2020年, 第40卷, 第7期　
刊出日期：2020-07-25

  

• 全选
  |

综述专论
• Select
  PD-1/PD-L1抗体临床药效标志物和CAR-T细胞临床前药效评价的特点及检测方法

  贺庆霍艳高华王军志

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1139-1149.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  肿瘤免疫疗法是应用免疫学原理和方法,提高肿瘤细胞自身的免疫原性及其对效应细胞杀伤作用的敏感性,激发和增强机体抗肿瘤免疫应答,并应用免疫细胞和效应分子,协同机体免疫系统杀伤肿瘤,抑制肿瘤生长的方法;因其具有抑瘤作用特异性强,毒副作用小,疗效好等特点,日益受到研究者青睐,如何科学控制与反映该疗法的药效作用已成为研究热点。本文针对目前肿瘤免疫疗法的两大类热点产品[抗细胞程序性死亡受体1/细胞程序性死亡配体1(PD-1/PD-L1)抗体药物和嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞]药效研究面临的问题,如抗PD-1/PD-L1抗体药物的整体临床药效反应率偏低,CAR-T细胞治疗实体瘤的临床疗效不尽理想,对抗PD-1/PD-L1抗体药物临床药效标志物和CAR-T细胞临床前药效评价的特点与分析方法、发展面临的挑战及转基因动物在此类产品药效学研究中的应用进行分析,以期为准确预测此类产品的临床药效,提高其疗效提供参考。
• Select
  基于配体结合分析-液相色谱串联质谱技术的生物技术药物定量分析方法研究进展

  桂罗兰1,2,3董立厚2,3宋海峰2向慎思2李黎2,3葛志强1

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1150-1159.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  随着生物技术的发展,蛋白多肽类药物日益增多,对此类药物的定量检测及药代动力学研究变得越来越重要。传统生物技术药物分析方法主要是以配体结合分析(ligand-binding assay,LBA)为主,而液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)技术由于兼具色谱的高分离能力和质谱的高选择性等优点,也已成为生物大分子药物定量分析的有力手段。综合上述2种方法的各自优势,LCMS/MS技术联用LBA技术进行样品前处理,不仅能降低背景的复杂性,还能避免交叉反应,可以大大提高方法的选择性和灵敏度。另外,使用肽水平的免疫捕获可进一步提高分析灵敏度。联合使用配体结合分析-液相色谱串联质谱(hybird LBA with LC-MS/MS,LBA-LC-MS/MS)技术的关键影响因素包括(:1)捕获试剂的亲和力;(2)酶切位点和效率;(3)指纹肽的选择;(4)内标的选择;(5)蛋白质和肽段的纯化;(6)色谱分离;(7)质谱条件的优化。本文综述了近年来研究蛋白多肽类药物药代动力学的各种分析方法,其中LC-MS/MS和毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)-MS联用技术可望成为药代动力学研究中较有前途的分析方法。
• Select
  《药物分析杂志》编辑部声明

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1159-1159.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  <正>本刊采用在线投稿系统,作者稿件一经本刊审核通过,确定录用,可优先数字出版,同时被中国学术期刊网络出版总库等数据库收录,进入因特网提供信息服务,并通过本刊在线系统等实现全文查询。本刊所付稿酬包含刊物内容上网服务报酬,不再另付。
技术研发
• Select
  用于秀丽隐杆线虫毒理学实验的类桥式微流控芯片平台

  李栋基1吴佳颖2李闯1高林耿1何希文1杨光1栾洋2陈翔1

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1160-1168.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:为了解决传统微孔板中线虫毒理实验的试剂消耗量大、人工操作烦琐等问题,搭建半自动化微流控实验平台,进行秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,简称线虫)药物毒性试验。方法:设计并使用MEMS技术制作了一种类桥式微流控芯片,并基于该芯片搭建了一个半自动化微流控平台。以一种有机磷农药久效磷(MCP)作为工具药物,考察平台对于毒性评价研究的可行性。结果:该芯片可将有限条的线虫限制于微流控芯片腔室内而不影响其正常生长运动,由于对腔室的高度做了限制,减少了线虫在Z轴方向上重叠的情况,便于后续的观察和图像处理。基于芯片的微流控平台可以半自动换液以维持药物浓度稳定,并半自动化地保存视频信息。经测试,此微流控平台可实现线虫进样和片上长期培养,结果与传统微孔板培养体系无差异;芯片内毒性测试结果显示MCP对线虫具有明显的生长发育毒性和神经毒性,与经典线虫毒性实验的结果基本一致,表明其可用于药物和线虫相互作用研究。结论:该研制平台的优势在于能实现定时半自动化换液,试剂消耗量与传统微孔板试验相比减少约50%,且便于图像分析线虫生理信息,后期可应用于药物高通量筛选和大量复杂环境化学物的复合暴露毒性测试。
成分分析
• Select
  UPLC-QTRAP-MS分析不同产地茯苓药材中8个三萜酸类成分

