目的：对醋酸曲普瑞林缓释注射剂中的未知杂质进行检测和结构确证。方法：采用高效液相色谱法进行杂质分离检测，使用XBridge^? Peptide BEH C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 nm，3.5 μm，300?），以磷酸-三乙胺缓冲液及乙腈-正丙醇为流动相体系，流速1 mL·min^-1，柱温35℃，检测波长210 nm；采用高效液相色谱-线性离子阱串联质谱法（HPLC-LTQ-MS/MS法）对未知杂质进行结构确证，采用Kromasil C₁₈预柱（2.1 mm），柱温30℃，检测波长210 nm，纯水（含0.05%甲酸）为流动相A，甲醇为流动相B，梯度洗脱，流速0.2 mL·min^-1；电喷雾电离源（ESI），正离子模式，扫描范围m/z 150~1 500，毛细管电压35 V，毛细管温度275℃，喷雾电压4 kV，鞘气速度35 arb，辅助气流速10 arb。结果：对3种来源的缓释制剂进行了检测，发现并确证了25种未知杂质的结构，并进行了来源归属，其中工艺杂质有缺失肽、插入肽、光学异构体，降解杂质有氧化杂质、还原杂质、酰化杂质等。结论：不同企业醋酸曲普瑞林缓释注射剂中的杂质与制剂工艺有关，曲普瑞林与辅料聚乳酸聚乙醇酸（PLGA）相互作用生成的酰化杂质，酰化位点为肽链4位丝氨酸残基上的游离羟基。