目的：建立掌叶大黄超高效液相色谱（UPLC）多指标成分测定及指纹图谱方法。方法：采用C₁₈色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），以乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱，流速0.3 mL·min^-1，检测波长280 nm，测定10批掌叶大黄药材中儿茶素、1-O-没食子酰基-2-O-肉桂酰基-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚5个成分的含量，并建立掌叶大黄药材指纹图谱，采用超高效液相色谱-飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS^E）技术对掌叶大黄的化学成分进行全面定性分析。结果：不同批次药材中5个成分含量差异较大；建立10批掌叶大黄药材UPLC指纹图谱，获得21个共有峰且相似度在0.936~0.985。通过对照品指认、文献比对以及高分辨质谱数据解析，初步鉴定了包括21个共有峰在内的71个化学成分。结论：建立的多成分测定结合指纹图谱分析方法，并利用液质联用技术的定性分析，为掌叶大黄药材的质量控制提供了可行的方法。