目的: 建立玉屏风散多波长、多成分含量测定的HPLC 方法。方法: 采用YMC Hydrosphere C₁₈ 色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈(A)-0.05% 磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,柱温为30 ℃,检测波长300 nm(升麻素苷)、257 nm(毛蕊异黄酮葡萄糖苷)、246 nm(升麻素)、294 nm(5-O-甲基维斯阿米醇苷)、256 nm(亥茅酚苷)、248 nm(毛蕊异黄酮)、249 nm(芒柄花素)、221 nm(白术内酯Ⅲ)、220 nm(白术内酯Ⅰ)、278 nm(白术内酯Ⅱ)。结果: 在所建立色谱条件下各成分的专属性良好,无干扰峰;线性关系良好,均在0.999 5 以上;仪器精密度(n=6)的RSD 均小于2%;方法重复性(n=6)的RSD 均小于2%;48 h 内稳定,RSD 均小于2%;回收率在98%~100%,RSD 均小于2%,回收率较佳。测得升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ的含量平均值分别为0.032%、0.022%、0.012%、0.038%、0.004%、0.009%、0.006%、0.006%、0.005%、0.004%。结论: 经方法学验证,本法可在同一色谱条件下利用不同检测窗口实现多类组分及多个成分的同时测定。