  赵秋龙1张丽1卞晓坤1钱大玮1郭盛1严辉1王团结2陈志鹏1段金廒1

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1169-1177.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:建立超高效液相色谱-串联四极杆/线性离子阱质谱法（UPLC-QTRAP-MS法）同时测定不同产地茯苓药材中8个三萜酸类成分（茯苓新酸B、去氢土莫酸、茯苓新酸A、猪苓酸C、去氢茯苓酸、茯苓酸、松苓新酸、去氢齿孔酸）的含量,并比较其差异。方法:采用Acquity UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7μm）,流动相为0.1%甲酸水-乙腈,梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,柱温25℃,以多反应监测（MRM）方法进行质谱扫描,并利用偏最小二乘判别分析（PLS-DA）绘制得分图。结果:8个化合物线性范围良好,相关系数（r2）均大于0.996 9,平均加样回收率在98.1%～101.1%范围内,RSD≤3.2%,经PLS-DA分析,茯苓样品按产地被聚集为3组,并通过变量权重重要性排序（VIP值）图发现茯苓新酸A、去氢土莫酸、去氢茯苓酸、猪苓酸C为3个产地茯苓样品间的主要差异成分。结论:所建立的茯苓药材UPLC-QTRAP-MS质量评价方法可用于茯苓药材的多成分的快速测定及质量控制。
• Select
  红豆杉活性成分筛选的一种新方法的研究

  薛雪1朱龙平2杨得坡2赵志敏2

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1178-1184.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:建立一种新型的药物活性成分筛选方法,用于筛选红豆杉抗肿瘤活性成分群。方法:在细胞正常代谢的基础上,对不同时间段、不同细胞模型的细胞上清液进行液相微萃取处理,对其中的活性成分群进行有效检测,根据色谱峰变化发现潜在活性成分群。将MCF-7、A549细胞作为活性筛选的平台,在细胞自然吸收状态下,以红豆杉提取物为研究对象,对中药材中的活性成分群进行筛选和捕获,而后进行HPLC分析。结果:成功筛选出红豆杉中的抗肿瘤活性成分群分别是脱乙酰巴卡亭、巴卡亭Ⅲ、紫杉碱、去乙酰紫杉醇、三尖杉宁碱、紫杉醇、金松双黄酮、云南紫杉烷。结论:本研究试图为活性成分的筛选、中药质量的综合评价提供一种方便、普适和高效的新方法,为中药药效物质基础研究提供理论基础和实验依据。
• Select
  不同生长年限甘草主要成分含量测定及多元统计分析

  陈佳1张权2杨蕊3尚兴朴2王继永2杜杰2魏锋1马双成1

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1185-1196.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:建立一种分析甘草药材中主要成分的HPLC方法,并结合化学计量学方法对不同生长年限甘草的成分进行比较分析,旨在研究生长年限对栽培甘草的影响。方法:样品经80%乙醇超声提取;采用Agilent 5 TC-C18（2）色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm（检测甘草酸）、280 nm（检测芹糖甘草苷、甘草苷、甘草素）和376 nm（检测芹糖异甘草苷、异甘草苷、新异甘草苷及刺甘草查耳酮）,运用方差分析、相关性分析、主成分分析及聚类分析方法对数据进行统计。结果:不同生长年限甘草中甘草酸、芹糖甘草苷、甘草苷、甘草素、芹糖异甘草苷、异甘草苷、新异甘草苷及刺甘草查耳酮含量具有显著性差异（P<0.001）,甘草素在1年生甘草中含量最高;新异甘草苷在3年生甘草中含量最高;其余6个成分在4年生甘草中含量最高。不同生长年限甘草中甘草酸、芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷及异甘草苷含量互为显著的相关关系（P<0.01）。结论:通过对不同生长年限甘草中主要成分的含量进行化学计量学分析,确定4年生甘草药材质量最佳。建议将芹糖甘草苷、芹糖异甘草苷及异甘草苷纳入甘草药材质量评价指标,以全面控制栽培甘草质量。
• Select
  HPLC法同时测定金线莲中12个核苷类成分的含量

