目的: 建立并验证用于大鼠血清、脑脊液、大脑和脊髓中3-(3-吡啶)-1-(4-吡啶)-2-丙烯-1-酮(3PO)含量测定的HPLC-UV法。方法: 样品处理使用蛋白沉淀的方法；色谱条件：色谱柱为Chromolith RP-18e(100 mm×4.6 mm)，流动相A为乙腈-水(2.5∶97.5，v/v)添加0.1%TFA，流动相B为乙腈添加0.1%TFA，梯度洗脱[0~2.3 min，0%B→100%B(线性梯度)；2.3~2.6 min，100%B(等度)；2.6~2.7 min，100%B→0%B(线性梯度)；2.7~5 min，0%B(等度)]，流速2 mL·min^-1，检测波长304 nm，进样量10 μL。结果: 大鼠的血清、脑脊液、大脑和脊髓中内源性物质不干扰3PO的测定，在上述4种基质中，该方法的检测限分别为0.2、0.1、0.1、0.1 μg·mL^-1；定量限分别为0.8、0.2、0.5、0.5 μg·mL^-1；线性范围分别为3~150、0.3~150、0.9~150、0.6~150 μg·mL^-1，相关系数均大于0.999；高、低浓度的回收率均在79.9%~100.3%的范围内；方法重复性(n=5)的RSD均大于0.9%。结论: 建立的方法简单，线性范围宽，且选择性、耐用性均佳。