目的：建立HPLC法同时测定复方氨基酸注射液中色氨酸、酪氨酸、乙酰酪氨酸的含量。方法：采用Waters Symmetry^? C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为8 mmol·L^-1磷酸二氢钾溶液-甲醇（9：1），检测波长280 nm，流速1.0 mL·min^-1，柱温35℃。结果：3个氨基酸可完全分离，色氨酸、酪氨酸、乙酰酪氨酸的线性范围分别为12.15～242.96、4.06～81.13、12.36～247.20 μg·mL^-1（r均为0.999 9），回收率分别为98.0%、99.4%、102.0%（n=9）。7家企业生产的复方氨基酸注射液中色氨酸、酪氨酸、乙酰酪氨酸的含量分别为88.7%～113.8%、89.4%～103.1%、89.9%～101.3%，结果均合格。结论：所用方法可同时测定复方氨基酸注射液中3个氨基酸含量，并为现行标准的提高提供可靠依据。