目的：采用氨基键合硅胶为固定相的正相高效液相色谱法，研究建立神农丸中士的宁与马钱子碱的含量测定方法，并进行方法学研究。方法：以ZORBAX NH2氨基键合硅胶柱为色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈-异丙醇-3%磷酸溶液（80：10：10）为流动相，以260 nm为检测波长，流速1.0 mL·min^-1，柱温：40℃。结果：士的宁进样量在0.051 2~0.512 μg范围内线性关系良好，回归方程：Y=1 989.6X+3.610，r=0.999 9；马钱子碱进样量在0.057 6~0.576 μg范围内线性关系良好，回归方程：Y=1 932.8X-2.569，r=1.000，士的宁与马钱子碱的平均回收率分别为98.6%、96.7%。结论：本方法操作简便，供试品色谱图基线稳定，主成分峰峰形对称，分离度高，方法的重复性好、准确度高，可用于神农丸中士的宁与马钱子碱的含量测定。