目的: 建立银杏叶片剂中5 种小分子有机酸［莽草酸、没食子酸、原儿茶酸、6-羟基犬尿喹啉酸(6-HKA)、对羟基苯甲酸］的一测多评含量测定方法。方法: 采用ZORBAX Eclipse XDB-C8 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以0.1% 磷酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~25 min,3.5%B;25~26 min,3.5%B→70%B;26~35 min,70%B;35~36 min,70%B→3.5%B;36~60 min,3.5%B),流速1 mL·min-1,波长切换测定(0~6 min:215 nm,检测莽草酸、没食子酸;6~60 min:254 nm,检测原儿茶酸、6-HKA、对羟基苯甲酸),柱温30 ℃。以原儿茶酸为内参物,分别建立莽草酸、没食子酸、6-HKA、对羟基苯甲酸的相对校正因子,并对相对校正因子进行重现性考察;采用外标法测定原儿茶酸的含量,利用相对校正因子计算其他4 种小分子有机酸含量,同时采用外标法测定15 批银杏叶片剂中5 种小分子有机酸含量,比较2 种方法的测定结果。结果: 莽草酸、原儿茶酸、没食子酸、6-HKA、对羟基苯甲酸的线性范围分别为43.9~1 097.5、13.2~330.0、141.6~3 540.0、11.3~282.5、12.9~322.5 ng;在以上线性范围内,原儿茶酸与莽草酸、没食子酸、6-HKA、对羟基苯甲酸的相对校正因子分别为1.147 4、0.416 8、0.504 3、0.552 2;且在不同实验条件下重现性良好。15批银杏叶片剂中5 种小分子有机酸含量的计算值(莽草酸0.11%~1.01%,没食子酸0.13%~0.26%,6-HKA0.15%~0.32%,对羟基苯甲酸0.07%~0.18%)与实测值无显著差异。结论: 经方法学验证,本文方法可用于银杏叶片剂中小分子有机酸莽草酸、没食子酸、原儿茶酸、6-羟基犬尿喹啉酸(6-HKA)、对羟基苯甲酸的含量测定。
