生物检定·活性分析

成像毛细管等电聚焦电泳测定单抗等电点的若干影响因素

展开
  • 中国食品药品检定研究院, 卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室, 北京 102629

网络出版日期: 2024-05-31

Several factors on isoelectric point determination of monoclonal antibody by imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis(iCIEF)

Expand
  • National Institutes for Food and Drug Control, Key Laboratory of the Ministry of Health for Research on Quality and Standardization of Biotech Products, Beijing 102629, China

Online published: 2024-05-31

摘要

目的:评价尿素、聚焦时间、pI标记物3个因素对成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)测定抗HER2单抗、抗VEGF单抗主峰等电点结果的影响。方法:应用iCIEF技术,通过添加尿素(2 mol·L-1),改变聚焦时间(6、8、10 min)和pI标记物的数量(2个/6个),对2种单抗制品主峰等电点进行测定。结果:抗HER2单抗使用6个pI标记物,添加终浓度2 mol·L-1的尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为9.01±0.00、9.02±0.01、9.06±0.01;使用6个pI标记物,不添加尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为9.07±0.01、9.08±0.01、9.09±0.01;使用2个pI标记物,主峰等电点范围为9.00~9.14(含尿素)、9.04~9.17(不含尿素)。抗VEGF单抗使用6个pI标记物,添加终浓度2 mol·L-1的尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为8.32±0.00、8.35±0.00、8.35±0.07;使用6个pI标记物,不添加尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为8.39±0.01、8.39±0.02、8.41±0.01;使用2个pI标记物,主峰等电点范围为8.26~8.48(含尿素)、8.34~8.49(不含尿素)。结论:使用iCIEF评价所选单抗等电点时,尿素、聚焦时间两因素对等电点的计算结果影响较小,pI标记物的选择对等电点的计算结果影响明显。

本文引用格式

武刚, 于传飞, 王文波, 王兰 . 成像毛细管等电聚焦电泳测定单抗等电点的若干影响因素[J]. 药物分析杂志, 2018 , 38(10) : 1727 -1732 . DOI: 10.16155/j.0254-1793.2018.10.09

Options
文章导航

/