LC-MS/MS方法定量测定人血浆中亮氨酸浓度及C-亮氨酸丰度

杨芬, 王洪允, 胡蓓, 江骥

药物分析杂志 ›› 2013, Vol. 33 ›› Issue (8) : 1322-1325.

药物分析杂志 ›› 2013, Vol. 33 ›› Issue (8) : 1322-1325.
生物检定

LC-MS/MS方法定量测定人血浆中亮氨酸浓度及C-亮氨酸丰度

  • 杨芬, 王洪允, 胡蓓, 江骥
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Quantitative determination of leucine concentration and the abundance of C-leucine in human plasma by LC-MS/MS

  • YANG Fen, WANG Hong-yun, HU Bei, JIANG Ji
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摘要

目的:为了考察进食状态下不同时间点氨基酸的氧化分解状态,从而了解机体对氨基酸的需要量,建立了一种灵敏、特异、高效的同时检测血浆中亮氨酸浓度及13C亮氨酸丰度的LC-MS/MS定量分析方法。方法: 用乙腈沉淀蛋白法处理血浆样本。采用Atlantics色谱柱(4.6 mm×100 mm,3.5 μm);流动相为乙腈-水(0.1%甲酸)(5:95),流速为1 mL·min-1,进样量为20 μL。采用串联四极杆质谱在ESI正离子电离模式下,应用多反应监测(MRM)扫描模式测定亮氨酸(m/z 132.1→86.0)和13C-亮氨酸(m/z 133.1→86.0)。样品分析时间为3 min。结果: 血浆中亮氨酸的浓度在50~1000 nmol·mL-1范围内,13C-亮氨酸/亮氨酸的摩尔浓度比值在0.01~0.5范围内线性关系良好(r>0.99),日内、日间精密度和准确度符合要求。稳定性考察项目的结果均符合要求。结论: 本文建立了同时测定血浆中亮氨酸浓度和13C-亮氨酸丰度的LC-MS/MS方法。该方法灵敏度高,特异性好,各项方法学考核的结果均符合要求,可用于考察氨基酸氧化分解状态的临床研究。

关键词

亮氨酸;13C-亮氨酸;氨基酸氧化分解;血浆样品;同位素丰度;多反应监测;液相质谱联用

Key words

leucine; 13C-leucine; oxidative decomposition of amino acid; plasma sample; isotope abundance; MRM; LC-MS/MS

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杨芬, 王洪允, 胡蓓, 江骥. LC-MS/MS方法定量测定人血浆中亮氨酸浓度及C-亮氨酸丰度[J]. 药物分析杂志, 2013, 33(8): 1322-1325
YANG Fen, WANG Hong-yun, HU Bei, JIANG Ji. Quantitative determination of leucine concentration and the abundance of C-leucine in human plasma by LC-MS/MS[J]. Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis, 2013, 33(8): 1322-1325

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