目的:建立鸡蛋中5种氨基糖苷类药物残留的UPLC-MS/MS检测方法。方法:样品经磷酸盐缓冲液提取,调节pH后,过C₁₈固相萃取小柱净化,氮气吹干后七氟丁酸溶液复溶,进行UPLC-MS/MS分析。色谱柱:BEH C₁₈(50 mm×2.1 mm,1.7 μm);流动相:20 mmol·L^-1七氟丁酸乙腈(A) -20 mmol·L^-1七氟丁酸水溶液(B),梯度洗脱(0~2 min,4% A线性变化至30% A;2~4 min,30% A线性变化至60% A;4~5 min,60% A线性变化至96% A;5~5.5 min,96% A线性变化至4% A;5.5~7.0 min,维持4% A);流速:0.3 mL·min^-1;柱温:30℃;进样量:10 μL。结果:5种氨基糖苷类药物质量浓度在200~1000 ng·mL^-1范围内呈现良好的线性关系,相关系数r均大于0.995;添加500 ng·g^-1时回收率范围为67.9%~79.4%,批内RSD范围为1.03%~4.08%,批间RSD范围为7.77%~16.50%;方法检测限为5 μg·kg^-1,定量限为20 μg·kg^-1。20份实际鸡蛋样品中均未检出5种氨基糖苷类药物。结论:经方法学验证,本方法可用于鸡蛋中氨基糖苷类药物的检测。