生物检定

S/D残留量对SARS-CoV-2假病毒中和抗体检测方法的影响

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  • 中国食品药品检定研究院, 国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法与标准化重点实验室, 国家药品监督管理局生物制品质量研究与评价重点实验室, 北京 102629

网络出版日期: 2024-05-31

Influence of S/D residue on SARS-CoV-2 neutralizing antibody evaluation

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  • National Institutes for Food and Drug Control, Key Laboratory of the Ministry of Health for Research on Quality and Standardization of Biotech Products, Key Laboratory of Biological Product Quality Research and Evaluation of National Medical Products Administration, Beijing 102629, China

Online published: 2024-05-31

摘要

目的: 评价有机溶剂/表面活性剂(solvent and detergent,S/D)法灭活后S/D残留量对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)的假病毒中和抗体检测方法(pseudotyped virus based neutralization assay,PBNA)的影响。方法: 在严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)和2019冠状病毒病(coronavirus disease,COVID-19)患者恢复期血浆中加入0.1~10倍《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)规定残留标准[100 μg·mL-1聚山梨酯80(吐温80)+10 μg·mL-1磷酸三丁酯(TNBP)]浓度的S/D,模拟灭活后S/D残留量。用PBNA检测加入S/D前后的中和抗体水平,比较S/D对中和方法的影响。将不同浓度的S/D加入到SARS-CoV和SARS-CoV-2假病毒中进行灭活处理1、2和6 h,检测假病毒的滴度,评价S/D对冠状病毒假病毒的灭活效果。结果: 当S/D残留低于《中国药典》残留上限(100 μg·mL-1吐温80+10 μg·mL-1 TNBP)时,SARS-CoV-2中和抗体EC50平均值与无S/D组的PBNA检测结果无统计学差异;当S/D残留大于2.5倍《中国药典》残留标准时,S/D对PBNA有显著影响。含有10 mg·mL-1吐温80+1 mg·mL-1 TNBP的S/D试剂,室温静置1 h即可以灭活SARS-CoV和SARS-CoV-2假病毒,假病毒滴度下降分别达到5.11和4.80 log滴度,其灭活效果随着S/D的浓度下降而下降,S/D浓度为1%时无灭活效果。结论: S/D残留量对SARS-CoV-2的PBNA有显著影响,为保障PBNA的检测准确性,血浆中S/D残留量应不超过《中国药典》规定的标准,S/D试剂具有灭活2种冠状病毒假病毒的作用。

本文引用格式

王萌, 张黎, 李倩倩, 吴佳静, 郝焕, 孙其玉, 聂建辉, 黄维金 . S/D残留量对SARS-CoV-2假病毒中和抗体检测方法的影响[J]. 药物分析杂志, 2020 , 40(4) : 613 -619 . DOI: 10.16155/j.0254-1793.2020.04.05

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