.0),可使其顺利通过滤膜。 结论: 按照不同疫苗制品的特性,将其大致分为三类,并分别建立了无菌检查法。
目的: 建立酶促催化反应中底物十八胺的测定方法。 方法: 采用毛细管气相色谱法,色谱柱为HP-5;载气为氮气;检测器为FID;柱温:初温180 ℃,以5 ℃·min-1升温至240 ℃;外标法计算含量。 结果: 在该色谱条件下,测得线性关系良好(r=0.9993);高、中、低浓度的萃取回收率分别为91.1%,101.6%和95.1%;最低检测限、定量限分别为0.531 mg·L-1、2.125 mg·L-1。 结论: 该毛细管气相色谱法灵敏、准确、可靠,适用于酶促催化反应中底物十八胺的测定。
目的: 测定明胶和吸收性明胶海绵的总蛋白质含量,为控制和提高产品质量提供依据。 方法: 分别用双缩脲法、联喹啉二羧酸法和考马斯亮蓝法测定了明胶和吸收性明胶海绵的总蛋白质含量。 结果: 考马斯亮蓝G250与明胶溶液的显色反应不够灵敏,而与吸收性明胶海绵的水解液不显色。双缩脲法和2,2'-联喹啉-4,4'二羧酸法的测定结果分别为70%~78%和51%~64%。采用上述同一种方法分别测定明胶和吸收性明胶海绵的总蛋白质含量,结果无显著性差异。 结论: 考马斯亮蓝法不适用于明胶和吸收性明胶海绵的总蛋白质含量测定,而双缩脲法和2,2'-联喹啉-4,4'二羧酸法的测定结果具有参考价值。
目的: 对山羊角提取物中的焦谷氨酸进行含量测定研究。 方法: 通过氨基酸自动分析仪及傅立叶变换离子回旋共振质谱确认山羊角提取物中含有焦谷氨酸,并建立专属高效液相色谱方法对焦谷氨酸进行含量检测。色谱条件为:色谱柱为Sionchrom ODS-BP(200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-3.5 mmol·L-1磷酸氢二钠缓冲液(1∶ 99),调pH=3,流速为1.0 mL ·min-1,检测波长205 nm,柱温27 ℃。 结果: 高分辨质谱有m/z 128 离子峰,并且检测出该批山羊角提取物中含有焦谷氨酸7.65%。 结论: 所建立的方法可快速、稳定地检测山羊角提取物中的焦谷氨酸,从而有效提高山羊角提取物的检测标准。
目的: 建立测定头孢氨苄片含量的近红外光谱(NIR)快速分析方法。 方法: 以全国不同企业生产的头孢氨苄片建立校正集,采集其近红外漫反射光谱,经内部交叉验证,建立校正模型,进而对预测集的样品进行分析。 结果: 头孢氨苄糖衣片的浓度范围为0.2569~0.6039 mg·mg-1,头孢氨苄薄膜衣片的浓度范围为0.3478~0.8755 mg·mg-1,内部交叉验证决定系数(r)分别为94.31,97.92,内部交叉验证均方差(RMSECV)为1.98,1.55,外部验证预测均方差(RMSEP)为1.58,1.22,预测值与真值的相关系数为0.9799,0.9894。 结论: 该法具有快速、简便、结果准确的特点,可用于头孢氨苄片药品的快速检验。
目的: 建立八角莲中鬼臼毒素成分GC-EI-MS的定性分析方法。 方法: 取八角莲的根茎粉末、胃组织(pH 3)用乙酸乙酯-正己烷(3∶ 1)提取,离心、浓缩,供GC-EI-MS法定性分析。气相色谱进样口温度为300 ℃,柱温从260 ℃经两步程度升温至315 ℃。质谱在m/z 41~500的范围内采用全扫描,采集时间为10~23 min。 结果: 鬼臼毒素成分最低检测限为0.002 mg·mL-1(S/N≥3);添加鬼臼毒素对照品的平均回收率为86.73%,RSD＝7.2%(n＝5)。在八角莲的根茎粉末、饶某胃组织中均检出鬼臼毒素成分。 结论: 本测定方法可用于鬼臼毒素成分的定性分析。
目的: 探讨现行的蒙脱石散的含量测定方法。 方法: 精密称取蒙脱石散,加入水30 mL,加入10%氯化钙溶液50 μL,充分振摇后,离心(3000 r·min-1)15 min,弃去上清液,重复2次,将内容物转移至已恒重的蒸发皿中,蒸干,105 ℃干燥至恒重,计算即得供试品中含有蒙脱石的重量。 结果: 本方法较现行方法更能准确测定蒙脱石散的含量。 结论: 改进后的方法简单、准确,能控制该制剂的含量。
目的: 建立怀牛膝药材中5-羟甲基糠醛和蜕皮甾酮的高效液相色谱测定方法。 方法: SHIMADZU shim-pack VP-ODS(4.6 mm×250 mm,5 μm)柱,流动相:乙腈-水梯度洗脱,流速:1.0 mL·min-1,柱温:30°C,检测波长:245 nm和279 nm。 结果: 可在2个波长下同时测定5-羟甲基糠醛和蜕皮甾酮的含量,5-羟甲基糠醛的线性范围是0.390~100 μg·mL-1,蜕皮甾酮的线性范围是3.125~100 μg·mL-1。平均回收率分别为100.4%和99.0%。 结论: 该方法灵敏准确,为怀牛膝药材的质量控制提供了新的含量测定方法。
