蛇毒血凝酶纯度分析方法研究

程速远1,2, 王超众3,4, 李晶2, 梁成罡2, 王凤山1

药物分析杂志 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (8) : 1398-1401.

药物分析杂志 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (8) : 1398-1401.
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蛇毒血凝酶纯度分析方法研究

  • 程速远1,2, 王超众3,4, 李晶2, 梁成罡2, 王凤山1
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Study on the purity analysis method of hemocoagulase

  • CHENG Su-yuan1,2, WANG Chao-zhong3,4, LI Jing2, LIANG Cheng-gang2, WANG Feng-shan1
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摘要

目的: 建立蛇毒血凝酶纯度测定方法。 方法: 分别采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)和等电聚焦法(IEF),对凝胶考染并扫描;采用体积排阻高效液相色谱法(SEC-HPLC),使用TSK G3000SW(7.8 mm×300 mm)凝胶柱,流动相为55 mmol·L-1 柠檬酸钠-0.01%Tween 80溶液;流速0.5 mL·min-1,检测波长280 nm;采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),使用C8 Vydac(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相为0.1%三氟乙酸溶液(A)-含0.1%三氟乙酸的90%乙腈(B),梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1,;柱温为45℃,检测波长:280 nm。 结果: 4种方法测得蛇毒血凝酶的纯度分别为89.3%,88.5%,95.4%,87.4%。 结论: 对于蛇毒血凝酶纯度测定,非还原SDS-PAGE、IEF及RP-HPLC法均可准确地反映其样品纯度。

关键词

蛇毒血凝酶;纯度测定;非还原SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法;等点聚焦;体积排阻高效液相色谱

Key words

Haemocoagulase(HC); purity assay; non-reductive SDS-polyacrylamide gel electrophoresis; isoelectric focusing; size exclusion column-HPLC(SEC-HPLC)

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程速远1,2, 王超众3,4, 李晶2, 梁成罡2, 王凤山1. 蛇毒血凝酶纯度分析方法研究[J]. 药物分析杂志, 2012, 32(8): 1398-1401
CHENG Su-yuan1,2, WANG Chao-zhong3,4, LI Jing2, LIANG Cheng-gang2, WANG Feng-shan1. Study on the purity analysis method of hemocoagulase[J]. Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis, 2012, 32(8): 1398-1401

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