目的: 建立蛇毒血凝酶纯度测定方法。 方法: 分别采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)和等电聚焦法(IEF),对凝胶考染并扫描;采用体积排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC),使用TSK G3000SW(7.8 mm×300 mm)凝胶柱,流动相为55 mmol·L^-1 柠檬酸钠-0.01%Tween 80溶液;流速0.5 mL·min^-1,检测波长280 nm;采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),使用C₈ Vydac(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相为0.1%三氟乙酸溶液(A)-含0.1%三氟乙酸的90%乙腈(B),梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,;柱温为45℃,检测波长:280 nm。 结果: 4种方法测得蛇毒血凝酶的纯度分别为89.3%,88.5%,95.4%,87.4%。 结论: 对于蛇毒血凝酶纯度测定,非还原SDS-PAGE、IEF及RP-HPLC法均可准确地反映其样品纯度。