目的：建立发酵虫草制剂中总氨基酸的含量测定方法，同时评价各发酵虫草制剂的质量。方法：采用Zorbax C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙酸钠缓冲液（A）-80%乙腈水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱（0～20 min，100% A→97% A；20～24 min，97% A→88% A；24～30 min，88% A→78% A；30～50 min，78% A→68% A；50～50.5 min，68% A→0% A；50.5～60 min，0% A），流速为1.0 mL·min^-1，柱温为40℃，检测波长254 nm，运用外标法测定发酵虫草制剂中总氨基酸的含量。结果：各发酵虫草制剂的质量评价，对于独家生产的品种（如金水宝胶囊、百令胶囊和心肝宝胶囊），心肝宝胶囊中总氨基酸含量为199.3～224.9 mg·g^-1；金水宝胶囊中总氨基酸含量为224.0～281.7 mg·g^-1；百令胶囊中总氨基酸含量为294.0～346.7 mg·g^-1，样品各批间一致性较好，可以控制总氨基酸含量结合羟脯氨酸（指标成分）占总氨基酸的含量来控制制剂质量。而对于多厂家生产的发酵虫草制剂（如宁心宝胶囊和至灵胶囊），由于生产工艺的不同和原料来源不同，总氨基酸含量差异较大，宁心宝胶囊中总氨基酸含量为234.9～337.1 mg·g^-1，至灵胶囊总氨基酸含量为241.1～356.1 mg·g^-1。结论：经方法学验证，本文方法可用于测定发酵虫草制剂的氨基酸含量，也可用于评价各发酵虫草制剂的质量。