LC-MS/MS法测定细胞培养液中6个细胞色素P450酶代谢产物的浓度

吴丽颖1张运好1薛改2闫成1

药物分析杂志 ›› 2020, Vol. 40 ›› Issue (9) : 1565-1574.

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代谢分析

LC-MS/MS法测定细胞培养液中6个细胞色素P450酶代谢产物的浓度

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摘要

目的:采用LC-MS/MS法测定细胞培养液中6个酶代谢底物对应代谢产物(1-7二甲基黄嘌呤、7-羟基香豆素、4-羟基美芬妥英、1-羟基咪达唑仑、6-羟基氯唑沙宗、4-羟基甲苯磺丁脲)的浓度。方法:生物样品用液-液萃取法进行预处理;采用Agilent ZORBAX SB-C18(2.1 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(75∶25)为流动相,流速为0.3 mL·min-1,柱温为35℃,硝西泮为内标,通过电喷雾离子化四极杆串联质谱,分别以正、负离子选择反应监测方式(SRM)检测。结果:6个酶代谢产物的线性范围均为1~500 ng·mL-1,定量下限均为1 ng·mL-1;日内和日间RSD分别小于9.9%和10.7%;准确度在92.9%~110.0%;提取回收率为71.9%~98.6%;基质效应为90.1%~106.5%;稳定性良好。结论:该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于细胞培养液中6个CYP450酶代谢产物的测定。

关键词

液相色谱串联质谱; 细胞色素P450; 酶代谢产物; 细胞培养液; 酶活性; 浓度;

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吴丽颖1张运好1薛改2闫成1. LC-MS/MS法测定细胞培养液中6个细胞色素P450酶代谢产物的浓度[J]. 药物分析杂志, 2020, 40(9): 1565-1574

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