  张勋1张嘉嘉1马迟1邹福贤1,2陈抒云1黄泽豪1林羽1,2徐伟1,2

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1197-1208.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:建立金线莲中12个核苷类成分（胞嘧啶、尿嘧啶、胞苷、鸟嘌呤、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、2′-脱氧鸟苷、β-胸苷、腺苷和2′-脱氧腺苷）含量的HPLC测定方法,并采用聚类分析法比较不同来源金线莲核苷类成分组成和含量差异。方法:采用Uitimate?XB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇（A）-水（B）为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长260 nm,柱温30℃,进样量10μL。采用聚类分析法评价不同批次金线莲中核苷类成分的化学模式。结果:12个核苷类成分质量浓度分别在考察的线性范围内与峰面积呈良好的线性关系（r>0.999 4）;建立的方法精密度、重复性和稳定性良好;加样回收率为95.0%～114.6%（RSD≤4.8%）。对52批金线莲样品中12个核苷类成分进行测定,其含量较高的主要为腺苷、尿苷、鸟苷、胞苷(均值大于300μg·g-1),聚类分析发现不同来源金线莲核苷成分具有4类化学表型,含量之间存在差异。结论:建立的金线莲中12个核苷类成分的含量测定方法准确、可靠,可以为金线莲核苷类多指标质量控制体系提供新的技术手段。
• Select
  一测多评法结合特征图谱的新疆紫草质量控制研究

  李静李耀磊于健东金红宇马双成昝珂姚令文

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1209-1216.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:采用一测多评（QAMS）与特征图谱结合的方法测定紫草中8个羟基萘醌（紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素）的含量,并验证方法的准确性。方法:采用HPLC特征图谱进行色谱峰定位,并以乙酰紫草素为参照物,建立其对紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素的相对校正因子,用该校正因子进行相应成分的含量计算,实现一测多评;同时采用外标法测定新疆紫草中8个羟基萘醌的含量,并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。色谱条件:采用Agilent ZOBAX XDB-Eclipse色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.05%甲酸水溶液（70∶30）,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长275 nm,进样量10μL。结果:建立新疆紫草的特征图谱,标定了8个特征峰;12批样品色谱图的相似度均大于0.90。紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素进样量分别在1.032～412.8μg·mL-1（r=0.999 9）、1.002～400.8μg·mL-1（r=0.999 8）、1.032～412.8μg·mL-1（r=0.999 9）、1.053～421.2μg·mL-1（r=0.999 9）、1.016～406.4μg·mL-1（r=0.999 8）、1.045～418.0μg·mL-1（r=0.999 9）、1.030～412.0μg·mL-1（r=0.999 9）和1.007～402.8μg·mL-1（r=0.999 9）范围内呈现良好线性关系;平均加样回收率（n=6）分别为98.4%（RSD=1.8%）、97.9%（RSD=1.9%）、98.6%（RSD=1.2%）、99.3%（RSD=1.6%）、101.1%（RSD=1.9%）、98.6%（RSD=1.3%）、99.0%（RSD=1.2%）和100.4%（RSD=1.4%）。紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素相对于乙酰紫草素的相对校正因子分别为1.263、1.161、0.938、1.840、1.039、1.138和0.932;且在不同实验条件下重现性良好（RSD<3.0%）;一测多评法的计算结果与外标法实测值之间无显著差异。12批新疆紫草中紫草素、β-羟基异戊酰紫草素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、去氧紫草素、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁、异戊酰紫草素的含量范围分别为0.063%～0.222%、0.011%～0.053%、0.571%～1.621%、0.105%～0.364%、0.011%～0.059%、0.349%～0.727%、0.578%～1.353%和0.720%～1.761%。结论:建立的一测多评法结合特征图谱可用于新疆紫草中8个羟基萘醌类化学成分的含量测定,有效控制新疆紫草质量。
代谢分析
• Select
  LC-MS/MS法测定大鼠血浆中R/S-吗啉硝唑及其在药物-药物相互作用研究中的应用

