目的：探索⁶⁰Co-γ射线辐照灭菌对六味安消散有效成分的影响及辐照前后指纹图谱的变化，为六味安消散辐照灭菌提供指导依据。方法：采用Agilent XDB-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱，检测波长230 nm；建立六味安消散HPLC指纹图谱，比较0、2、5、10 kGy剂量下⁶⁰Co-γ射线辐照对六味安消散中木香烃内酯、去氢木香烃内酯、芦荟大黄素、大黄素和大黄酚的影响，以及对指纹图谱相似度的影响。结果：当辐照剂量不超过5 kGy时，木香烃内酯、去氢木香烃内酯、大黄素和大黄酚的指纹图谱和含量变化无统计学意义（P>0.05）。结论：⁶⁰Co-γ射线辐照灭菌法对六味安消散有效成分和指纹图谱无影响，可用于六味安消散的灭菌。