目的:采用高效液相色谱法（HPLC）建立华蟾素胶囊的指纹图谱,并结合化学模式识别技术对其分析评价。方法:采用Kromasil C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;以乙腈-0.5%磷酸二氢钾水溶液为流动相进行梯度洗脱;体积流量0.9 mL·min-1;检测波长296 nm;建立华蟾素胶囊的HPLC指纹图谱。通过相似度评价,结合聚类分析（CA）及偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）对20批华蟾素胶囊的指纹图谱进行分析评价。结果:建立的华蟾素胶囊指纹图谱共标定23个共有峰,经与化学对照品比对鉴定出其中的7个色谱峰;20批样品相似度均大于0.971,通过CA和PLS-DA,20批样品聚成2类,分类结果与生产厂家呈相关性,并发现10个差异性标志物。结论:所建立的HPLC指纹图谱稳定可行,专属性强,可用于华蟾素胶囊的定性定量分析。