  汤文玲1沈旭2王俏3吴国兰1,4申屠建中1,4

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1217-1225.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:建立LC-MS/MS分析方法分离、定量大鼠血浆中的R-吗啉硝唑与S-吗啉硝唑,并对吗啉硝唑与丙磺舒、西咪替丁、二甲双胍、替诺福韦联用后R-吗啉硝唑与S-吗啉硝唑的药代动力学变化进行研究。方法:以吗啉硝唑-d8为内标,25μL大鼠血浆样本与5μL内标混合后加75μL甲醇,处理后取上清进行LC-MS/MS定量分析。采用Lux cellulose-4手性柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以水-甲醇（10∶90）为流动相,流速0.6 mL·min-1,柱温30℃,进样量5μL;采用正离子模式,MRM扫描,吗啉硝唑m/z 271.3→m/z 144.3,吗啉硝唑-d8（内标）m/z 279.4→m/z 152.3。大鼠于给药后的不同时间点采集静脉血进行药代动力学分析。结果:R-吗啉硝唑和S-吗啉硝唑质量浓度在5～1 000 ng·mL-1范围内线性良好（r2=0.998 3±0.000 2）,定量下限为5 ng·mL-1,回收率在95.6%～106.6%之间,以RSD表示的日内与日间精密度均小于8.2%,所有稳定性考察项目结果均符合要求。吗啉硝唑与二甲双胍联用后,仅R-吗啉硝唑的tmax参数差异具有统计学意义,与其他药物联用后药代动力学参数无显著变化。结论:本方法可对大鼠血浆中的R-吗啉硝唑和S-吗啉硝唑进行手性分离及定量分析。吗啉硝唑分别与丙磺舒、西咪替丁、二甲双胍、替诺福韦联用后,大鼠血浆中R-吗啉硝唑、S-吗啉硝唑药代动力学未发生显著改变。
• Select
  黄酮类化合物对托莫西汀体外代谢的影响

  梁冰清朱珺郑璐璐

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1226-1235.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法测定体外样品中托莫西汀（ATX）及其活性代谢产物4-羟基托莫西汀（4-HAT）的浓度;研究15个黄酮类化合物对ATX在体外代谢的影响,为体内代谢研究提供一定的实验基础。方法:（1）采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1mm×50 mm,1.7μm）进行色谱分离,以0.1%甲酸-乙腈为流动相,流速0.4 mL·min-1采用电喷雾离子源,正离子模式进行检测,用于定量分析的离子对为m/z 256.3→44（ATX）、m/z 272.3→44（4-HAT）,建立ATX及其活性代谢产物4-HAT的UPLC-MS/MS检测方法。（2）建立ATX大鼠肝微粒体（RLM）孵育体系。分别在孵育体系内加入二甲基亚砜（DMSO）和15个12.5 mmol·L-1黄酮类化合物溶液各1.6μL进行孵育,检测4-HAT的生成量并进行分析与比较。结果:ATX质量浓度在1～100 ng·mL-1范围内与峰面积的线性关系良好（r2=0.999 6）,定量下限为0.2 ng·mL-1（S/N=10）;4-HAT质量浓度在0.01～2.5 ng·mL-1范围内与峰面积的线性关系良好（r2=0.999 3）,定量下限为0.01 ng·mL-1（S/N=10）。15个黄酮类化合物中,杨梅素对ATX的体外代谢影响最显著,表现为抑制作用;与DMSO组相比,其抑制率为93.44%。结论:该方法可用于测定ATX及其活性代谢产物4-HAT的含量;体外实验表明杨梅素对ATX代谢影响最显著。本实验结果可以为体内代谢研究提供一定的实验基础。
• Select
  HPLC法同时测定乳腺癌患者血浆中多柔比星、表柔比星及环磷酰胺的血药浓度