目的: 建立双波长RP-HPLC法同时测定牛黄上清片中黄芩苷和栀子苷含量的方法。 方法: 色谱柱:Hibor C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相:乙腈-0.2%磷酸水溶液,采用梯度洗脱,检测波长:240 nm(栀子苷),278 nm(黄芩苷),柱温:30 ℃。 结果: 栀子苷和黄芩苷进样量分别在0.16~0.96 μg(r=0.9999),0.18~1.08 μg(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为95.6%,96.0%,RSD分别为2.7%,2.5%。 结论: 该法简便、快速、灵敏,可用于牛黄上清片中栀子苷和黄芩苷的含量测定。
目的: 建立中药紫石英X-衍射Fourier指纹图谱。 方法: 对10批主产地的紫石英药材X-衍射Fourier图谱进行分析,建立中药紫石英X-衍射Fourier指纹图谱,并通过相似度计算,区分紫石英、紫石英混淆品、同种化学试剂CaF2。 结果: 中药紫石英X-衍射Fourier指纹图谱具有很好的专属性,与紫石英混淆品、同种化学试剂CaF2的X-衍射Fourier图谱区别显著。 结论: 中药紫石英X-衍射Fourier指纹图谱可全面地、客观地反映出紫石英的内在质量特征,可作为紫石英质量检测与鉴别的手段。
目的: 建立复尔康注射液中挥发性和非挥发性成分HPLC特征图谱。 方法: 以蒿酮为参照物,色谱柱:Dikma Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;分段变波长测定;流速:1 mL·min-1;柱温:30 ℃。 结果: 建立了复尔康注射液的HPLC特征图谱,并标定了33个共有峰,共有峰的参数符合"中药注射剂特征图谱技术要求"的有关规定。 结论: 方法简便,可靠,建立的特征图谱检测标准,能同时控制复尔康注射液中挥发性和非挥发性成分,可作为复尔康注射液质量评价的重要依据之一。
目的: 研究奥硝唑在碳纳米管修饰的玻碳电极上的电化学行为及其测定方法。 方法: 循环伏安法和线性扫描伏安法。 结果: 在0.2 mol.L-1 NH3-NH4Cl缓冲溶液(pH 9.0)和1.2 mol·L-1 NaCl溶液组成的底液中,奥硝唑在-0.62 V(υs.SCE)处出现一灵敏的还原峰,2.0×10-7~3.0×10-5 mol·L-1范围内呈线性关系 (r=0.998),检出限为1.5×10-8 mol·L-1。并用循环伏安法研究了奥硝唑还原峰的电流性质,发现电极反应是完全不可逆的,并存在一定的吸附性。 结论: 利用奥硝唑在碳纳米管修饰的玻碳电极上的还原行为建立的分析方法简便灵敏,结果准确可靠,可用于奥硝唑的质量监控及药代动力学研究。
目的: 建立鳄鱼血SDS-PAGE鉴别方法。 方法: 利用电泳缓冲液制备鳄鱼血、绵羊血、豚鼠血、鸡血、兔血、鹿血等6种动物全血样品液,采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法,对6种动物全血进行鉴别研究。 结果: 以7.5%~11%的梯度分离胶、60 μg蛋白量上样,大板(16 cm×20 cm)进行SDS-PAGE鉴别,6种动物全血的电泳谱带有明显差异,鳄鱼血存在特征条带。 结论: 本方法灵敏度高、专属性强,可作为鳄鱼血与其他动物血的鉴别依据。
目的: 在不改变实验室现行平行双样的检验制度、工作量及检验成本的情况下,提高检验实验室评定不确定度结果的可靠程度。 方法: 利用以前12批次例行检验的重复性数据进行不确定度评定,并与单次数据的不确定度评定结果进行比较。 结果: 历次数据法U=3.6 %,k=2,veff =15;单次数据法U=3.9 %,k=2,veff =0.004。 结论: 历次数据法不确定度评定结果的可靠程度是单次数据法的3750倍。
目的: 提取分离并测定黑翅土白蚁和菌圃中熊果酸的含量。 方法: 大孔树脂吸附法、高效液相色谱法。 结果: 测得熊果酸在0.009~0.015 mg范围内峰面积与浓度线性关系良好,平均回收率为97.1%。所测样品中熊果酸平均含量为0.634 mg·g-1。 结论: 方法简便,可靠,精密度高,稳定性好。
: 在多糖结构分析的诸多方法中,质谱技术被认为是一个重要的不可缺少的手段,其中快原子轰击、电喷雾离子化、基质辅助激光解吸、串联质谱等质谱技术已在多糖结构的分析中有许多成功的应用。
