目的：建立HPLC法测定垂体后叶注射液中赖氨酸升压素及缩宫素的含量，并研究《中华人民共和国药典》2015年版生物效价测定法与本文的HPLC测定法的相关性与等效性。方法：采用C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以磷酸盐缓冲液（pH 6.0）为流动相A，水-乙腈（1：1）为流动相B，梯度洗脱，流速1.0 mL·min^-1，检测波长220 nm，柱温40℃。结果：在上述色谱条件下，赖氨酸升压素峰与缩宫素峰以及相邻杂质峰之间分离度符合要求；赖氨酸升压素与缩宫素浓度分别在0.42~13.33 IU·mL^-1和0.33~21.00 IU·mL^-1范围内线性关系良好，r=0.999 9；平均回收率（n=9）分别为100.5%和99.7%。6批样品中上述2个成分含量范围分别为6.10~6.40 IU·mL^-1和5.63~5.93 IU·mL^-1。用SPSS软件进行相关性分析，结果表明，生物效价法与HPLC法含量测定呈正相关，Pearson系数分别为0.897和0.947。SAS软件等效性分析表明：升压素生物效价法与HPLC法的测定结果具有等效性，而缩宫素的两法测定结果不具有等效性。结论：本法专属性良好，准确度高，重复性好，与生物效价测定法相关性较好，可用于垂体后叶注射液中赖氨酸升压素含量测定。