  权会丽曹佳丽程丽娟文迪史贺

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1236-1242.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:建立一种同时测定多柔比星、表柔比星及环磷酰胺血药浓度的方法并考察其在乳腺癌患者血浆中的浓度差异。方法:采用双波长高效液相色谱法,色谱柱为Waters XBridge C18（150 mm×4.6 mm,3.5μm）,流动相为甲醇-0.01 mol·L-1磷酸二氢铵溶液-冰醋酸,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长254nm（多柔比星、表柔比星）、190 nm（环磷酰胺）。选取27例多柔比星、表柔比星联合环磷酰胺治疗方案的乳腺癌患者,检测其血药浓度。结果:多柔比星、表柔比星及环磷酰胺保留时间分别为8.86、9.89及13.95min,血药浓度分别在0.5～50 ng·mL-1、0.5～50 ng·mL-1及0.1～100μg·mL-1范围内呈线性且关系良好,方法回收率均在85.0%以上;日内、日间RSD均<15%,不同剂量多柔比星/表柔比星与同剂量环磷酰胺联合使用,结果发现多柔比星高剂量给药方案组对患者环磷酰胺血药浓度有升高作用,但无统计学差异,表柔比星无此作用。结论:本研究建立了同时检测人血浆中多柔比星、表柔比星及环磷酰胺的方法,并且该方法适用于临床样本的测定,且通过不同剂量多柔比星、表柔比星与环磷酰胺联用,结果发现多柔比星对环磷酰胺血药浓度具有升高作用,但仍需进一步扩大样本量及开展作用机制研究。
活性分析·生物检定
• Select
  基于网络药理学的半边莲-半枝莲药对抗胃癌相关作用机制研究

  黄钲凯1梁明坤2陆飞国2陈广文3梁健1,4

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1243-1253.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:基于网络药理学方法探讨半边莲-半枝莲药对抗胃癌的相关作用机制。方法:利用TCMSP数据库获得半边莲和半枝莲的化学成分及对应作用靶点基因,检索Gene Cards和OMIM数据库获得疾病胃癌相关靶点基因,然后取两者的交集,得到半边莲-半枝莲药对作用于胃癌的预测靶基因。利用Cytoscape 3.7.1软件构建半边莲-半枝莲药对化合物-作用靶点-疾病三者相互关系网络,采用STRING数据库对半边莲-半枝莲药对作用于胃癌的预测靶基因进行蛋白互作网络分析,利用Cytoscape 3.7.1软件的插件Cytohubba筛选出关键基因(hub基因),并利用ONCOMINE数据库分析关键基因在胃癌中的表达情况。利用在线工具DAVID进行GO功能富集分析和利用Cytoscape 3.7.1软件的Clue GO插件进行KEGG信号通路富集分析。结果:共筛选出半边莲-半枝莲药对作用于胃癌的预测靶基因81个,关键靶基因(hub基因)6个,这些关键基因在ONCOMINE数据库的胃癌样本和正常样本中存在显著的表达差异。GO功能富集分析主要涉及RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、凋亡过程的负调控等生物过程;KEGG通路富集分析主要涉及肿瘤通路、PI3K-Akt信号通路、Ras信号通路、p53信号通路等信号通路。结论:本研究初步预测了半边莲-半枝莲药对治疗胃癌的主要作用靶点及多靶点、协同作用、整体调节的作用机制,可为后续进一步深入研究其作用机制提供有益参考。
• Select
  不同来源肝素酶Ⅰ对依诺肝素钠降解作用的研究

  朱梦1李笃信1杨凯歌1李富川2张真庆1

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1254-1261.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:探索不同来源的肝素酶Ⅰ对依诺肝素钠降解特性的差异,以及依诺肝素钠精细结构表征,为此类药物的质量控制提供理论依据。方法:考察3种肝素酶Ⅰ在不同条件下对依诺肝素钠的降解特点,并利用离子交换色谱法纯化降解产物,之后进行质谱和核磁共振分析,获得结构信息,从而阐述降解产物组成和降解效率的差异。结果:不同来源的肝素酶Ⅰ对依诺肝素钠的降解效果不同。大肠杆菌表达体系的融合蛋白肝素酶Ⅰ的降解效率要高于来源于肝素黄杆菌的原生肝素酶Ⅰ,而大肠杆菌表达体系的重组肝素酶Ⅰ效率最低。经离子交换纯化获得数个寡糖,通过结构确认的1个寡糖组分(ΔUA2S-Glc NS6S-Ido A2SGlcNS6S)在第1和第2种酶的降解产物中没有发现,而在第3种酶的降解产物中始终存在。结论:本文比较了3种不同来源肝素酶Ⅰ降解依诺肝素钠过程中的细微差异,为以肝素酶降解为基础的依诺肝素钠结构研究和质量控制提供了有效支持。
安全监测
• Select
  UPLC-MS/MS法测定款冬花炮制前后3个吡咯里西啶生物碱的含量

