代谢分析

人红细胞内核苷二磷酸激酶的酶学特性及动力学研究

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  • 1. 华中科技大学同济医学院附属协和医院药学部, 武汉 430022;2. 第三军医大学新桥医院内分泌科, 重庆 400037

网络出版日期: 2024-05-31

Kinetic and mechanistic characterizations of human erythrocytic nucleoside diphosphate kinase

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  • 1. Department of Pharmacy, Union Hospital, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430022, China;
    2. Department of Endocrinology, Xinqiao Hospital, Third Military Medical University, Chongqing 400037, China

Online published: 2024-05-31

摘要

目的:探讨人红细胞(RBC)内核苷二磷酸激酶(NDPK)的酶学动力学特性。方法:利用NDPK催化反应底物二磷酸脱氧腺苷、三磷酸脱氧鸟苷生成三磷酸脱氧腺苷及二磷酸脱氧鸟苷(dADP+dGTP↔dATP+dGDP)的酶促反应,通过改变反应温度、热处理温度、pH条件、底物浓度及抑制剂浓度进行NDPK酶学动力学研究。结果:底物动力学研究中,Linewever-Burk双倒数图为两组平行直线。产物抑制动力学研究中,固定反应底物dGTP浓度并改变dADP浓度时,dATP表现为非竞争性抑制作用,固定反应底物dADP浓度并改变dGTP浓度时,dATP表现为竞争性抑制作用。反应遵循乒乓机制。文中实验条件下,NDPK酶促反应最大速度Vmax约为110 μmol·min-1·g-1,KmdADP=1.26 mmol·L-1KmdGTP=1.94 mmol·L-1。dATP抑制常数Ki约为0.34~0.67 mmol·L-1结论:NDPK为酶促反应dADP+dGT dAPT+dGDP的一种高亲和性催化酶。

本文引用格式

杨春晓, 师少军, 沈如飞, 周嘉黎, 罗小梅, 张玉, 刘亚妮 . 人红细胞内核苷二磷酸激酶的酶学特性及动力学研究[J]. 药物分析杂志, 2018 , 38(3) : 385 -392 . DOI: 10.16155/j.0254-1793.2018.03.03

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