目的:采用反相高效液相色谱法建立同时测定龟鹿补肾丸中二苯乙烯苷、橙皮苷、朝藿定B和淫羊藿苷含量的方法。方法:采用Diamonsil C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水,梯度洗脱(0~10 min,40%A→55%A;10~14 min,55%→70%A;14~20 min,70%A);流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:270 nm;柱温:35 ℃。结果:二苯乙烯苷、橙皮苷、朝藿定B、淫羊藿苷质量浓度分别在4.20~84.0、3.60~72.0、0.408~8.16、0.552~11.0 μg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9991~0.9996);平均回收率(n=6)分别为99.4%、101.0%、99.7%、98.8%,RSD分别为2.7%、1.2%、2.6%和2.7%。结论:本方法适用于龟鹿补肾丸中二苯乙烯苷、橙皮苷、朝藿定B和淫羊藿苷的含量测定,可为龟鹿补肾丸的质量控制或中药配伍等方面提供相关参考。