  李宁1姚令文2刘丽娜2王莹2李耀磊2金红宇2昝珂2马双成2

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1262-1267.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:通过UPLC-MS/MS法比较款冬花蜜炙前后3个吡咯里西啶生物碱（千里光宁碱、N-氧化千里光宁碱和克氏千里光碱）含量的变化。方法:采用CORTECS UPLC C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.6μm）,以含0.05%甲酸和2.5 mmol·L-1甲酸铵的水溶液（A）及含0.05%甲酸和2.5 mmol·L-1甲酸铵的乙腈溶液（B）为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,正离子多反应模式监测,外标法测定。结果:千里光宁碱、N-氧化千里光宁碱和克氏千里光碱质量浓度在1.025～102.5、0.992～99.2和5.040～504.0 ng·mL-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系（r>0.999 0）;平均加样回收率分别为86.5%、92.1%、94.7%,RSD分别为4.1%、3.5%、2.3%。7批款冬花生品中N-氧化千里光宁碱的含量分别为0.942、0.334、0.353、0.536、0.347、0.678、0.552μg·g-1;克氏千里光碱含量分别为44.72、38.62、35.93、45.14、29.57、38.67、42.31μg·g-1;千里光宁碱的含量分别0.464、0.115、0.185、0.125、0.468、0.261、0.122μg·g-1。对应的蜜炙品中N-氧化千里光宁碱含量分别为0.616、0.087、0.237、0.315、0.224、0.553、0.401μg·g-1;克氏千里光碱含量分别为34.33、29.57、25.01、32.66、20.34、26.45、31.54μg·g-1;千里光宁碱的含量分别为0.772、0.357、0.314、0.354、0.574、0.379、0.263μg·g-1。结论:和生品相比,蜜炙后款冬花中N-氧化千里光宁碱和克氏千里光碱呈下降趋势,但千里光宁碱呈上升趋势,N-氧化千里光宁碱部分转化为千里光宁碱。
• Select
  盐酸文拉法辛原料及市售制剂的杂质谱分析

  王茜1,2,3姜红1,2,3周茜2,3刘晨曦2,3赵亚萍2,3

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1268-1276.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:探讨盐酸文拉法辛原料及其制剂杂质情况。方法:采用HPLC法,色谱柱为Inertsil C8（4.6mm×250 mm,5μm）,流动相为0.1 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-乙腈（75∶25）,流速1.2 mL·min-1,紫外检测波长225 nm,分析盐酸文拉法辛原料及制剂的杂质谱,并比较原料间、制剂间的杂质情况。再结合原料合成路线、加速试验及强制降解试验归属杂质来源,并采用UPLC-MS/MS技术确证未知杂质的结构,色谱柱为Inertsil C8（2.1 mm×100 mm,2μm）,流动相为0.01 mol·L-1甲酸铵缓冲液-乙腈（75∶25）,流速0.3 mL·min-1,紫外检测波长225 nm;离子化模式为ESI+,扫描模式为Full scan,扫描范围m/z 110～2 000。结果:盐酸文拉法辛杂质谱显示共检出8个杂质,7个为已知杂质,1个为未知杂质;不同企业间原料、制剂的杂质谱均有差异,同一企业不同剂型的制剂杂质谱也有差异;强制降解试验表明高氧、强酸条件下会降解产生杂质;确定了未知杂质的结构为2-（1-羟基环己基）-2-（4-甲氧基苯基）-N,N-二甲基-1-胺氧化物。结论:盐酸文拉法辛的杂质主要来源于原料的合成过程,应进一步提高原料的生产工艺,以提高产品的质量。
• Select
  反相高效液相色谱法检测丁苯酞原料药中的杂质

  李钦1,2孙明君2王芷2范建国2张树祥2张贵生1

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1277-1283.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:采用反相高效液相色谱法对丁苯酞原料药中的杂质进行分析。方法:采用Agilent ZORBAX plus苯基己基色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈-0.1%（v/v）乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长227 nm,进样量50μL;溶剂为30%乙腈水溶液。结果:丁苯酞及其杂质分离良好;主成分及各杂质的定量下限均小于0.05μg·mL-1,检测下限均小于0.03μg·mL-1;在限度浓度的10%～400%范围内,各杂质的峰面积与浓度呈良好的线性关系;同一批次样品,重复测定6次,已知杂质M峰面积的RSD（n=6）为4.5%,最大未知单杂峰面积的RSD（n=6）为0,杂质总量的RSD（n=6）为3.9%。工艺验证3批样品中均只检测到了1个已知杂质即杂质E,且杂质E含量较低。结论:该方法专属性强,灵敏度高,重复性好,能严格、有效地控制丁苯酞原料药的质量。
• Select
  气相色谱法检测间甲酚中有关物质

  余少文王彩媚陈英

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1284-1291.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:建立检测间甲酚中有关物质的气相色谱法,为其质量控制提供依据。方法:采用以环糊精键合二甲聚硅氧烷为固定相的Agilent CP-ChirasilDex CB（25 m×0.25 mm×0.25μm）气相色谱柱,柱温为程序升温(初始为60℃,以10℃·min-1升温至160℃,保持10 min),以FID为检测器,载气为氮气,流速1.0 mL·min-1,分流比为40∶1,进样口温度250℃,检测器温度250℃;进样量1μL。结果:间甲酚、邻甲酚、对甲酚在5.0～10 000μg·mL-1（r≥0.999 9）,甲苯1.87～468μg·mL-1范围内呈良好的线性关系（r=1.000 0）,甲苯平均加样回收率为101.1%,RSD为1.7%。对甲酚、邻甲酚相对于间甲酚的校正因子分别为1.03及0.97。12批间甲酚样品均未检出甲苯,邻甲酚、对甲酚、其他最大单个杂质及总杂质的含量范围在未检出～0.21%、0.2%～0.8%、0.01%～0.12%和0.3%～0.9%之间。结论:本方法可为间甲酚的质量控制及评价提供依据。
质量分析
• Select
  柱后衍生-荧光检测-HPLC法测定硫酸氨基葡萄糖胶囊的含量和溶出度

  李煜1张淼2孔祥文2洪利娅1

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1292-1299.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:建立硫酸氨基葡萄糖的柱后衍生-荧光检测-HPLC法,并用该法测定硫酸氨基葡萄糖胶囊的含量和溶出度。方法:以高碘酸钠和牛磺酸混合溶液为衍生化试剂,采用RP-HPLC荧光光谱法测定。色谱柱:Waters XBridge Shield RP 18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）;柱温:35℃;流动相:辛烷磺酸钠磷酸缓冲溶液;流速:1.0 mL·min-1;荧光检测器:激发波长350 nm,发射波长430 nm。结果:含量测定方法进样体积为10μL,硫酸氨基葡萄糖的质量浓度在0.25～2.45 mg·mL-1范围内呈线性关系,线性方程为Y=887 656X-12 079（r=0.999 9）;方法定量下限为0.049 mg·mL-1,相当于含量测定供试品溶液浓度的3.9%;平均回收率为99.3%（RSD=1.1%,n=9）。7批样品的含量为97.4%～103.7%。溶出度测定方法进样体积为50μL,硫酸氨基葡萄糖质量浓度在0.028～0.56 mg·mL-1范围内呈线性关系,线性方程为Y=4 326 341X-5 904.5（r=0.999 9）;方法定量下限为0.009 mg·mL-1,相当于溶出度供试品溶液浓度的3.3%;平均回收率为100.0%（RSD=0.40%,n=9）。7批样品的平均溶出量为97%～103%。结论:该方法为硫酸氨基葡萄糖胶囊的质量评价提供了科学依据。
• Select
  HPLC指纹图谱技术结合模式识别分析评价参莲胶囊的质量

  韩晴雯1周斌2李玉平1顾志华1

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1300-1308.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:建立参莲胶囊高效液相色谱（HPLC）指纹图谱,结合系统聚类分析和偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）,为参莲胶囊的质量控制提供一种新方法。方法:选择5个制药厂家生产的25个批次参莲胶囊样品。采用HPLC法,以乙腈（A）-0.05%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,分段检测波长254 nm（0～19 min）、210 nm（19～90 min）,柱温35℃,进样量20μL,建立参莲胶囊的指纹图谱,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012A版）建立指纹图谱共有模式和相似度计算,并用SIMCA14.0软件建立PLS-DA模型进行统计分析。结果:建立了参莲胶囊的HPLC指纹图谱,确定了28个共有峰,相似度计算结果在0.929～0.991之间,通过对照品比对指认出氧化苦参碱、苦参碱、粉防己碱、防己诺林碱、苦杏仁苷、齐墩果酸、熊果酸、补骨脂素、异补骨脂素9个成分。PLS-DA分析显示5个制药厂家25批参莲胶囊样品成分较为一致,但28个共有成分含量存在差异,且与生产厂家呈较好相关性。结论:所建立的指纹图谱方法专属性强,高效快速,可为参莲胶囊的质量控制提供参考。
标准研讨
• Select
  《中华人民共和国药典》中灯盏细辛含量测定方法的优化

  李资磊1唐琼1董媛2张赟华2杜江1张雯洁2

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1309-1318.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:优化《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）中灯盏细辛含量测定项下野黄芩苷的供试品溶液制备方法及色谱条件。方法:对供试品溶液制备方法进行比较;采用DAD检测器对野黄芩苷色谱峰进行峰纯度检查,分离色谱峰中的杂质化合物鉴定其结构,选择能将野黄芩苷与杂质峰分离的色谱条件。结果:采用50%甲醇超声处理制备供试品溶液方法提取更完全且操作简便。《中国药典》灯盏细辛的含量测定项下"野黄芩苷"峰实际是野黄芩苷与飞蓬酯乙的混合峰;以甲醇-四氢呋喃-0.2%磷酸溶液（14∶14∶72）为流动相可使野黄芩苷与飞蓬酯乙完全分离;经方法学验证其线性范围为21.2～424.0μg·mL-1（r=0.999 9）;加样回收率平均值（n=12）为98.7%,RSD为2.1%。结论:优化后的方法较《中国药典》方法测定结果准确,且简便,重复性好,为灯盏细辛质量标准修订提供依据。
• Select
  静电离子色谱法测定草乌药材中新乌头碱、次乌头碱及乌头碱含量

  张玉荣1王瑞忠2,3何轶3张聿梅3鲁静3

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1319-1324.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:优化《中华人民共和国药典》2015年版草乌含量测定项下方法,并测定草乌中新乌头碱、次乌头碱及乌头碱的含量。方法:采用Xcharge C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长235 nm。结果:新乌头碱、次乌头碱及乌头碱的检测下限分别为2.68、3.49和7.14μg·g-1,线性范围分别为20.9～1 045μg·mL-1（r=0.999 9）、15.12～756μg·mL-1（r=0.999 9）、9.43～471.5μg·mL-1（r=0.999 9）,回收率分别为98.3%、97.7%和97.6%;3批样品中新乌头碱、次乌头碱及乌头碱的含量范围分别为3.51～4.85、1.23～1.44、0.40～0.74 mg·g-1。结论:本研究建立的高效液相色谱方法稳定可靠,分析时间短,可用于草乌药材中双酯型生物碱的含量测定。
• Select
  喉舒宁片质量标准的提高

  陈贵夏稷子徐作刚

  药物分析杂志. 2020, 40(7): 1325-1333.

  摘要 ( )   可视化   收藏

  目的:提高喉舒宁片的质量标准。方法:采用TLC法对白花蛇舌草、穿心莲和山芝麻进行定性鉴别;HPLC法测定去乙酰车叶草酸甲酯、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量。白花蛇舌草的定性鉴别采用G型硅胶薄层板,以乙酸乙酯-甲醇-水（8∶2∶1）为展开剂,喷以10%硫酸乙醇溶液并在105℃加热显色,日光下检视;穿心莲的定性鉴别采用GF254型硅胶薄层板,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇（20∶15∶2）为展开剂,在紫外光254 nm下检视;山芝麻的定性鉴别采用G型硅胶薄层板,以甲苯-三氯甲烷-甲酸乙酯（3∶2∶4）为展开剂,喷以磷钼酸试液并在105℃加热至斑点显色,日光下检视。去乙酰车叶草酸甲酯、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的HPLC法含量测定,采用C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈（A）-甲醇（B）-水（C）为流动相,梯度洗脱（0～10 min,0%A,4%B,96%C;10～60 min,0%A→66%A,4%B,96%C→30%C）,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长236nm,进样量10μL。结果:定性鉴别,TLC斑点清晰,阴性无干扰。定量测定,去乙酰车叶草酸甲酯、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯质量浓度分别在0.332 0～16.60μg·mL-1（r=0.999 9）、5.144～257.2μg·mL-1（r=1.000 0）、4.214～210.7μg·mL-1（r=1.000 0）范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为95.1%（RSD=2.6%）、103.0%（RSD=2.5%）、100.9%（RSD=1.7%）;3批样品中去乙酰车叶草酸甲酯、穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量范围分别为0.238～0.311、4.960～5.581、4.541～5.548 mg·g-1。结论:该方法提高了喉舒宁片质量标准,可用于其质量控制。